Comparação dos níveis de neuropilina-1 salivar (NRP-1), cotinina e proteína C reativa (PCR) com parâmetros clínicos periodontais em fumantes e não fumantes com diferentes doenças periodontais

O objetivo deste estudo clínico é comparar os níveis de neuropilina-1 salivar-1 (NRP-1), cotinina e proteína C-reativa (PCR) entre fumantes e não fumantes que são sistemicamente e periodontalmente saudáveis, bem como aqueles com gengivite e periodontite, e para correlacionar-se a biomares com periodontal. O objetivo final é determinar o impacto potencial do tabagismo na saúde e nas doenças periodontais através desses biomarcadores.

"Doenças periodontais" abrangem uma gama de condições inflamatórias crônicas que afetam a gengiva, osso alveolar e os ligamentos periodontais. O processo começa com gengivite, caracterizado por acúmulo bacteriano patogênico sulcular na gengiva, e pode progredir na periodontite, envolvendo a resposta imune do hospedeiro prejudicada e a destruição da ligação do tecido conjuntivo. Inflamação nos tecidos afetados, degradação do tecido conjuntivo e sinalização bioquímica na remodelação dos ossos alveolares contribuem para a morbidade clínica observada.

A gengivite induzida por placa é uma condição inflamatória reversível resultante do acúmulo de biofilme microbiano nos dentes e remoção inadequada. É caracterizado por vermelhidão gengival, inchaço e tendência a sangrar facilmente. Com medidas adequadas de higiene oral, ele pode resolver espontaneamente em aproximadamente uma semana. Em indivíduos suscetíveis, a gengivite pode progredir para periodontite. A periodontite é caracterizada por perda de fixação do tecido conjuntivo e destruição óssea alveolar após uma resposta inflamatória do hospedeiro a patógenos periodontais. Essas destruições levam à formação de bolsos patológicos, aumento da mobilidade, disfunção de mastigação, desconforto do paciente e, finalmente, perda de dente.

O papel de aglomerados específicos de espécies bacterianas na doença periodontal foi estudada usando vários métodos, desde técnicas culturais clássicas até abordagens moleculares, genômicas e proteômicas. Certas espécies bacterianas, como porphyromonas gingivalis, tannerella forsythensis e treponema denticola, estão comumente associadas à doença periodontal. À medida que a doença periodontal avança, o número de bactérias gram-negativas e anaeróbicas na placa dentária aumenta. No entanto, a presença de biofilme microbiana por si só pode não ser suficiente para o desenvolvimento da doença. A doença surge quando o equilíbrio entre o biofilme microbiano e a resposta do hospedeiro é interrompido, levando à disbiose ou uma resposta imune excessiva à presença microbiana.

Durante a infecção periodontal, a liberação de leucotoxinas bacterianas, colagenases, fibrinolisinas e outras proteases contribui para a destruição do tecido. As células epiteliais servem como uma barreira física contra patógenos e iniciam respostas imunes inatas e adaptativas. As células dendríticas de Langerhans no epitélio capturam antígenos microbianos e as transportam para o tecido linfóide para a apresentação em linfócitos. Isto é seguido pela infiltração de neutrófilos, granulócitos e linfócitos na lesão periodontal. Os neutrófilos tentam fagocitose e eliminar bactérias, mas podem ser insuficientes contra o tamanho e a persistência crônica do biofilme microbiano. Essa intensa resposta inflamatória crônica leva à reabsorção óssea alveolar por osteoclastos e degradação de fibras de tecido conjuntivo por metaloproteinases da matriz, resultando em formação de tecido de granulação.

As neuropilinas são glicoproteínas transmembranares expressas em todos os vertebrados, com NRP-1 e NRP-2 identificados como dois genes distintos. O NRP-1 está localizado no cromossomo 10P12, enquanto o NRP-2 está no cromossomo 2. Ambos os genes contêm 17 exons. As neuropilinas carecem de domínios intracelulares da tirosina quinase, mas possuem uma grande região extracelular e uma cauda citoplasmática curta de aproximadamente 40 aminoácidos. As neuropilinas regulam várias funções, incluindo homeostase, angiogênese, arteriogênese, regulação imunológica, inflamação, migração celular durante a inflamação, comunicação com células imunes, câncer e doenças autoimunes. O NRP-1 aumenta a apresentação do antígeno, facilitando as interações entre células dendríticas e células T. É expresso em macrófagos, células dendríticas e especialmente células T. Foi demonstrado que o NRP-1 desempenha um papel na regulação da migração de células endoteliais vasculares. Além disso, o NRP-1 está envolvido na homeostase dos ossos e é expresso em osteoblastos e osteoclastos. O NRP-1 serve como receptor para a semaforina-3a (SEMA3A), fator de crescimento endotelial vascular-A (VEGF-A), VEGF-B, fator de crescimento da placenta (PIGF) e microRNAs.

Na periodontite, há uma resposta imune a patógenos periodontais envolvendo imunidade inata e adaptativa, que pode incluir NRP-1 na interação entre células dendríticas e células T. Um desequilíbrio ou desregulação dessa resposta imune leva a danos excessivos ao tecido e à destruição irreversível do apoio dentário.

Durante a inflamação aguda, várias células, incluindo macrófagos, fibroblastos e células endoteliais, liberam citocinas pró-inflamatórias como IL-6, TNF-α, IL-1β e IL-22. Essas citocinas estimulam o fígado a produzir proteínas de fase aguda (APPS), incluindo amilóide sérica (SAA) e proteína C-reativa (PCR). Os níveis de PCR aumentam rapidamente dentro de 24 a 72 horas em resposta à inflamação ou danos nos tecidos e diminuem após a resolução da inflamação ou infecção. Os níveis elevados de PCR têm sido associados a várias condições inflamatórias, incluindo doenças periodontais.

A saliva contém vários componentes, incluindo eletrólitos, células epiteliais, peptídeos antimicrobianos e enzimas. A análise salivar mostrou propriedades diagnósticas em potencial para identificar biomarcadores periodontais de doenças. A saliva é considerada um fluido diagnóstico atraente para doenças relacionadas ao oral devido à sua coleta não invasiva, facilidade de obtenção e presença de vários biomarcadores.

O estudo envolve 80 participantes sistemicamente saudáveis, incluindo 20 indivíduos não fumantes com periodontium saudável; 20 indivíduos com gengivite; 20 indivíduos com periodontite; e 20 indivíduos fumantes com periodontite. As amostras de saliva foram coletadas de todos os participantes para analisar os níveis de NRP-1, cotinina e PCR usando métodos ELISA (ensaio imunossorvente ligado a enzimas). Também foram registrados parâmetros periodontais clínicos, como profundidade de bolsa de sondagem (PPD), nível de fixação clínica (CAL), sangramento na sondagem (BOP) e índice de placa (PI).

A cotinina, o principal metabólito da nicotina, é amplamente utilizado como um biomarcador de exposição ao tabaco devido à sua meia-vida mais longa (aproximadamente 17 horas) em comparação à nicotina. Os níveis de cotinina em saliva, soro ou urina podem refletir a exposição ativa e passiva do tabaco, tornando -o um indicador confiável para quantificar o status e a intensidade do fumo.

O tabagismo é um fator de risco modificável bem estabelecido para doenças periodontais. Foi demonstrado alterar as respostas imunes do hospedeiro aos desafios microbianos na cavidade oral. O tabagismo afeta várias funções de células imunes, como reduzir a atividade de neutrófilos e fibroblastos, prejudicar a produção de imunoglobulina G (IgG) e diminuir a liberação de fatores de crescimento. Por outro lado, aumenta a expressão de citocinas pró-inflamatórias como PGE2, IL-1β, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10 e IL-15, bem como a prevalência de patógenos periodontais.

A nicotina e seus metabólitos também afetam o ambiente oral, aumentando a colonização bacteriana nas células epiteliais e reduzindo o potencial oxidativo, promovendo condições anaeróbicas que favorecem bactérias patogênicas. Essas mudanças aceleram a progressão da doença periodontal e complicam seu gerenciamento.

Curiosamente, os sinais clínicos de inflamação, como o sangramento na sondagem, podem parecer reduzidos em fumantes devido aos efeitos vasoconstritivos da nicotina, o que limita o fluxo sanguíneo gengival, edema e sinais visuais de inflamação. Apesar disso, a destruição periodontal subjacente pode ser mais severa e progredir despercebido.

Embora a relação entre os níveis de PCR salivar e a doença periodontal tenha sido estudada anteriormente, há uma falta de dados na literatura atual sobre os níveis salivares de NRP-1 no fumo de indivíduos com doença periodontal. Este estudo tem como objetivo preencher essa lacuna examinando como os níveis salivares de NRP-1, cotinina e PCR variam em fumantes versus não fumantes em diferentes status periodontal de saúde e, determinando se o NRP-1 pode servir como um potencial biomarcador para a progressão da doença periodontal influenciada pelo tabagismo.

Em conclusão, este estudo busca elucidar o significado diagnóstico e prognóstico dos níveis de NRP-1 salivar, cotinina e PCR, particularmente no contexto do tabagismo e seu efeito na saúde periodontal. Esses achados podem contribuir para melhorar a avaliação de risco e abordagens personalizadas no diagnóstico periodontal e no planejamento do tratamento.