Impacto das terapias antiglicêmicas e imunossupressoras na netose em diabetes e doenças renais (redes - armadilhas de neutrófilos) (NETs)

2. Pacientes diabéticos (estudo de terapia DM)

• Tamanho da amostra: 20 pacientes diabéticos.

  • Grupo 1: 10 pacientes tratados com forxiga/jardiance (inibidores de SGLT2).
  • Grupo 2: 10 pacientes tratados com ozempic (agonista do GLP-1).

• Critérios do paciente:

  o Pacientes ingênuos aos inibidores de SGLT2 e agonistas do receptor GLP-1 para garantir que os efeitos observados sejam atribuídos ao início dessas terapias.

• Coleção de amostras:

  • Amostras de soro (6 ml em tubos de separador de soro).
  • Dois tubos (total de 12 ml) serão coletados por participante em cada momento:

Antes de iniciar o tratamento e em 1, 2, 3, 6 e 12 meses após o início dos medicamentos.

• Critérios de inclusão:

  • Pacientes diabéticos com 18 anos ou mais (homens e mulheres).
  • Pacientes que não receberam inibidores de SGLT2 anteriormente ou agonistas do receptor GLP-1.

• Critérios de exclusão:

  • Pacientes com condições que afetam a netose, incluindo autoimunidade, doenças hematológicas ou oncológicas ou positivas para HIV ou hepatite B/C.

Pacientes com doença renal crônica (DRC) (Avaliação da terapia imunossupressora)

• Tamanho da amostra: 50 pacientes com DRC com várias etiologias.

• Foco:

  o Esta parte do estudo avaliará especificamente a doença renal mediada por imune, como vasculite associada à ANCA, e os efeitos da terapia imunossupressora na netose.

• Objetivo:

  • Avalie os marcadores de letose (por exemplo, CFDNA, CIT-H3, MPO, NE) antes de iniciar o tratamento imunossupressor e em 1, 2, 3, 6 e 12 meses de terapia.
  • Dinâmica de letose correlacionada com variáveis ​​clínicas, incluindo atividade da doença, função renal e marcadores inflamatórios.

• Coleção de amostras:

  o Amostras de soro (6 ml em tubos de separador de soro).

  o Dois tubos (total de 12 ml) serão coletados por participante em cada momento: antes de iniciar o tratamento e a 1, 2, 3, 6 e 12 meses após o início da medicação.

• Critérios de exclusão:

  • Pacientes com infecções agudas, doenças hematológicas ou oncológicas, ou positivas para HIV ou hepatite B/C.

Grupo de controle

• Tamanho da amostra: 10 participantes saudáveis.

• Objetivo:

  o Sirva como controles para os estudos diabéticos e de DRC.

• Coleção de amostras:
• Dois tubos (total de 12 ml) serão coletados por participante

• Elegibilidade:

  • Indivíduos saudáveis ​​sem condições médicas subjacentes.

• Marcadores de letose: A formação líquida será avaliada em amostras de sangue de soros em todos os grupos.
• Concentre-se em pacientes ingênuos: a ênfase será colocada na avaliação dos efeitos iniciais dos medicamentos antiglicêmicos em pacientes diabéticos e o impacto da terapia imunossupressora em pacientes com DRC com doenças imunes mediadas.
• As amostras serão coletadas em intervalos idênticos e comparados entre os grupos diabéticos e ckd, para avaliar as diferenças nos níveis de letose ao longo do tempo (controles- apenas marcadores de letose basal) e em resposta ao tratamento.

Todas as amostras de soro serão diluídas 1: 2 e a histona h3 citrulinada (CITH3) serão quantificadas usando o kit Citrulination Histona H3 ELISA: O.D. (501620; Cayman Chemical, Ann Arbor, EUA).

As amostras serão coletadas em intervalos idênticos e comparados entre os grupos diabéticos e ckd, para avaliar as diferenças nos níveis de letose ao longo do tempo (controles- apenas marcadores de letose basal) e em resposta ao tratamento.

Todas as amostras de soro serão diluídas 1: 2. A medição de MPO será realizada usando o kit mieloperoxidase ELISA, ng/ml (501410; Cayman Chemical).

As amostras serão coletadas em intervalos idênticos e comparados entre os grupos diabéticos e ckd, para avaliar as diferenças nos níveis de letose ao longo do tempo (controles- apenas marcadores de letose basal) e em resposta ao tratamento.

Todas as amostras de soro serão diluídas 1: 2, e a medição de NE será realizada usando o kit de elastase neutrófilos humanos, ng/ml (AB204730; Abcam

As amostras serão coletadas em intervalos idênticos e comparados entre os grupos diabéticos e ckd, para avaliar as diferenças nos níveis de letose ao longo do tempo (controles- apenas marcadores de letose basal) e em resposta ao tratamento.

Todas as amostras de soro serão diluídas 1: 2 e a medição PAD4 serão realizadas usando (Kit Padi4 ELISA, NG/ML (ELH-PADI4, Raybiotech) de acordo com as instruções do fabricante

1. Função renal

• A taxa de filtração glomerular estimada (EGFR, ML/min) será medida usando a equação da creatinina CKD-EPI).
• Essas medidas monitorarão as alterações na função renal ao longo do tempo e serão correlacionadas com os marcadores de letose avaliados antes e durante o tratamento.

A proporção da proteína/ creatinina W (mg/ gr) será medida.

o Essas medidas monitorarão as mudanças na função renal ao longo do tempo e serão correlacionadas com os marcadores de netose avaliados antes e durante o tratamento

Principais eventos cardiovasculares adversos (MACE): incluindo infarto do miocárdio, derrame, insuficiência cardíaca e morte cardiovascular (presente/ausente).

• Análises anuais avaliarão a ocorrência desses eventos em relação aos marcadores de netose

Mortalidade por todas as causas: Os resultados da sobrevivência serão rastreados por meio de análises anuais.

• As correlações serão traçadas entre marcadores de letose e taxas de mortalidade para entender seu valor preditivo e efeitos do tratamento. Esses resultados secundários destacarão a associação entre letose e resultados renais e cardiovasculares de longo prazo