Papel da barreira hematoencefálica na resiliência ao estresse: investigando novos caminhos para o aumento farmacológico da resiliência ao estresse (PHASR-PP)

Desenho do estudo

Prospective, randomized, parallel-group, placebo-controlled, double-blind, multi-center experimental study to investigate the relationship between individual variation in BBB integrity and individual variation in stress resilience in young healthy adult participants at risk for stress-related mental health problems, making use of a 12-week oral administration of Metformin (850 mg twice daily at full dose) as an experimental tool to enhance individual variation in BBB integrity (manipulação experimental). A duração do estudo para um participante será de 36 semanas no total. Os participantes serão avaliados em três locais de estudo diferentes (ou seja, Mainz, Alemanha, Zurique, Suíça, Varsóvia, Polônia).

O estudo é dividido em 10 fases de 4 semanas cada, e possui o seguinte fluxo de estudo e esquema de intervenção:

• Fase de triagem: os participantes em potencial serão examinados e avaliados quanto à elegibilidade. Se elegível, o consentimento informado será obtido.
• Ponto de tempo T0, semana 1 - linha de base: exame médico, amostragem de sangue, randomização, neuroimagem, questionários, distribuição do medicamento do estudo. Início do monitoramento on -line da exposição ao estressor e da saúde mental, que os participantes realizarão a cada quatro semanas (pontos no tempo T0 a T9), durante todo o estudo.
• Pontos de tempo T0 a T3, semana 1 - 12 - Fase de manipulação experimental: quatro semanas de aumento da dose (T0 para T1), isto é, primeira e segunda semana 500 mg uma vez ao dia, terceira e quarta semana 500 mg duas vezes ao dia. Administração de dose total (850 mg duas vezes ao dia) por oito semanas (T1 a T3).
• Ponto de tempo T3, semana 12 - Fim da manipulação experimental: exame médico, amostragem de sangue, neuroimagem e questionários. Monitoramento de eventos adversos (AE).
• Pontos de tempo T4 a T9, semana 12 a 36-Acompanhamento: separado no período de acompanhamento precoce (T4 a T6) e tardio (T7 a T9).
• Time Point T9, semana 36 - Fim do acompanhamento: exame médico, amostragem de sangue, questionários e monitoramento de EA.

Medidas de resultado

A resiliência ao estresse é quantificada como reatividade do estressor inverso (SR). A resiliência ao estresse a curto prazo é a pontuação média de SR inversa nas 12 semanas após a fase de manipulação experimental (monitoramento on-line dos pontos de tempo T4 a T6). A resiliência ao estresse a longo prazo é a pontuação média de SR inversa nas 24 semanas após a fase de manipulação experimental (pontos de tempo T4 a T9). SR is calculated as an individual's deviation (residual) from a regression of mental health problems [z-standardized sum score of anxiety and depression symptoms, as assessed with the Patient Health Questionnaire - Anxiety and Depression Scale (PHQ-ADS) during online monitoring] on stressor exposure [z-scored sum of occurrences of all daily hassles (DHs), as assessed with the Mainz Inventory of Microstressors (MIMIS) during online monitoramento] na amostra do estudo.

A integridade do BBB do cérebro inteiro é quantificada como taxa inversa de troca de água do cérebro inteiro (KW) do sangue para o tecido cerebral (permeabilidade BBB), conforme avaliado com a neuroimagem antes (ponto de tempo T0) e após a fase experimental de manipulação (ponto de tempo T3).

Calculando a pontuação SR

Para construir a pontuação de SR, primeiro, a pontuação do estressor de exposição e é calculada para cada ponto de tempo de monitoramento de quatro semanas após T0 (T1 a T9) como a soma de ocorrência de todos os aborrecimentos diários (DHS), avaliada com os MIMIs. A ocorrência de eventos de vida (LE), avaliada com uma lista de eventos de vida, deve ser menos frequente que a ocorrência de DH, mas, se relatada, espera-se correlacionar-se com a ocorrência de DH. Isso será usado para corroborar a validade da pontuação E baseada em DH. Para cada ponto de tempo de monitoramento, uma pontuação do problema de saúde mental P também é calculada como a pontuação da soma padrão Z dos sintomas de ansiedade e depressão, conforme avaliado com o PHQ-ADS. Para quantificar como os problemas de saúde mental dos participantes se relacionam com a exposição ao estressor, os pesquisadores calculam a relação entre E e P na amostra de análise para uma determinada fase de estudo, ajustando um modelo misto linear para prever P por E sobre todos os participantes incluídos e monitorando pontos de tempo TX, com declives aleatórios e interceptações para os participantes. A linha de regressão E-P é então determinada pelas estimativas de efeito fixo para a inclinação e interceptação de EP e serve como a relação normativa do E-P para a amostra de análise na fase de estudo de interesse. A forma de regressão que explica mais variação em P (linear ou quadrática) será usada. Em cada TX, as pontuações individuais dos participantes serão inseridas na equação normativa da linha E-P, dando-nos sua pontuação de P esperada ao assumir a reatividade estressor normal. A pontuação do SR é o resíduo médio do indivíduo na linha de regressão para a fase de interesse do interesse.

Medição da integridade BBB

Uma sequência de ressonância magnética ASL (PCASL) pseudo-contínua será usada para estimar a permeabilidade BBB. Ao ler os sinais de PCASL em diferentes atrasos pós-marcação (PLD) sob diferentes gradientes de difusão, os sinais de perfusão nos tecidos capilares e cerebrais podem ser estimados com segurança e posteriormente montados em um modelo para estimar a taxa de troca de água (KW) do sangue para o tecido cerebral, um índice quantificando a permeabilidade BBB. A análise usará uma caixa de ferramentas fornecida pelo desenvolvedor de sequência (http://loft-lab.org/index-5.html) e inclui reconstrução de imagens, pré-processamento (correção de movimento, COREGistration, Skull-Stripping) e modelagem KW. Os valores de KW com média de cérebro inteiro quantificando a permeabilidade geral do BBB serão calculados. A integridade do BBB é quantificada como permeabilidade inversa.

Medidas de resultado adicionais

Para análises exploratórias adicionais, as amostras de sangue serão coletadas e usadas para determinar marcadores moleculares e celulares de base no sangue do sistema imunológico, função metabólica e BBB (incluindo proteínas, peptídeos, RNAs, metabólitos). Nessas análises adicionais, a integridade do BBB será avaliada usando biomarcadores baseados no sangue e medidas regionais de neuroimagem (especialmente do hipocampo, estriado ventral e córtex pré-frontal), e a associação de covariáveis ​​imunológicas com integridade e resiliência ao estresse BBB também será considerada. Além disso, variáveis ​​sociodemográficas e psico-sociais serão avaliadas por meio do questionário e testadas quanto à sua associação com a integridade da BBB e a resiliência ao estresse.

Tamanho da amostra

Como a associação da função da BBB em indivíduos expostos ao estressor em risco de problemas de saúde mental relacionados ao estresse com a resiliência ao estresse (pontuação inversa de SR) nunca foi investigada, os pesquisadores baseiam seu cálculo de poder para o ponto final primário na sensibilidade para detectar um tamanho de efeito médio de D = 0,3 de Cohen. Com uma potência de 0,8, um nível alfa de dois lados de 0,05 e um modelo misto linear com oito variáveis ​​preditivas (3 variáveis ​​de interesse e 5 covariáveis), n = 109 participantes são necessários. Levando em consideração 10% de atrito, nosso objetivo é recrutar um número total de 122 participantes (61 em cada grupo).

Estratégias para manuseio de dados e disseminação de resultados

A coleta e o gerenciamento de dados serão conduzidos em conformidade com os princípios da Declaração de Helsinque (1996) e regulamentos nacionais e regionais relevantes e seguirão apenas protocolos de estudo aprovados pelo Comitê de Ética Regional em cada local/país de parceiro. O investigador em cada site de parceiros será responsável pelo gerenciamento de dados de acordo com esses princípios. Os investigadores coletarão e processarão dados de imagem de ressonância magnética (Digital: DICOM), Bioshamples (sangue), dados biológicos da análise de bioshamplos (digital: concentrações de proteínas/peptídeos plasmáticos, RNAs, Metabolites e outras moléculas) e informatizada (Digital: Offline e Coleção Online) e Paper e Páxia (anágoga) questionário) e informatizada. Os dados serão tornados encontrados com uma descrição do estudo e metadados seguindo FairSharing.org convenções. Acessibilidade aberta e a reutilização de dados são complicados pela natureza pessoal sensível da maioria dos dados e pela não anonimizabilidade de princípios esp. de dados de ressonância magnética. Os formulários de consentimento do participante permitirão o compartilhamento de dados pseudonimizados e bioshamples entre os sites e com colaboradores da União Europeia e países com uma decisão de adequação nos termos do artigo 45, sob a supervisão de um comitê de uso e acesso de dados (DUAC). Todos os dados anonimizados serão aplicados abertamente através de depositários públicos (em particular, OSF) após a publicação ou nos últimos dois anos após o término do projeto e permanecerão acessíveis por pelo menos dez anos após a conclusão do estudo.