Интерес полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени в диагностике грибковых инфекций

Инвазивные грибковые инфекции являются основной причиной заболеваемости и смертности у пациентов с ослабленным иммунитетом. Среди них пациенты с гематологическими злокачественными новообразованиями, пациенты с нейтропенией, пациенты, инфицированные вирусом иммунодефицита человека, диабетики, пациенты с пересаженными паренхиматозными органами и пациенты, госпитализированные в отделение интенсивной терапии, особенно подвержены высокому риску.

Выживание этих пациентов зависит от ранней диагностики и своевременного соответствующего противогрибкового лечения. Ранняя диагностика этих инфекций затруднена из-за отсутствия чувствительных методов тестирования, особенно посевов крови. Его чувствительность плохая или близка к нулю при аспергиллезе. Кроме того, время ответа составляет несколько дней. По этим причинам мы решили разработать анализ ПЦР в реальном времени (полимеразная цепная реакция) на образцах крови. Он должен позволять быстро реагировать на установление положительного или отрицательного диагноза инвазивной грибковой инфекции, он может в значительной степени способствовать принятию решения о лечении противогрибковыми препаратами и должен контролировать эффективность и оптимизацию противогрибковых назначений.

Методы:

Наш проект представляет собой многоцентровую перспективную межрегиональную совместную работу микологических и паразитологических лабораторий Ниццы, Ренна и Тулузы. Наши цели: Во-первых, проверить метод извлечения из крови, зараженной видами грибов. Три лаборатории будут работать вместе, чтобы определить наилучший метод выделения, поскольку не существует единого метода выделения нуклеиновых кислот грибкового происхождения в контексте инфекций человека. Многочисленные уже используемые методы экстракции приводят к различиям в результатах ПЦР. Как следствие, межлабораторные сравнения непросты. Во-вторых, мы стремимся разработать три ПЦР-анализа в реальном времени: ПЦР-анализ в реальном времени на пангрибки, способный обнаруживать большинство видов грибков, ответственных за заболевания человека; анализ ПЦР в реальном времени, нацеленный на Candida albicans, и один, нацеленный на Aspergillus fumigatus, которые являются двумя клинически важными патогенами. Затем во время исследования будут взяты образцы крови пациентов (классифицированные в соответствии с консенсусом EORTC), чтобы оценить и подтвердить наш метод на клинических образцах. Результаты позволят нам определить чувствительность, специфичность и воспроизводимость, отрицательные и прогностические значения.

Цели В целом наша работа направлена ​​на оценку клинического влияния ПЦР в реальном времени на раннюю диагностику инвазивных грибковых инфекций и на начало или прекращение противогрибковой терапии. Экономический эффект от использования этого метода будет оценен. Действительно, отличная прогностическая отрицательная ценность пангрибкового ПЦР в реальном времени может служить основанием для снижения использования эмпирической противогрибковой терапии.