Эта страница была переведена автоматически, точность перевода не гарантируется. Пожалуйста, обратитесь к английской версии для исходного текста.

Геномные ответы иммунных и неиммунных клеток человека на глюкокортикоиды

25 мая 2023 г. обновлено: National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)

Геномный ответ иммунных и неиммунных клеток человека на глюкокортикоиды

Задний план:

Иммунная система защищает организм от бактерий и других вредоносных захватчиков. Но он может переиграть и по ошибке атаковать здоровые клетки. Группа препаратов, называемых глюкокортикоидами (ГК), может успокоить сверхактивную иммунную систему. Но они часто вызывают негативные побочные эффекты. Исследователи хотят узнать, как человеческие гены реагируют на ГК. Гены живут внутри каждой клетки тела. Они говорят нашим клеткам, как функционировать. Исследователи надеются, что результаты этого исследования покажут им, как разрабатывать лучшие лекарства, которые будут иметь преимущества ГК без побочных эффектов.

Цели:

Изучить, как гены человека реагируют на глюкокортикоидные препараты.

Право на участие:

Здоровые взрослые добровольцы в возрасте от 18 до 64 лет.

Дизайн:

Участники будут проверены с медицинской историей и физическим экзаменом. Они будут иметь сердце и анализы крови.

Ознакомительный визит продлится около 6 часов.

У участников будет история болезни, медицинский осмотр и 3 взятия крови.

Участникам сделают биопсию кожи. Инъекция вызывает онемение кожи на одной руке. Затем инструмент удалит кусок кожи размером с ластик для карандашей.

На другую руку будет нанесен GC-крем.

Участники получат исследуемый препарат GC на 30 минут. Это будет жидкость, которая будет капать через иглу, помещенную в вену руки.

Участникам сделают биопсию кожи руки, на которую был нанесен крем.

Участники получат последующие звонки через 1 и 4 дня спустя. Их спросят о реакциях или других проблемах со здоровьем.

Обзор исследования

Статус

Завершенный

Условия

Вмешательство/лечение

Подробное описание

Глюкокортикоиды являются одними из наиболее часто назначаемых иммунодепрессантов и противовоспалительных препаратов во всем мире. Однако длительное применение осложняется серьезными неиммунологическими побочными эффектами. Текущие эксперименты in vitro с первичными клетками человека в нашей лаборатории позволяют предположить, что действительно существуют фундаментальные различия в геномном ответе иммунных и неиммунных клеток на глюкокортикоиды. Эти и другие аспекты действия лекарств на геномном уровне до конца не охарактеризованы. В этом исследовании будет предпринята попытка составить список человеческих генов и некодирующих РНК, которые по-разному экспрессируются и регулируются в ответ на глюкокортикоиды между иммунными и неиммунными клетками. Эти данные будут использованы для идентификации транскриптов, соответствующих им белков и молекулярных путей, которые лучше всего подходят для целевого вмешательства. Потенциальные мишени могут быть проверены с помощью библиотек малых интерферирующих РНК (миРНК) с долгосрочной целью разработки интерференций РНК с помощью малых молекул или наночастиц (РНКи), которые воспроизводят терапевтическое действие глюкокортикоидов в иммунных клетках, избегая при этом их вредных побочных эффектов на другие ткани.

У здоровых добровольцев будет проведен базовый сбор крови перед однократной внутривенной дозой 250 миллиграммов сукцината натрия метилпреднизолона. Кровь будет собираться по одному из двух режимов: через 1 и 2 часа или через 2 и 4 часа после начала инфузии. Перед введением метилпреднизолона внутривенно здоровым добровольцам может быть сделана биопсия кожи. В этом случае местный метилпреднизолон наносится на ограниченный участок кожи, противоположный месту исходной биопсии кожи, и через 4 часа после введения препарата будет получена дополнительная биопсия кожи из области, где местно применялся метилпреднизолон. Последующие телефонные звонки через 1 день и 1 неделю после выписки позволят задокументировать любые побочные эффекты, связанные с препаратом или биопсией кожи. Общая продолжительность индивидуального участия в исследовании составляет 1-5 недель.

Образцы крови будут обработаны для выделения субпопуляции гемопоэтических клеток (нейтрофилы, В-клетки, CD4+ Т-клетки, CD8+ Т-клетки, моноциты и естественные клетки-киллеры [NK]). Лабораторные исследования будут проводиться в очищенных клетках с целью понимания реакции человека на глюкокортикоиды in vivo на уровне РНК (например, секвенирование РНК, секвенирование малых РНК, ПЦР в реальном времени), ДНК (например, ChIP -seq, анализ метилирования, секвенирование ДНК, генотипирование и определение белка (например, проточная цитометрия, масс-спектрометрия). В каждый момент времени будут измеряться уровни метилпреднизолона в сыворотке и выполняться проточная цитометрия для стандартных маркеров линии. Биопсия кожи будет подвергнута выделению РНК для секвенирования РНК и секвенирования малых РНК. Фрагмент каждой биопсии кожи подвергается выделению и культивированию фибробластов для воздействия глюкокортикоидов in vitro и для получения индуцированных плюрипотентных стволовых (iPS) клеток.

Тип исследования

Интервенционный

Регистрация (Действительный)

33

Фаза

  • Фаза 1

Контакты и местонахождение

В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.

Места учебы

Критерии участия

Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.

Критерии приемлемости

Возраст, подходящий для обучения

От 18 лет до 64 года (Взрослый)

Принимает здоровых добровольцев

Нет

Описание

  • КРИТЕРИИ ВКЛЮЧЕНИЯ:

    1. Возраст от 18 до 64 лет
    2. Готовность хранить образцы для будущих исследований
    3. Готовность пройти генетическое тестирование

КРИТЕРИЙ ИСКЛЮЧЕНИЯ:

  1. Индекс массы тела менее 18 или более 35
  2. Затрудненный периферический венозный доступ (определяется исследовательским персоналом при скрининге)
  3. Тяжелая аллергическая реакция на глюкокортикоиды в анамнезе.
  4. История аутоиммунного или аутовоспалительного заболевания
  5. Активное солидное или гематологическое злокачественное новообразование
  6. Заболевание кожи в анамнезе (например, псориаз, пузырчатка или атопический дерматит), которое могло повлиять на результаты транскрипционного анализа образцов биопсии кожи.
  7. Сахарный диабет
  8. Химиотерапия рака в течение последних 5 лет
  9. Операция в течение последних 8 недель
  10. История недавнего (в течение последних 30 дней) заражения
  11. Положительный тест на вирус иммунодефицита человека или вирусную инфекцию гепатита А, В или С (скрининг на вирусные маркеры гепатита, который включает HBsAg, анти-HCV IgG, анти-HAV IgM).
  12. Положительный или неопределенный тест на латентный туберкулез (анализ высвобождения гамма-интерферона)
  13. Наличие в анамнезе паразитарных, амебных, грибковых или микобактериальных инфекций или других возможных латентных инфекций.
  14. Результаты теста на коагуляцию (PT и PTT) выходят за пределы нормы
  15. История нарушения свертываемости крови
  16. Использование глюкокортикоидов (включая местное или ингаляционное), нестероидных противовоспалительных препаратов (включая аспирин), противоэпилептических препаратов, антикоагулянтов, статинов, флуоксетина, дилтиазема, амиодарона, кларитромицина, кетоконазола или зверобоя , за последние 30 дней
  17. Вакцинация в течение последних 30 дней
  18. прием иммунодепрессантов или иммуномодулирующих препаратов в течение последних 30 дней;
  19. Беременность, текущая или в течение последних 90 дней, или попытка забеременеть во время исследования
  20. Текущее грудное вскармливание
  21. Общий анализ крови (CBC) и/или значения панели неотложной помощи находятся за пределами нормального референтного диапазона Департамента лабораторной медицины NIH и считаются клинически значимыми главным исследователем.
  22. Любые клинически значимые отклонения на электрокардиограмме (ЭКГ)
  23. Любое состояние, которое, по мнению исследователя, может подвергнуть участника неоправданному риску или поставить под угрозу научные цели исследования.
  24. Участие в клиническом протоколе, который включает вмешательство, которое, по мнению исследователя, может повлиять на результаты текущего исследования.

Учебный план

В этом разделе представлена ​​подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.

Как устроено исследование?

Детали дизайна

  • Основная цель: Фундаментальная наука
  • Распределение: Нерандомизированный
  • Интервенционная модель: Последовательное назначение
  • Маскировка: Нет (открытая этикетка)

Оружие и интервенции

Группа участников / Армия
Вмешательство/лечение
Экспериментальный: До 2 часов после инфузии
Здоровые добровольцы получили однократную внутривенную дозу 250 мг метилпреднизолона, и кровь была собрана через один-два часа после начала инфузии.
Лекарство: Метилпреднизолона натрия сукцинат (Солу-Медрол)

Метилпреднизолона сукцинат натрия для инъекций, USP (стерильный порошок SOLU-MEDROL, Pfizer, Inc.) представляет собой противовоспалительный глюкокортикоид, который представляет собой белое или почти белое гигроскопичное аморфное твердое вещество без запаха. Очень хорошо растворим в воде и спирте; он нерастворим в хлороформе и очень мало растворим в ацетоне.

Система Act-O-Vial (AOV) на 125 миллиграммов: каждые 2 мл AOV (при смешивании) содержат сукцинат натрия метилпреднизолона, эквивалентный 125 миллиграммам метилпреднизолона; также 1,6 мг одноосновного безводного фосфата натрия; и 17,4 мг двухосновного фосфата натрия, высушенного.
Экспериментальный: До 4 часов после инфузии
Здоровые добровольцы получили однократную внутривенную дозу 250 мг метилпреднизолона, и кровь была собрана в период от двух до четырех часов после начала инфузии.
Лекарство: Метилпреднизолона натрия сукцинат (Солу-Медрол)

Метилпреднизолона сукцинат натрия для инъекций, USP (стерильный порошок SOLU-MEDROL, Pfizer, Inc.) представляет собой противовоспалительный глюкокортикоид, который представляет собой белое или почти белое гигроскопичное аморфное твердое вещество без запаха. Очень хорошо растворим в воде и спирте; он нерастворим в хлороформе и очень мало растворим в ацетоне.

Система Act-O-Vial (AOV) на 125 миллиграммов: каждые 2 мл AOV (при смешивании) содержат сукцинат натрия метилпреднизолона, эквивалентный 125 миллиграммам метилпреднизолона; также 1,6 мг одноосновного безводного фосфата натрия; и 17,4 мг двухосновного фосфата натрия, высушенного.

Лекарство: Метилпреднизолон для местного применения (эмульсия Адвантан 0/1%)
1 г Адвантана эмульсия 0,1% (Байер) содержит в качестве активного ингредиента метилпреднизолона ацепонат (21-ацетокси-11бета-гидрокси-6альфа-метил-17-пропионилокси-1,4-прегнадиен-3,20-дион). Это эмульсия масло-в-воде, содержащая триглицериды со средней длиной цепи, каприлово-каприново-стеариновый триглицерид, 2-стеариловый эфир полиоксиэтиленового спирта, 21-стеариловый эфир полиоксиэтиленового спирта, бензиловый спирт, эдетат динатрия, глицерин и очищенную воду.

Что измеряет исследование?

Первичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Количество участников, отобранных для анализа дифференциальной экспрессии RNA-seq (биологические повторы)
Временное ограничение: До 2 или 4 часов после инфузии в зависимости от группы
Количество участников (биологические повторы), которые были успешно отобраны для анализа дифференциальной экспрессии генов RNA-seq в иммунных клетках, обработанных глюкокортикоидами. В анализе использовалось пороговое значение <5% частоты ложных открытий (FDR) для выбора транскриптов, которые считались дифференциально экспрессированными в каждый момент времени. Полученные списки генов были сопоставлены, чтобы определить, какие гены однозначно дифференциально экспрессируются в разных типах клеток.
До 2 или 4 часов после инфузии в зависимости от группы

Вторичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Выявить потенциальные мишени для вмешательств РНК-интерференции с помощью малых молекул или наночастиц, которые воспроизводят терапевтическое действие глюкокортикоидов, избегая вредных эффектов.
Временное ограничение: 3 года
После функциональных исследований подмножества генов, которые реагируют на глюкокортикоиды, мы выявим те из них, которые являются потенциальными мишенями для терапевтических вмешательств, имитирующих эффекты глюкокортикоидов на один или несколько типов клеток.
3 года

Соавторы и исследователи

Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.

Спонсор

National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)

Следователи

  • Главный следователь: Luis M Franco, M.D., National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases (NIAMS)

Публикации и полезные ссылки

Лицо, ответственное за внесение сведений об исследовании, добровольно предоставляет эти публикации. Это может быть что угодно, связанное с исследованием.

Общие публикации

Полезные ссылки

Даты записи исследования

Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.

Изучение основных дат

Начало исследования (Действительный)

24 января 2017 г.

Первичное завершение (Действительный)

31 мая 2022 г.

Завершение исследования (Действительный)

14 ноября 2022 г.

Даты регистрации исследования

Первый отправленный

10 июня 2016 г.

Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества

10 июня 2016 г.

Первый опубликованный (Оцененный)

14 июня 2016 г.

Обновления учебных записей

Последнее опубликованное обновление (Действительный)

22 июня 2023 г.

Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества

25 мая 2023 г.

Последняя проверка

14 ноября 2022 г.

Дополнительная информация

Термины, связанные с этим исследованием

Ключевые слова

Дополнительные соответствующие термины MeSH

Другие идентификационные номера исследования

  • 160126
  • 16-I-0126

Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы

Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.

Да

Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.

Нет

Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .

Подписаться