Эта страница была переведена автоматически, точность перевода не гарантируется. Пожалуйста, обратитесь к английской версии для исходного текста.

Разработка простого, быстрого и портативного метода амплификации с помощью рекомбиназы для 2019-nCoV

9 апреля 2020 г. обновлено: Yao Xie, Beijing Ditan Hospital

Разработка простого, быстрого и портативного метода рекомбиназной амплификации (RAA) для 2019-nCoV

В конце декабря 2019 года несколько местных медицинских учреждений сообщили о скоплениях пациентов с пневмонией неизвестной этиологии, которые были эпидемиологически связаны с оптовым рынком морепродуктов и влажных животных в Ухане, провинция Хубэй, Китай. В настоящее время подтверждено, что этиологией этой вспышки является новый коронавирус, а именно 2019-nCoV. Крайне важно использовать быстрый и простой метод диагностики в клинических условиях для своевременного информирования и уточнения стратегий, которые могут предотвратить, контролировать и остановить распространение 2019-nCoV. Амплификация с помощью рекомбиназы (RAA) — это новый метод изотермической амплификации нуклеиновых кислот, появившийся в последние годы и обладающий целым рядом преимуществ, включая высокую специфичность и чувствительность, быстрое обнаружение (30 мин), низкую стоимость, низкие требования к оборудованию и простоту эксплуатации. С помощью этого метода удалось обнаружить множество патогенов. Разработать анализ RAA для 2019-nCoV с преимуществами высокой скорости, простоты эксплуатации и низкой стоимости, а также устранить недостатки существующих методов молекулярного обнаружения. Исследователи установили анализ RAA с обратной транскрипцией в реальном времени (RT-RAA) для обнаружения 2019-nCoV. Этот анализ проводили при 42°C в течение 30 минут с использованием портативного флуоресцентного детектора в режиме реального времени. Для анализа специфичности и чувствительности использовали рекомбинантные плазмиды, содержащие консервативные гены ORF1ab. Клинические образцы от пациентов с подозрением на инфекцию 2019-nCoV использовались для оценки эффективности анализа. Параллельно исследователи также использовали коммерческий набор для анализа RT-qPCR на 2019-nCoV в качестве эталона.

Обзор исследования

Подробное описание

В конце декабря 2019 года несколько местных медицинских учреждений сообщили о скоплениях пациентов с пневмонией неизвестной этиологии, которые были эпидемиологически связаны с оптовым рынком морепродуктов и влажных животных в Ухане, провинция Хубэй, Китай. В настоящее время подтверждено, что этиологией этой вспышки является новый коронавирус, а именно 2019-nCoV. Крайне важно использовать быстрый и простой метод диагностики в клинических условиях для своевременного информирования и уточнения стратегий, которые могут предотвратить, контролировать и остановить распространение 2019-nCoV. Амплификация с помощью рекомбиназы (RAA) — это новый метод изотермической амплификации нуклеиновых кислот, появившийся в последние годы и обладающий целым рядом преимуществ, включая высокую специфичность и чувствительность, быстрое обнаружение (30 мин), низкую стоимость, низкие требования к оборудованию и простоту эксплуатации. Исследователи успешно обнаружили множество патогенов, используя этот метод. Разработать анализ RAA для 2019-nCoV с преимуществами высокой скорости, простоты эксплуатации и низкой стоимости, а также устранить недостатки существующих методов молекулярного обнаружения. Исследователи установили анализ RAA с обратной транскрипцией в реальном времени (RT-RAA) для обнаружения 2019-nCoV. Этот анализ проводили при 42°C в течение 30 минут с использованием портативного флуоресцентного детектора в режиме реального времени. Для анализа специфичности и чувствительности использовали рекомбинантные плазмиды, содержащие консервативные гены ORF1ab. Клинические образцы от пациентов с подозрением на инфекцию 2019-nCoV использовались для оценки эффективности анализа. Параллельно исследователи также использовали коммерческий набор для анализа RT-qPCR на 2019-nCoV в качестве эталона. Пациенты с подозрением на заражение 2019-nCoV в стационаре.

Тип исследования

Наблюдательный

Регистрация (Ожидаемый)

50

Контакты и местонахождение

В этом разделе приведены контактные данные лиц, проводящих исследование, и информация о том, где проводится это исследование.

Места учебы

    • Beijing
      • Beijing, Beijing, Китай, 100015
        • Рекрутинг
        • Department of Hepatology Division 2, Beijing Ditan Hospital
        • Контакт:
          • Yao Xie, Doctor
          • Номер телефона: 2489 8610-84322200
          • Электронная почта: xieyao00120184@sina.com
        • Контакт:
          • Xuejun Ma, phD
          • Номер телефона: +86 10 58900810
          • Электронная почта: maxj2004@aliyun.com

Критерии участия

Исследователи ищут людей, которые соответствуют определенному описанию, называемому критериям приемлемости. Некоторыми примерами этих критериев являются общее состояние здоровья человека или предшествующее лечение.

Критерии приемлемости

Возраст, подходящий для обучения

От 2 года до 86 лет (Ребенок, Взрослый, Пожилой взрослый)

Принимает здоровых добровольцев

Нет

Полы, имеющие право на обучение

Все

Метод выборки

Вероятностная выборка

Исследуемая популяция

Пациенты с подозрением на заражение 2019-nCoV в стационаре.

Описание

Критерии включения:

  • 1. Предполагаемые случаи (ранее наблюдаемые случаи)

Встречайте следующие 2 одновременно:

Эпидемиологический анамнез В анамнезе были поездки или проживание в Ухане в течение двух недель до начала заболевания; или пациенты, перенесшие лихорадку из Ухани с респираторными симптомами в течение 14 дней до начала заболевания или с кластерным началом.

Клинические проявления

  1. высокая температура;
  2. Он имеет характеристики визуализации пневмонии, упомянутые выше;
  3. Общее количество лейкоцитов в норме или снижено, или количество лимфоцитов снижено на ранней стадии заболевания.

    • 2. Подтвержденные случаи На основании соответствия критериям подозрительных случаев мокрота, мазки из зева, выделения из нижних дыхательных путей и другие образцы были протестированы с помощью флуоресцентной ОТ-ПЦР в реальном времени на выявление положительной нуклеиновой кислоты нового коронавируса; или секвенирование вирусного гена было высоко гомологичным с известными новыми коронавирусами.

Критерий исключения:

  • 1. Вирус гриппа, вирус парагриппа, аденовирус, респираторно-синцитиальный вирус, риновирус, метапневмовирус человека, коронавирус SARS и другие известные вирусные пневмонии;
  • 2. Mycoplasma pneumoniae, хламидийная пневмония и бактериальная пневмония; неинфекционные заболевания, такие как васкулит, дерматомиозит и организующая пневмония.

Учебный план

В этом разделе представлена ​​подробная информация о плане исследования, в том числе о том, как планируется исследование и что оно измеряет.

Как устроено исследование?

Детали дизайна

  • Наблюдательные модели: Когорта
  • Временные перспективы: Перспективный

Когорты и вмешательства

Группа / когорта
Вмешательство/лечение
Анализ RAA на 2019-nCoV
простой, быстрый и портативный анализ амплификации с помощью рекомбиназы (RAA) для 2019-nCoV
Мы установили анализ RAA с обратной транскрипцией в реальном времени (RT-RAA) для обнаружения 2019-nCoV. Этот анализ проводили при 42°C в течение 30 минут с использованием портативного флуоресцентного детектора в режиме реального времени. Для анализа специфичности и чувствительности использовали рекомбинантные плазмиды, содержащие консервативные гены ORF1ab. Клинические образцы от пациентов с подозрением на инфекцию 2019-nCoV использовались для оценки эффективности анализа. Параллельно мы также использовали коммерческий набор для анализа RT-qPCR на 2019-nCoV в качестве эталона. Типы образцов включают мазок из носа, мазок из полости рта, жидкость бронхоальвеолярного лаважа, мочевину, кровь, кал.

Что измеряет исследование?

Первичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Чувствительность обнаружения больше 95%
Временное ограничение: на исходном уровне
Чувствительность обнаружения больше 95%
на исходном уровне
Специфичность обнаружения выше 95%
Временное ограничение: на исходном уровне
Специфичность обнаружения выше 95%
на исходном уровне

Вторичные показатели результатов

Мера результата
Мера Описание
Временное ограничение
Соответствует существующим коэффициентам обнаружения универсальных реагентов более 95 %.
Временное ограничение: на исходном уровне
Соответствует существующим коэффициентам обнаружения универсальных реагентов более 95 %.
на исходном уровне

Соавторы и исследователи

Здесь вы найдете людей и организации, участвующие в этом исследовании.

Спонсор

Следователи

  • Главный следователь: Yao Xie, Doctor, Department of Hepatology, Division 2, Beijing Ditan Hospital

Даты записи исследования

Эти даты отслеживают ход отправки отчетов об исследованиях и сводных результатов на сайт ClinicalTrials.gov. Записи исследований и сообщаемые результаты проверяются Национальной медицинской библиотекой (NLM), чтобы убедиться, что они соответствуют определенным стандартам контроля качества, прежде чем публиковать их на общедоступном веб-сайте.

Изучение основных дат

Начало исследования (Действительный)

1 января 2020 г.

Первичное завершение (Ожидаемый)

31 декабря 2020 г.

Завершение исследования (Ожидаемый)

31 декабря 2020 г.

Даты регистрации исследования

Первый отправленный

26 января 2020 г.

Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества

26 января 2020 г.

Первый опубликованный (Действительный)

29 января 2020 г.

Обновления учебных записей

Последнее опубликованное обновление (Действительный)

10 апреля 2020 г.

Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества

9 апреля 2020 г.

Последняя проверка

1 апреля 2020 г.

Дополнительная информация

Термины, связанные с этим исследованием

Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы

Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.

Нет

Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.

Нет

Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .

Подписаться