Обогащенные кислородом смеси у спортсменов (OXY-SPORT)

Субъекты будут набраны через публичные объявления в местных спортзалах и собраны для объяснения протокола. Желающие участвовать подпишут письменное информированное согласие и будут приняты на работу. Чтобы быть включенными, все субъекты пройдут общий медицинский осмотр, чтобы разрешить гипербарические процедуры. Это будет включать вес, рост, неинвазивные измерения артериального давления и частоты сердечных сокращений.

После включения испытуемые будут случайным образом распределены по трем группам с помощью электронного генератора чисел персоналом, не участвующим непосредственно в эксперименте:

• Рука 1 (управление): без вмешательства.
• Группа 2 (L-HBO): обработка кислородом при 1,45 ATA в течение 60 минут (включая время сжатия и декомпрессии и 3-минутный перерыв для дыхания воздухом);
• Группа 3 (HBO): обработка кислородом при 2,5 ATA в течение 60 минут (включая время компрессии и декомпрессии, а также 3-минутный перерыв на дыхание воздухом).
• Рукав 4 (30 % O2): дыхание воздушной смесью с 30 % кислорода при атмосферном давлении (1 ата).
• Рукав 5 (50 % O2): дыхание воздушной смесью с 50 % кислорода при атмосферном давлении (1 ата).

Субъекты, включенные в группу 2, 3, 4, 5, пройдут в общей сложности 20 процедур. Они будут следовать индивидуальной диете, пропорциональной их энергетическим затратам.

Авторы определят 3 момента времени в протоколе:

ВРЕМЯ 0 (T0): сразу после включения, перед любым лечением или экспериментом; ВРЕМЯ 1 (T1): в конце лечения ГБО; ВРЕМЯ 2 (T2): через 2 месяца после окончания лечения ГБО.

По включенным предметам будут сданы следующие экзамены:

• стандартизированная панель, включающая полный анализ крови (CBC), креатинин, азот мочевины крови (BUN), С-реактивный белок и VES, будет выполняться в T0, T1 и T2.
• маркеры окислительного стресса будут проанализированы в образцах крови, мочи и слюны. В образцах крови (T0; T1; T2) авторы будут измерять IL-1 бета, IL-6, TNF-альфа, активные формы кислорода и общую антиоксидантную способность (с помощью парамагнитного резонанса), общую (общую) и сниженную (красный). аминотиолы (методом флуоресцентной спектроскопии), 3-нитротирозин (3-НТ) (методом конкурентного иммуноанализа).

В образцах мочи (T0; T1; T2) авторы будут оценивать перекисное окисление липидов путем измерения концентрации 8-изопростана (с помощью конкурентного иммуноанализа), концентрации нитритов и нитратов (NO2/NO3) (с помощью колориметрии на основе реакции Грисса), индуцируемых азотных кислот. Оксидсинтаза (по данным имеющегося в продаже набора ELISA), концентрации креатинина, неоптерина и мочевой кислоты, 8-ох-2-дезоксигуанозин (по конкурентному иммуноанализу).

В образцах слюны (T0; T1; T2) авторы будут измерять активные формы кислорода и общую антиоксидантную способность (с помощью парамагнитного резонанса) и кортизол (с помощью конкурентного иммуноанализа).

• стволовые клетки будут проанализированы в образцах крови (в Т0, Т1, Т2) (методом проточной цитометрии).

Образцы крови (приблизительно 6-12 мл) будут взяты из вен предплечий (предпочтительно на недоминантной конечности); плазму и эритроциты отделяют центрифугированием при 1000×g в течение 10 мин при 4°С. Образцы мочи будут собираться путем добровольного мочеиспускания в стерильные контейнеры. 1 мл слюны будет получен с помощью устройств Salivette (Sarstedt, Nümbrecht, Germany). Субъекты будут проинструктированы воздерживаться от питья, еды, курения, чистки зубов и использования жидкости для полоскания рта за 30 минут до сбора слюны.

Все образцы будут храниться в нескольких аликвотах при температуре -80 °C до анализа и размораживаться только один раз перед анализом.

При такой настройке ослепление пациентов и исследователей будет невозможно из-за различных структурных особенностей. Тем не менее, оценщики результатов не будут осведомлены о распределении пациентов.