Misturas Enriquecidas de Oxigênio em Atletas (OXY-SPORT)

Os participantes serão recrutados por meio de anúncios públicos em academias locais e reunidos para explicar o protocolo. Aqueles dispostos a participar assinarão um consentimento informado por escrito e serão recrutados. Para serem incluídos, todos os sujeitos passarão por uma triagem médica geral para permitir tratamentos hiperbáricos. Isso incluirá medidas de peso, altura, pressão arterial não invasiva e frequência cardíaca.

Após a inclusão, os indivíduos serão aleatoriamente designados para três braços usando um gerador eletrônico de números por pessoal não diretamente envolvido no experimento:

• Braço 1 (controle): sem intervenção.
• Braço 2 (L-HBO): tratado com oxigênio a 1,45 ATA por 60 min (incluindo os tempos de compressão e descompressão e uma pausa aérea de 3 minutos respirando ar);
• Braço 3 (HBO): tratado com oxigênio a 2,5 ATA por 60 min (incluindo os tempos de compressão e descompressão e uma pausa aérea de 3 minutos respirando ar).
• Braço 4 (30% O2): respirando uma mistura de ar com 30% de oxigênio à pressão atmosférica (1 ATA).
• Braço 5 (50% O2): respirar uma mistura de ar com 50% de oxigênio à pressão atmosférica (1 ATA).

Os indivíduos incluídos no braço 2, 3, 4, 5 serão submetidos a um total de 20 tratamentos. Eles seguirão uma dieta personalizada proporcional ao seu gasto energético.

Os Autores identificarão 3 pontos de tempo no protocolo:

TEMPO 0 (T0): imediatamente após a inclusão, antes de qualquer tratamento ou experimento; TEMPO 1 (T1): ao final dos tratamentos de HBO; TEMPO 2 (T2): 2 meses após o término dos tratamentos com HBO.

Os seguintes exames serão realizados nas disciplinas incluídas:

• um painel padronizado incluindo hemograma completo (CBC), creatinina, nitrogênio ureico no sangue (BUN), proteína C reativa e VES será realizado em T0, T1 e T2.
• marcadores de estresse oxidativo serão analisados ​​em amostras de sangue, urina e saliva. Em amostras de sangue (T0; T1; T2), os Autores medirão IL-1 beta, IL-6, TNF-alfa, espécies reativas de oxigênio e capacidade antioxidante total (por ressonância paramagnética), total (tot) e reduzida (vermelho) aminotióis (por espectroscopia de fluorescência), 3-nitrotirosina (3-NT) (por imunoensaio competitivo).

Em amostras de urina (T0; T1; T2), os Autores avaliarão a peroxidação lipídica medindo a concentração de 8-isoprostano (por imunoensaio competitivo), concentração de nitrito e nitrato (NO2/NO3) (por colorimetria baseada na reação de Griess), Nítrico induzível Óxido sintase (por kit ELISA disponível comercialmente), concentrações de creatinina, neopterina e ácido úrico, 8-oh-2-desoxiguanosina (por imunoensaio competitivo).

Em amostras de saliva (T0; T1; T2) os Autores medirão espécies reativas de oxigênio e capacidade antioxidante total (por ressonância paramagnética) e cortisol (por imunoensaio competitivo).

• células-tronco serão analisadas em amostras de sangue (em T0, T1, T2) (por citometria de fluxo).

Amostras de sangue (aproximadamente 6-12 ml) serão colhidas das veias dos antebraços (preferencialmente no membro não dominante); o plasma e os eritrócitos serão separados por centrifugação a 1000×g por 10 min a 4°C. Amostras de urina serão coletadas por micção voluntária em recipientes estéreis. 1 mL de saliva será obtido por aparelhos Salivette (Sarstedt, Nümbrecht, Alemanha). Os sujeitos serão instruídos a abster-se de beber, comer, fumar, escovar os dentes e usar enxaguatório bucal nos 30 minutos anteriores à coleta de saliva.

Todas as amostras serão armazenadas em alíquotas múltiplas a -80 °C até serem analisadas e descongeladas apenas uma vez antes da análise.

Com esta configuração, o cegamento de pacientes e investigadores será impossível devido às diferentes características estruturais. No entanto, os avaliadores de resultados serão cegos para a alocação dos pacientes.