Оценка гуморального иммунитета после COVID-19 во время беременности (ImmunoCOVID)

Фон

Тяжелый острый респираторный синдром коронавирус-2 (SARS-CoV-2), широко известный как коронавирусная болезнь-19 (COVID-19), представляет собой глобальную пандемию с 7 410 000 подтвержденных случаев и 418 000 случаев смерти по состоянию на 13 июня 2020 года. Считается, что SARS-CoV-2 имеет 79,6% идентичности своей последовательности с SARS-CoV и напоминает некоторые клинические исходы, такие как вирусная пневмония. Однако у большинства инфицированных он вызывает более легкие симптомы, а у некоторых людей может протекать бессимптомно. Только в 21 веке мы стали свидетелями трех крупных вспышек коронавируса (CoV): SARS-CoV, ближневосточного респираторного синдрома (MERS)-CoV и нового SARS-CoV-2, которые привели к множеству смертей и создали реальная угроза здоровью населения. На самом деле во время атипичной пневмонии большему количеству беременных женщин требовалась интенсивная терапия и вентиляция легких, а число смертей было выше по сравнению с небеременными взрослыми. Отчасти это связано с тем, что во время беременности риск вирусной пневмонии выше, чем в общей популяции.

Понимание Т- и В-клеточного иммунитета у участников COVID-19 может стать ключом к разработке более качественных вакцин и эффективных планов лечения. На сегодняшний день существует только одно исследование, в котором изучались циркулирующие Т-фолликулярные хелперные клетки (cTFH), которые, как и аналоги зародышевого центра, представляют собой специализированный эффекторный кластер дифференцировки 4 (CD4) Т-клеток, который индуцирует активацию В-клеток и дифференцировку в клетки с переключением класса. и антитела, секретирующие долгоживущие плазмобласты. В этом исследовании наблюдалось увеличение cTFH во время беременности. Тем не менее, исследования пожилых пациентов, которые составляют другую группу высокого риска, показали смешанные результаты с cTFH, демонстрирующим более низкие уровни активации. Это повлияет на долгосрочную выработку антител после инфекции или вакцинации. Мы предполагаем, что циркулирующие cTFH и В-клетки могут быть не так активированы как у беременных женщин, так и у пациентов с тяжелыми и критическими состояниями по сравнению с пациентами с легкими и средними заболеваниями, что приводит к меньшему или плохому функционированию антител против SARS-CoV-2. Поэтому мы ожидаем, что у инфицированных беременных людей развитие долговременного иммунитета может быть хуже по сравнению с небеременными людьми с аналогичной тяжестью заболевания, что делает их более восприимчивыми к повторному заражению. По сравнению с гриппом, который является еще одним респираторным заболеванием со значительной заболеваемостью во время беременности и имеет текущую программу вакцинации, мы ожидаем, что те же самые показатели иммунитета будут менее выраженными после заражения COVID-19. Кроме того, формирование долговременного иммунитета будет менее эффективным у пациентов с тяжелым течением заболевания, которые по большей части составляют группу особо высокого риска, включая пожилых людей и пациентов с множественными сопутствующими заболеваниями. Крайне важно, чтобы мы расширили наши знания о долговременном иммунитете у людей, выздоровевших от COVID-19, чтобы увидеть, как долго эти люди защищены от повторного заражения и вырабатывается ли у них длительный иммунитет. Кроме того, в настоящее время отсутствуют исследования, устанавливающие параметры серопротекторного иммунитета. Предыдущие исследования показали, что специфический для SARS-CoV иммуноглобин G (IgG) значительно снижается в течение 2 лет, а некоторые отчеты показывают полную потерю в течение 6 лет у большинства пациентов, выздоровевших от SARS-CoV. Это может означать потерю долгосрочной защиты. Исследователи этого исследования предлагают измерять уровни IgG, специфических для SARS-CoV-2, путем проведения ELISpots В-клеток памяти (Enzyme-Linked ImmunoSpot) и сравнения данных с панелями проточной цитометрии cTFH и B-клеток. Исследовательская группа сможет профилировать образование и стойкость защитных антител, вырабатываемых инфицированными людьми, которые выздоравливают. Результаты этого исследования позволят сформулировать гипотезы, которые будут проверены в более крупных исследованиях беременных пациенток, выздоровевших от COVID-19, а также помогут исследователям, работающим над пониманием эффективности вакцин при беременности, когда они станут коммерчески доступными.

Исследовать вопрос

У беременных, выздоровевших от COVID-19:

A. Как долго уровень специфического для SARS-CoV-2 иммуноглобулина G (IgG) будет оставаться в периферической крови, какова скорость снижения и как это соотносится с небеременными людьми?

B. Как их иммунная функция, опосредованная Т-клетками, отличалась от таковой у небеременных пациенток во время инфекции?

C. Чем отличаются Т-клетки памяти, специфичные для SARS-CoV-2, по сравнению с тяжелыми и небеременными пациентами после выздоровления?

D. Как выработка антител и функция В- и Т-клеток после инфицирования COVID-19 во время беременности сравниваются с инфекцией гриппа и вакцинацией?

Гипотеза

Исследователи предполагают, что у беременных пациентов с COVID-19 будет развиваться менее устойчивый и поддающийся измерению В-клеточный ответ по сравнению с женщинами, инфицированными/вакцинированными гриппом, и небеременными людьми, и что их ответы серопротекторных антител будут снижаться через 12 месяцев после заражения.

Цели исследования

A. Создать надежные анализы для измерения специфичных для SARS-CoV-2 IgG у лиц, выздоровевших от инфекции COVID-19, и отслеживать эти уровни в течение 12-месячного периода для измерения любого снижения. При беременности сравните это с антителами к гриппу, вырабатываемыми после заражения и вакцинации.

B. Измерьте частоту активированных cTFH и антиген-секретирующих клеток (ASC) на 7–14-й день появления симптомов у беременных пациенток с COVID-19 и сравните их с небеременными группами, а также беременными, инфицированными гриппом и вакцинированными против гриппа. Кроме того, сравните группы небеременных с легкими и умеренными симптомами по сравнению с тяжелыми и критическими пациентами.

C. Измерьте частоту активированных В-клеток памяти на 28-й день у беременных пациенток с COVID-19 и сравните с группами небеременных и беременных, инфицированных гриппом, и вакцинированных против гриппа. Кроме того, сравните группы небеременных с легкими и умеренными симптомами по сравнению с тяжелыми и критическими пациентами.

D. Измерьте частоту CD4 и Т-клеток кластера дифференцировки 8 (CD8) у беременных пациенток с COVID-19 и сравните их с небеременными группами, а также беременными, инфицированными гриппом и вакцинированными против гриппа. Кроме того, сравните группы небеременных с легкими и умеренными симптомами по сравнению с тяжелыми и критическими пациентами.

E. Определить количество антигенспецифических Т-клеток памяти и измерить частоту активированных Т-клеток во всех группах пациентов.

F. Количественная оценка вирусной нагрузки SARS-CoV-2 у инфицированных участников.

Дизайн исследования

Это исследование будет перспективным наблюдательным проектом для изучения потенциального снижения защитного иммунитета во время беременности после выздоровления участников от SARS-CoV-2. Исследовательская группа сравнит эти результаты с небеременными пациентами, у которых был COVID-19 и у участников развились симптомы от легкой до умеренной или от тяжелой до критической. Пациенты, которые присоединятся к испытанию вакцины против SARS-CoV-2, не будут исключены, но дата вакцинации будет зарегистрирована, а их результаты интерпретированы соответствующим образом. Чтобы сравнить инфекцию COVID-19 с другой респираторной инфекцией и оценить долговременный защитный иммунитет с помощью вмешательства, уже проводимого в этой группе пациентов, предназначенного для обеспечения серозащитными антителами, исследователи изучат грипп и противогриппозную вакцину. Таким образом, данные беременных пациенток также будут сравниваться с данными беременных женщин, инфицированных гриппом, и тех, кто получил вакцинацию против гриппа.