Метаболические реакции метформина и генетические полиморфизмы гена SLC22A1 при СПКЯ

Задачи исследования Общая цель Определение ассоциации метаболических ответов на метформин с полиморфизмами гена SLC22A1 (rs628031 и rs2282143) у женщин с СПКЯ Конкретные цели

• Просмотреть изменения метаболического профиля (индекс массы тела, окружность талии, артериальное давление, гликемический статус, инсулинорезистентность, С-пептид и липид) через 24 недели терапии метформином у женщин с СПКЯ.
• Определение частоты полиморфизмов гена SLC22A1 (rs628031 и rs2282143) у женщин с СПКЯ
• Классификация пациентов с СПКЯ в соответствии с полиморфизмами гена SLC22A1 (rs628031 и rs2282143) на дикие и вариантные группы
• Сравнение метаболических изменений в течение 24 недель терапии метформином между группой диких и вариантов полиморфизмов гена SLC22A1 (rs628031 и rs2282143) у женщин с СПКЯ

Другие:

• Определение краткосрочных побочных эффектов метформина у женщин с СПКЯ
• Сравнение побочных эффектов метформина у женщин с СПКЯ с полиморфизмом гена SLC22A1 или без него (rs628031 и rs2282143)

Материалы и методы:

Тип исследования:

Проспективное клиническое исследование

Место учебы:

Кафедра эндокринологии БГМУ

Период обучения:

Октябрь 2022 г. - сентябрь 2024 г.

Исследуемая популяция:

Женщины репродуктивного возраста (18-35 лет) с СПКЯ

Метод выборки:

Последовательная целенаправленная/удобная выборка

Размер образца:

Объем выборки будет рассчитываться по следующей формуле:

n= {(Zα + Zβ)^2 × (σ1^2 + σ2^2)} ÷ (μ1 - μ2)^2 Из предыдущего аналогичного исследования 2-часовое соотношение глюкоза/инсулин OGTT (GIR) до и после 24 недели терапии метформином составили 2,3±2,5 и 3,2±3,2 при вариантном генотипе и 2,0±1,9 и 3,9±2,9. соответственно в диком генотипе SLC22A1 rs628031. Средние различия между вариантом и диким генотипом составили 0,9±0,7 и 1,9±1,0. соответственно.

Здесь Zα = 1,96 при доверительном уровне 95%, Zβ = 1,28 при мощности 90%, μ1 = среднее изменение GIR после метформина в вариантном генотипе rs628031 (AG/GG) = 0,9, μ2 = среднее значение GIR после метформина в диком генотипе rs628031(AA) = 1,9, Предполагая, что стандартное отклонение (SD) = 1,5 (σ1 = σ2) в обеих группах

Минимальное количество исследуемых образцов в каждой группе, n = {(1,96 + 1,28)^2 × (1,52 + 1,52)} ÷ (0,9 - 1,9)^2

• {(3,24)^2 × (2,25 + 2,25)} ÷ (1,0)^2
• {10,50 × 4,50} ÷ 1 = 47,25 ÷ 1 = 47,25 Для этого исследования требуется не менее 94 пациентов с СПКЯ. Однако, учитывая отсев, в исследование будет включено не менее 100 пациентов с СПКЯ. При необходимости объем выборки может быть увеличен.

Методика исследования. Не менее 100 впервые выявленных женщин репродуктивного возраста (18-35 лет) с СПКЯ будут последовательно набраны из кафедры эндокринологии БГМУ. У пациентов берут информированное письменное согласие и просят приходить натощак в определенный день, время и место два раза в неделю. Сопутствующий анамнез (репродуктивный, личный и семейный анамнез) будет собран, и будет проведен медицинский осмотр (рост, вес, окружность талии, окружность бедер, акне, гирсутизм, черный акантоз), и все данные будут задокументированы в предварительно протестированном полуструктурированном вопроснике. .

Сбор образцов крови на исходном уровне:

У каждого участника за 8-12 часов голодания будет взято около 10 мл венозной крови. Затем будет проведен пероральный тест на толерантность к глюкозе (ПГТТ) с 75 г и через два часа будет взято еще пять мл крови. Около двух мл крови, собранной натощак и через два часа после ПГТТ, будут храниться во фторированной пробирке для измерения уровня глюкозы в крови в тот же день сбора. Дополнительные два мл цельной крови будут сохранены при -70 градусах Цельсия в отделении эндокринологии для анализа полиморфизма длины рестрикционных фрагментов полимеразной цепной реакции (ПЦР-ПДРФ) после завершения всех биохимических анализов, чтобы избежать систематической ошибки. Оставшиеся шесть мл крови, собранные во время голодания, и три мл крови, собранные после ПГТТ, будут оставлены на 15 минут, чтобы обеспечить свертывание крови. После центрифугирования сыворотку отделяют и хранят в эппендорфе. После надлежащей маркировки они будут храниться в холодильнике при -700С. Биохимический анализ (глюкоза и липидный профиль) сыворотки будет сделан в тот же день, а инсулин и с-пептид - в течение семи дней после сбора.

Вмешательства Изменения образа жизни Пациенты будут консультированы во время постановки диагноза, и им будет предоставлен письменный документ.

Рацион питания

• Вам будет предоставлена ​​индивидуальная диета, составленная врачом-диетологом.
• Избыточный вес/ожирение: дефицит энергии в размере 500 ккал/день при диете для поддержания веса.
• Другое: Диета для поддержания веса Физическая активность
• Минимум 150 минут в неделю физической активности умеренной интенсивности (быстрая ходьба со скоростью 6 км/ч) с упражнениями по укреплению мышц 2 дня подряд в неделю
• активность должна выполняться по крайней мере 10-минутными подходами или около 1000 шагов, стремясь достичь не менее 30 минут в день, по крайней мере, 5 дней в неделю

Рецепт метформина Ингредиенты каждой таблетки метформина Каждая таблетка метформина содержит метформин 500 мг HCl, BP вместе с неактивными ингредиентами повидон, микрокристаллическая целлюлоза, кроскармеллоза натрия и стеарат магния. Кроме того, покрытие для таблеток содержит полиэтиленгликоль, поливиниловый спирт, диоксид титана, тальк, гуммиарабик, мальтодекстрин, пропиленгликоль и натуральные ароматизаторы.

Инвентаризация Все таблетки метформина будут периодически выдаваться участникам исследования исследователем на исходном уровне и при 1-м посещении (после 1-й недели) и 2-м последующем посещении через 12 недель поддерживающей терапии метформином (1500 мг/день). Таблетки метформина будут храниться в соответствии с инструкциями производителя. Срок годности и качество лекарств будут периодически проверяться.

Вводная фаза метформина будет назначаться в дозе 500 мг один раз в день после обеда и будет увеличена до 1500 мг/день в три приема после основных приемов пищи в течение двух недель после начала лечения. Пациентов попросят предоставить таблицу соблюдения режима приема препарата и побочных эффектов через неделю после начала приема метформина в дозе 1500 мг/сут. Пациенты, которые не смогут переносить 1500 мг/сут, исключаются из исследования для анализа метаболических реакций.

Поддерживающая доза: 1500 мг/день, разделенная на три дозы в течение 24 недель. Последующее наблюдение. Пациентам будет предложено прийти на три контрольных визита через 1, 12 и 24 недели поддерживающей терапии метформином с периодом окна в две недели в обоих направлениях. Во время 1-го контрольного визита (через 1 неделю) пациенты будут контролировать соблюдение режима лечения и побочные эффекты; клинический статус, а также образ жизни, соблюдение режима приема препарата и побочные эффекты будут задокументированы через 12 недель (2-й контрольный визит). Через 24 недели (3-й визит) биохимические метаболические профили пациента также будут составляться с использованием вышеупомянутой клинической информации.

Сбор образцов крови через 24 недели Около восьми мл венозной крови после 24 недель терапии метформином с 8–12-часовым голоданием будет взято для измерения ВНК, HbA1C, инсулина, С-пептида и липидного профиля, а также 75 г ПГТТ с последующим пятью мл крови будет собран для измерения глюкозы и инсулина.

Соответствие лекарств:

Он будет отслеживаться по телефону еженедельно в течение первых двух недель, а затем при каждом посещении исследователя. Пациентов попросят прийти с пустыми блистерами из-под метформина. Для надлежащего контроля за соблюдением требований будет вестись книга записей. Пациенты с соблюдением режима лечения <95% в любой момент исследования будут исключены из анализа метаболических ответов.

Мониторинг нежелательных явлений:

При каждом посещении пациентам будет предоставлен дневник нежелательных явлений (НЯ) для записи заранее определенных желудочно-кишечных (ЖК) событий. Их также спросят о любых серьезных побочных эффектах (SAE) или других AE, кроме желудочно-кишечных событий. Все НЯ и СНЯ будут записаны в заданной форме НЯ и сохранены в файлах пациентов. Пациентам будет рекомендовано строго использовать барьерную контрацепцию. Сывороточные АЛТ и креатинин также будут измеряться через 24 недели терапии метформином.