Metaboliska svar av metformin och genetiska polymorfismer av SLC22A1-genen i PCOS

Mål för studien Allmänt mål Bestämning av sambandet mellan metaboliska svar på metformin med SLC22A1-genpolymorfismer (rs628031 och rs2282143) hos kvinnor med PCOS-specifika mål

• För att se förändringarna av metabolisk profil (kroppsmassaindex, midjemått, blodtryck, glykemisk status, insulinresistens, c-peptid och lipid) under 24 veckors metforminbehandling hos kvinnor med PCOS
• Bestämning av frekvensen av SLC22A1-genpolymorfismer (rs628031 och rs2282143) hos kvinnor med PCOS
• Kategorisering av PCOS-patienter enligt SLC22A1-genpolymorfismer (rs628031 och rs2282143) i vilda och variantgrupper
• Jämförelse av metabola förändringar av 24 veckors metforminbehandling mellan vild vs variantgrupp av SLC22A1-genpolymorfismer (rs628031 och rs2282143) hos kvinnor med PCOS

Övriga:

• Bestämning av kortsiktiga biverkningar av metformin hos kvinnor med PCOS
• Jämförelse av metforminbiverkningar hos kvinnor med PCOS med eller utan SLC22A1-genpolymorfismer (rs628031 och rs2282143)

Material och metoder:

Typ av studie:

Prospektiv klinisk studie

Studieplats:

Endokrinologiska institutionen, BSMMU

Studieperiod:

Oktober 2022 till september 2024

Studera befolkning:

Reproduktiva kvinnor (18 - 35 år) med PCOS

Testmetod:

Konsekutiv ändamålsenlig/bekväm provtagning

Provstorlek:

Provstorleken kommer att beräknas från följande formel:

n= {(Zα + Zβ)^2 × (σ1^2 + σ2^2)} ÷ (μ1 - μ2)^2 Från en tidigare liknande studie, 2 timmars OGTT-glukos/insulinförhållandet (GIR) före och efter 24 veckors metforminbehandling var 2,3±2,5 och 3,2±3,2 i variantgenotyp och 2,0±1,9 och 3,9±2,9 i vild genotyp av SLC22A1 rs628031. Medelskillnaderna i variant och vild genotyp var 0,9±0,7 och 1,9±1,0 respektive.

Här är Zα=1,96 vid 95 % konfidensnivå, Zβ= 1,28 vid 90 % effekt, μ1= genomsnittliga förändringar av GIR efter metformin i variantgenotyp av rs628031 (AG/GG) = 0,9, μ2 = medelvärde av GIR efter metformin i vild genotyp av rs628031(AA) = 1,9, Antag standardavvikelse (SD)= 1,5 (σ1=σ2) i båda grupperna

Minsta antal prov som ska studeras i varje grupp, n= {(1,96 + 1,28)^2 × (1,52 + 1,52)} ÷ (0,9 - 1,9)^2

• {(3,24)^2 × (2,25 + 2,25)} ÷ (1,0)^2
• {10,50 × 4,50} ÷ 1 = 47,25 ÷ 1 = 47,25 Minst 94 patienter med PCOS krävs för denna studie. Men med tanke på avhopp kommer minst 100 patienter med PCOS att tas för studien. Provstorleken kan utökas vid behov.

Studieprocedur Nydiagnostiserade minst 100 kvinnor i reproduktiv ålder (18 - 35 år) PCOS-patienter kommer att rekryteras från avdelningen för endokrinologi, BSMMU. Informerat skriftligt samtycke kommer att tas från patienter och ombeds komma i fastande tillstånd på en viss dag, tid och plats två gånger i veckan. Relaterad historia (reproduktiv, personlig och familjehistoria) kommer att tas och fysisk undersökning (längd, vikt, midjeomkrets, höftomkrets, akne, hirsutism, acanthosis nigricans) kommer att göras och all data kommer att dokumenteras i ett förtestat semistrukturerat frågeformulär .

Blodprovtagning vid baslinjen:

Cirka 10 ml venöst blod kommer att tas från varje deltagare med 8 - 12 timmars fasta. Sedan kommer ett 75 g oralt glukostoleranstest (OGTT) att göras och ytterligare fem ml blod kommer att samlas in efter två timmar. Cirka två ml blod som samlats upp under fasta och två timmar efter OGTT kommer att förvaras i fluorerade rör för blodsockermätning samma dag för uppsamling. Ytterligare två ml helblod kommer att bevaras vid -70 grader Celsius på avdelningen för endokrinologi för polymeraskedjereaktion-restriktionsfragmentlängdpolymorfism (PCR-RFLP) efter att ha genomfört all biokemisk analys för att undvika bias. Återstående sex ml blod som samlats in under fasta och tre ml blod som samlats in efter OGTT kommer att hållas stående i 15 minuter för att tillåta koagulering. Efter centrifugering kommer serum att separeras och förvaras i eppendorf. Efter korrekt märkning kommer de att förvaras i ett -700C kylskåp. Biokemisk analys (glukos- och lipidprofil) av serumet kommer att göras samma dag och insulin och c-peptid inom sju dagar efter insamling.

Interventioner Livsstilsförändringar Patienterna kommer att rådfrågas vid tidpunkten för diagnosen och ett skriftligt dokument kommer att tillhandahållas.

Diet

• Ett individualiserat kostschema utarbetat av dietist kommer att tillhandahållas
• Övervikt/fetma: Ett energiunderskott på 500 kcal/dag kost från viktupprätthållande diet
• Övrigt: Viktupprätthållande diet Fysisk aktivitet
• Minst 150 minuter/vecka av fysisk aktivitet med måttlig intensitet (snabb promenad i en hastighet av 6 km/h) med muskelstärkande aktiviteter under 2 dagar/vecka som inte är i följd
• aktivitet utföras i minst 10-minuters anfall eller cirka 1000 steg, med målet att uppnå minst 30 minuter dagligen minst 5 dagar i veckan

Recept på metformin Ingredienser i varje metformintablett Varje metformintablett innehåller metformin 500 mg HCl, BP tillsammans med inaktiva ingredienser av povidon, mikrokristallin cellulosa, kroskarmellosnatrium och magnesiumstearat. Dessutom innehåller beläggningen för tabletterna polyetylenglykol, polyvinylalkohol, titandioxid, talk, gummi akacia, maltodextrin, propylenglykol och naturliga smakämnen.

Inventering Alla tabletter med metformin kommer att dispenseras regelbundet till studiedeltagarna av forskaren vid baslinjen och det första besöket (efter vecka 1) och det andra uppföljningsbesöket efter 12 veckors underhållsbehandling med metformin (1500 mg/dag). Metformin tabletter kommer att bevaras enligt tillverkarens instruktioner. Utgångsdatum och kvalitet på läkemedlen kommer att kontrolleras regelbundet.

Inkörningsfasen Metformin kommer att ordineras med 500 mg en gång dagligen efter middagen och kommer att öka till 1500 mg/dag i tre uppdelade doser efter huvudmåltider inom två veckor efter påbörjad behandling. Patienterna kommer att uppmanas att komma med ett diagram över läkemedelsöverensstämmelse och biverkningar en vecka efter påbörjad behandling med 1500 mg/dag av metformin. Patienter som inte kommer att kunna tolerera 1500 mg/dag, utesluts från studien för analys av metabola svar.

Underhållsdos: 1500 mg/dag i tre uppdelade doser under 24 veckor. Uppföljning: Patienterna kommer att uppmanas att komma för tre uppföljningsbesök efter 1, 12 och 24 veckors underhållsbehandling med metformin med en period på två veckor åt båda hållen. Under det första uppföljningsbesöket (efter 1 vecka) kommer patienternas följsamhet och biverkningar att övervakas; klinisk status tillsammans med livsstil och läkemedels överensstämmelse och biverkningar kommer att dokumenteras efter 12 veckor (andra uppföljningsbesöket). Efter 24 veckor (tredje besöket) kommer även patientens biokemiska metaboliska profiler att göras med ovan nämnda kliniska information.

Blodprovtagning efter 24 veckor Omkring åtta ml venöst blod efter 24 veckors metforminbehandling med 8 - 12 timmars fasta kommer att samlas in för att mäta FBG, HbA1C, insulin, c-peptid och lipidprofil och en 75 g OGTT följt av fem ml blod kommer att samlas in för mätning av glukos och insulin.

Läkemedelsefterlevnad:

Det kommer att övervakas via telefon varje vecka under de första två veckorna och sedan varje besök hos forskaren. Patienterna kommer att uppmanas att komma med tomma blåsor av metformin. En registerbok kommer att föras för att övervaka efterlevnaden ordentligt. Patienter med läkemedelsefterlevnad <95 % vid någon tidpunkt av studien kommer att exkluderas från analysen för metabola svar.

Övervakning av biverkningar:

Vid varje besök kommer patienter att förses med en biverkningsdagbok för att notera fördefinierade gastrointestinala (GI) händelser. De kommer också att tillfrågas om alla allvarliga biverkningar (SAE) eller andra biverkningar förutom GI-händelser. Alla AE och SAE kommer att registreras i given AE-form och kommer att bevaras i patienternas akter. Patienter kommer att uppmanas att strikt använda barriärpreventivmedel. Serum-ALAT och kreatinin kommer också att mätas efter 24 veckors metforminbehandling.