Utveckling och optimering av ett GBS diagnostiskt test

Grupp B Streptococcus (GBS), även känd som Streptococcus agalactiae, är en grampositiv diplococcus som ursprungligen var känd för att orsaka bovin mastit och visades inte vara en mänsklig patogen förrän 1938. På 1970-talet framträdde GBS som den främsta orsaken till neonatal morbiditet och dödlighet. GBS orsakar allvarlig invasiv sjukdom hos nyfödda. Ungefär 80 % av infektionerna hos spädbarn inträffar under den första levnadsveckan och betecknas därför som tidig sjukdom. Sen debuterande infektioner förekommer vanligtvis hos spädbarn mellan 1 vecka och 3 månaders ålder. Unga spädbarn med invasiv GBS-sjukdom har vanligtvis sepsis eller lunginflammation men kan, men mindre frekvent, uppvisa meningit, osteomyelit eller septisk artrit. Blodströmsinfektioner, med eller utan lunginflammation, är den huvudsakliga manifestationen av neonatal GBS-sjukdom och observeras i cirka 90 % av fallen, medan hjärnhinneinflammation förekommer i cirka 10 %. De flesta tidigt debuterande sjukdomarna beror på stigande spridning av GBS till fostervattnet, vilket leder till neonatal kolonisering och till invasiv sjukdom hos vissa spädbarn. Perinatal överföring av organismen kan ske genom både spruckna och intakta membran. Överföring från mor till barn har rapporterats vara 29 gånger högre hos GBS-koloniserade mödrar än hos icke-koloniserade mödrar. De nya riktlinjerna för Centers for Disease Control and Prevention rekommenderar universell prenatal kulturbaserad screening för GBS-kolonisering hos alla gravida kvinnor. Ett mer känsligt snabbscreeningstest för GBS som exakt kunde upptäcka kvinnor som bär på GBS vid förlossningstillfället skulle undanröja behovet av prenatal screening samtidigt som det minskar risken förknippad med användning av intrapartumprofylax med antibiotika hos icke-koloniserade kvinnor. Huvudsyftet med studien är att utveckla och optimera en mikro-TAS-prototyp för snabb GBS-detektion direkt från vaginala/anala prover med hjälp av pinnprover från gravida kvinnor som tagits in för förlossning. Det förväntas att detta diagnostiska system kan ersätta den nuvarande "guldstandarden" som är mikrobiologisk odling i selektiva medier för att bestämma GBS-kolonisering. Specifika mål för denna studie inkluderar: (1) analytisk känslighet för mikro-TAS-prototypen (antal GBS-kolonibildande enheter som detekteras per vaginalt/analt prov) kommer att bestämmas genom att använda prospektivt insamlade vaginal/anala prover positiva för GBS såväl som negativa vaginalt prov. /anala prover som kommer att spetsas med olika antal GBS-celler; (2) specificiteten för mikro-TAS-prototypen (förmåga att detektera specifikt GBS-nukleotidsekvenser utan att detektera andra mikrobiella arter eller mänskliga sekvenser) kommer att bestämmas genom att använda GBS-negativa vaginala/anala prover och; (3) provanalys och prestanda för mikro-TAS-prototypen kommer att jämföras med kliniska prover med FDA-godkänd BD GeneOhm StrepB-analys. Studiedeltagare kommer att inkludera 320 gravida kvinnor mellan 18 och 44 år, som tas in på Centre Hospitalier Universitaire de Québec för förlossning. Deltagande innebär att man observeras i 30 minuter. Forskningssjuksköterskan kommer att erhålla 2 vaginala/anala prover med standardteknik. Det ena provet kommer att användas för att detektera GBS med den godkända BD GeneOhm StrepB-analysen och det andra provet kommer att användas för utvecklingen av det nya GBS-testet för snabb detektering.