Opracowanie i optymalizacja testu diagnostycznego GBS

Streptococcus grupy B (GBS), znany również jako Streptococcus agalactiae, jest Gram-dodatnim diplokokiem pierwotnie znanym z wywoływania mastitis u bydła i nie wykazano, że jest patogenem dla ludzi aż do 1938 roku. W latach siedemdziesiątych XX wieku GBS stał się główną przyczyną zachorowalności i śmiertelności noworodków. GBS powoduje ciężką inwazyjną chorobę u noworodków. Około 80% infekcji u młodych niemowląt występuje w pierwszym tygodniu życia i dlatego określa się je jako chorobę o wczesnym początku. Zakażenia o późnym początku zwykle występują u niemowląt w wieku od 1 tygodnia do 3 miesięcy. Młode niemowlęta z inwazyjną chorobą GBS zwykle mają posocznicę lub zapalenie płuc, ale mogą, choć rzadziej, objawiać się zapaleniem opon mózgowych, zapaleniem kości i szpiku lub septycznym zapaleniem stawów. Infekcje krwi, z zapaleniem płuc lub bez, są głównym objawem choroby GBS u noworodków i obserwuje się je w około 90% przypadków, podczas gdy zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych występuje w około 10%. Większość chorób o wczesnym początku wynika z rozprzestrzeniania się GBS w płynie owodniowym, co prowadzi do kolonizacji noworodków i chorób inwazyjnych u niektórych niemowląt. Okołoporodowe przeniesienie organizmu może nastąpić zarówno przez pęknięte, jak i nienaruszone błony. Zgłaszano, że transmisja z matki na dziecko jest 29 razy wyższa u matek skolonizowanych przez GBS niż u matek nieskolonizowanych. Nowe wytyczne Centrum Kontroli i Prewencji Chorób zalecają powszechne prenatalne badania przesiewowe w kierunku kolonizacji GBS u wszystkich kobiet w ciąży. Bardziej czuły szybki test przesiewowy na GBS, który mógłby dokładnie wykryć kobiety, które są nosicielami GBS w momencie porodu, wyeliminowałby potrzebę prenatalnych badań przesiewowych, jednocześnie zmniejszając ryzyko związane ze stosowaniem profilaktyki śródporodowej za pomocą antybiotyków u kobiet nieskolonizowanych. Głównym celem badania jest opracowanie i optymalizacja prototypu mikro TAS do szybkiego wykrywania GBS bezpośrednio z próbek pochwy/odbytu przy użyciu wymazów pobranych od kobiet ciężarnych przyjętych do porodu. Oczekuje się, że ten system diagnostyczny może zastąpić dotychczasowy „złoty standard”, jakim jest hodowla mikrobiologiczna na podłożach selektywnych do oznaczania kolonizacji GBS. Konkretne cele tego badania obejmują: (1) czułość analityczna prototypu mikro TAS (liczba jednostek tworzących kolonie GBS wykrytych na próbkę z pochwy/odbytu) zostanie określona przy użyciu prospektywnie pobranych próbek z pochwy/odbytu, dodatnich i ujemnych w pochwie /próbki odbytu, które zostaną wzbogacone różnymi liczbami komórek GBS; (2) specyficzność prototypu mikro TAS (zdolność do wykrywania swoistych sekwencji nukleotydowych GBS bez wykrywania innych gatunków drobnoustrojów lub sekwencji ludzkich) zostanie określona przy użyciu próbek z pochwy/odbytu GBS-ujemnych oraz; (3) analiza próbki i działanie prototypu mikro TAS zostaną porównane z próbkami klinicznymi za pomocą zatwierdzonego przez FDA testu BD GeneOhm StrepB. Uczestnikami badania będzie 320 ciężarnych kobiet w wieku od 18 do 44 lat, które są przyjmowane do Centre Hospitalier Universitaire de Québec w celu porodu. Udział polega na obserwowaniu przez 30 minut. Pielęgniarka badawcza pobierze 2 próbki z pochwy/odbytu przy użyciu standardowych technik. Jedna próbka zostanie wykorzystana do wykrycia GBS za pomocą zatwierdzonego testu BD GeneOhm StrepB, a druga próbka zostanie wykorzystana do opracowania nowego testu szybkiego wykrywania GBS w miejscu opieki.