Desenvolvimento e Otimização de um Teste de Diagnóstico GBS

Streptococcus do Grupo B (GBS), também conhecido como Streptococcus agalactiae, é um diplococo gram-positivo originalmente conhecido por causar mastite bovina e não demonstrou ser um patógeno humano até 1938. Na década de 1970, o GBS emergiu como a principal causa de morbidade e mortalidade neonatal. GBS causa doença invasiva grave em recém-nascidos. Aproximadamente 80% das infecções em lactentes ocorrem na primeira semana de vida e, portanto, são designadas como doença de início precoce. As infecções de início tardio geralmente ocorrem em lactentes entre 1 semana e 3 meses de idade. Lactentes jovens com doença invasiva por GBS geralmente apresentam sepse ou pneumonia, mas podem, embora com menos frequência, apresentar meningite, osteomielite ou artrite séptica. As infecções da corrente sanguínea, com ou sem pneumonia, são a principal manifestação da doença GBS neonatal e são observadas em aproximadamente 90% dos casos, enquanto a meningite ocorre em cerca de 10%. A maioria das doenças de início precoce resulta da disseminação ascendente de GBS no líquido amniótico, o que leva à colonização neonatal e à doença invasiva em alguns bebês. A transmissão perinatal do organismo pode ocorrer tanto através de membranas rompidas quanto intactas. Relata-se que a transmissão de mãe para filho é 29 vezes maior em mães colonizadas por GBS do que em mães não colonizadas. As novas diretrizes dos Centros de Controle e Prevenção de Doenças recomendam triagem pré-natal universal baseada em cultura para colonização por GBS em todas as mulheres grávidas. Um teste de triagem rápida mais sensível para GBS que poderia detectar com precisão mulheres portadoras de GBS no momento do parto evitaria a necessidade de triagem pré-natal, reduzindo o risco associado ao uso de profilaxia intraparto com antibióticos em mulheres não colonizadas. O principal objetivo do estudo é desenvolver e otimizar um protótipo de micro TAS para detecção rápida de GBS diretamente de espécimes vaginais/anais usando zaragatoas coletadas de mulheres grávidas admitidas para o parto. Espera-se que este sistema de diagnóstico possa substituir o atual "padrão ouro" que é a cultura microbiológica em meios seletivos para determinação da colonização por GBS. Os objetivos específicos deste estudo incluem: (1) a sensibilidade analítica do protótipo micro TAS (número de unidades formadoras de colônias de GBS detectadas por amostra vaginal/anal) será determinada usando amostras vaginais/anal coletadas prospectivamente positivas para GBS, bem como amostras vaginais negativas /espécimes anais que serão enriquecidos com vários números de células GBS; (2) a especificidade do protótipo do micro TAS (capacidade de detectar especificamente sequências de nucleotídeos de GBS sem detectar outras espécies microbianas ou sequências humanas) será determinada usando amostras vaginais/anais negativas para GBS e; (3) a análise da amostra e o desempenho do protótipo do micro TAS serão comparados com amostras clínicas com o ensaio BD GeneOhm StrepB aprovado pela FDA. Os participantes do estudo incluirão 320 mulheres grávidas entre 18 e 44 anos de idade, que são admitidas no Centre Hospitalier Universitaire de Québec para o parto. A participação envolve ser observado por 30 minutos. A enfermeira da pesquisa obterá 2 amostras vaginais/anais usando técnicas padrão. Uma amostra será usada para detectar GBS com o ensaio BD GeneOhm StrepB aprovado e a outra amostra será usada para o desenvolvimento do novo teste de GBS de detecção rápida no local de atendimento.