Desarrollo y optimización de una prueba de diagnóstico de GBS

El Streptococcus del grupo B (GBS), también conocido como Streptococcus agalactiae, es un diplococcus grampositivo originalmente conocido por causar mastitis bovina y no se demostró que fuera un patógeno humano hasta 1938. En la década de 1970, el SGB surgió como la principal causa de morbilidad y mortalidad neonatal. GBS causa una enfermedad invasiva grave en los recién nacidos. Aproximadamente el 80% de las infecciones en lactantes pequeños ocurren durante la primera semana de vida y, por lo tanto, se denominan enfermedades de aparición temprana. Las infecciones de inicio tardío generalmente ocurren en bebés entre 1 semana y 3 meses de edad. Los bebés pequeños con enfermedad invasiva por GBS generalmente tienen sepsis o neumonía, pero pueden, aunque con menos frecuencia, presentar meningitis, osteomielitis o artritis séptica. Las infecciones del torrente sanguíneo, con o sin neumonía, son la principal manifestación de la enfermedad por GBS neonatal y se observan en aproximadamente el 90 % de los casos, mientras que la meningitis ocurre en alrededor del 10 %. La mayoría de las enfermedades de inicio temprano son el resultado de la propagación ascendente de GBS en el líquido amniótico, lo que conduce a la colonización neonatal y a la enfermedad invasiva en algunos bebés. La transmisión perinatal del organismo puede ocurrir tanto a través de membranas rotas como intactas. Se ha informado que la transmisión de madre a hijo es 29 veces mayor en madres colonizadas por GBS que en madres no colonizadas. Las nuevas pautas de los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades recomiendan la detección universal basada en cultivos prenatales para la colonización de GBS en todas las mujeres embarazadas. Una prueba de detección rápida más sensible para GBS que podría detectar con precisión a las mujeres portadoras de GBS en el momento del parto obviaría la necesidad de la detección prenatal y reduciría el riesgo asociado con el uso de profilaxis intraparto con antibióticos en mujeres no colonizadas. El objetivo principal del estudio es desarrollar y optimizar un prototipo de micro TAS para la detección rápida de GBS directamente de muestras vaginales/anales usando hisopos recolectados de mujeres embarazadas ingresadas para el parto. Se espera que este sistema de diagnóstico pueda reemplazar al actual "estándar de oro" que es el cultivo microbiológico en medios selectivos para determinar la colonización por GBS. Los objetivos específicos de este estudio incluyen: (1) la sensibilidad analítica del prototipo micro TAS (número de unidades formadoras de colonias de GBS detectadas por muestra vaginal/anal) se determinará mediante el uso de muestras vaginales/anales positivas para GBS y muestras vaginales negativas recolectadas prospectivamente. /especímenes anales que serán enriquecidos con varios números de células GBS; (2) la especificidad del prototipo micro TAS (capacidad para detectar específicamente secuencias de nucleótidos de GBS sin detectar otras especies microbianas o secuencias humanas) se determinará mediante el uso de muestras vaginales/anales negativas para GBS y; (3) el análisis de muestras y el rendimiento del prototipo micro TAS se compararán con muestras clínicas con el ensayo BD GeneOhm StrepB aprobado por la FDA. Los participantes del estudio incluirán a 320 mujeres embarazadas de entre 18 y 44 años de edad, que ingresan en el Centre Hospitalier Universitaire de Québec para el parto. La participación implica ser observado durante 30 minutos. La enfermera de investigación obtendrá 2 muestras vaginales/anales utilizando técnicas estándar. Una muestra se utilizará para detectar GBS con el ensayo BD GeneOhm StrepB aprobado y la otra muestra se utilizará para el desarrollo de la nueva prueba de detección rápida de GBS en el punto de atención.