Tromboxan B2 och trombocytfunktionstestning som mått på aspirinresistens hos kinesiska patienter i Hongkong

Fastande blodprov kommer att tas från patienter i studiecentret efter att ha fastat över natten i minst 10 timmar omedelbart före och 1 timme efter 80 mg aspirindosen. Ett 5-ml blodprov kommer att tas i ett serumseparatorrör och får koagulera vid rumstemperatur följt av centrifugering vid 4 grader C. Separerat serum kommer att förvaras i alikvoter vid -80°C fram till analys av TXB2. Ett 3-ml blodprov kommer att tas i ett hirudin-blodrör för blodplättsaggregationstestet med Multiplate®-analysatorn som kommer att utföras inom 3 timmar efter blodprovtagning. Ett 10 ml blodprov kommer att tas i ett etylendiamintetraättiksyrarör (EDTA) som ska användas för DNA-extraktion. Under studien kommer totalt 26 ml blod att tas från varje deltagare. Morgonurinprover före och 1 timme efter intag av aspirin kommer också att samlas in och förvaras vid -80 °C fram till mätning.

Trombocytaktiviteten hos proverna kommer att mätas med hirudinblodet med hjälp av Multiplate-analysatorn från Roche (Roche Diagnostics International Ltd, CH-6343 Rotkreuz, Schweiz) enligt tillverkarens instruktioner för det arakidonsyrainducerade blodplättsaggregationstestet (ASPI). Det kommer att analyseras inom 0,5-3 timmar efter blodprovtagning.

Serumproverna kommer att analyseras för TXB2 med EIA-kit från Cayman (Art.nr. 501020, Cayman Chemical, MI, USA) enligt tillverkarens instruktioner.

Urinen kommer att analyseras för 11-dehydro TXB2 med hjälp av den enzymkopplade immunosorbentanalyssatsen (EIA) från Cayman (Art.nr. 519510, Cayman Chemical, MI, USA) enligt tillverkarens instruktioner. Data kommer sedan att standardiseras med urinkreatinin mätt med Cayman-kreatinin (urin) kolorimetrisk analyssats (artikelnr 500701).

11-dehydro TXB2-data kommer att standardiseras med kreatininnivåerna i urinen mätta med kreatinin (urin) kolorimetrisk analyssats från Cayman (Art.nr. 500701, Cayman Chemical, MI, USA) enligt tillverkarens instruktioner.

Genomiskt DNA från patienterna kommer att extraheras från EDTA-blod med hjälp av fenolkloroform. Följande sex enkelnukleotidpolymorfismer (SNP) kommer att undersökas initialt: ITGA2 rs1126643, ITGA2B rs5911, PTGS1 rs1330344, ADK rs16931294, PEAR1 rs120412331 och CO. SNP:erna kommer att analyseras med TaqMan SNP-genotypningsanalyser från Applied Biosystems (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) av Thermo Fisher Scientific enligt produktbilagan.