Effekten av probiotika som ett komplement till behandling av SIBO med Rifaximin

Utredarna planerar att inkludera 100 deltagare i studien. Kontrollgruppen kommer att bestå av friska försökspersoner (25 försökspersoner) utan SIBO (med negativt väte-metantest) och utan NAFLD (CAP<248dB/m, TE<6,5kPa). Dessa patienter kommer att ha endast ett besök, där ett abdominalt ultraljud kommer att utföras med bedömning av mesenteriska rotlymfkörtlar, och blod kommer att tas för biokemiska tester, samt blod och avföring för bestämning av integritetsmarkörer för tarmbarriären.

Experimentet kommer att genomföras på SONOMED Medical Center från april 2023. till april 2025.

Enligt undersökningsschemat kommer totalt 4 besök att göras under projektets gång. De planerade procedurerna vid varje besök beskrivs nedan.

Tabell 1 Schema för studien Besök 1 (Vecka 0)

• Ultraljud av mesenterisk rot
• SWE elastografi, UGAP och Fibroscan (i alla för att identifiera undergruppen med NAFLD)
• Receptproblem: Xifaxan 1200mg/d i 14 dagar (3 förpackningar, 28 tabletter vardera)
• Randomisering
• drogproblem: 4Enteric/Placebo
• Konsultation av en nutritionist (utfärdande av rekommendationer för steg 1 av lågFODMAP-dieten)
• antropometriska mätningar
• blodprov
• insamling av ett avföringsprov
• fylla i åkomma frågeformulär
• Fyll i enkäter om kost och fysisk aktivitet
• utfärdande av SIBO symptomdagböcker

Besök 2 (vecka 6)

• Ultraljud av mesenteriska roten,
• SWE elastografi + UGAP och Fibroscan (i undergruppen med NAFLD)
• Dietistkonsultation (kontroll av lågFODMAP-diet)
• Genomförande av den andra etappen av kosten
• antropometriska mätningar
• blodprov
• insamling av ett avföringsprov
• fylla i åkomma frågeformulär
• utfärdande av SIBO symptomdagböcker

Besök 3 (vecka 12)

• Ultraljud av mesenterisk rot
• SWE elastografi + UGAP och Fibroscan (i undergruppen med NAFLD)
• Dietistkonsultation (kontroll av lågFODMAP-diet). Genomförande av steg 3
• antropometriska mätningar
• blodprov
• insamling av ett avföringsprov
• fylla i åkomma frågeformulär
• väte-metan test

Uppföljning (vecka 24)

• SWE elastografi + UGAP och Fibroscan (i undergruppen med NAFLD)
• antropometriska mätningar
• fylla i åkomma frågeformulär

Metod

1. Antropometriska mätningar Mätning av längd, vikt, bukomkrets, kroppssammansättningsanalys med hjälp av Tanita BC-545N impedansskalan kommer att utföras på alla fastande patienter.

2. Samling av venöst blod

   a. Biokemiska tester (15 ml venöst blod; fastande) Alla inkluderade patienter kommer att genomgå en standardpanel med biokemiska tester för att bedöma leverfunktion och metabolism (inklusive ASAT, ALT, GGTP, triglycerider, totalkolesterol och dess HDL-fraktioner. LDL, glukos, HOMA-IR, CRP). Hos alla patienter kommer serum också att säkras och lagras för bestämning av pro-inflammatoriska cytokiner (TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IFN-γ) och hos patienter med patologiska lymfkörtlar för bestämning av fibrogenesindikatorer (TGF-β, TIMP-1, PIIINP, PINP, kollagen IV) och IgG4-antikroppar.

   Metabolomanalys (omålsatt metabolom, kortkedjiga fettsyror, trimetylaminer, trimetylaminoxid, indoxylsulfat, tryptofankataboliter) kommer att utföras på en kvadrupol masspektrometer kopplad till en tid-of-flight (QTOF) analysator kopplad till en högpresterande vätska kromatograf (UHPLC) från AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

   Dataanalys kommer att utföras med ett metabolomiskt analyssystem - XCMSplus.

   c. Studie av markörer för tarmbarriärskada i blod (4 ml venöst blod per propp) Plasmaindikatorer för tarmbarriärskada kommer att bestämmas hos alla inkluderade patienter: intestinalt fettsyrabindande protein (I-FABP ), kalprotektin

   Beskrivning av proceduren för att förbereda materialet:

   i. Efter att blodet tagits läggs det åt sidan i ca 30-60 minuter ii. Spinning - 5 minuter vid 3500-4000 rpm, iii. Extrahera serum och samla upp i 3-4 rör (standard 1,5-2 ml) på 500 ul (1 rör för varje protein)

3. insamling av 2 avföringsprover Varje patient kommer att bli ombedd att samla in biologiskt material med hjälp av Forged kit (https://www.fecesvanger.nl/en_GB/c-2866881/product-info/). Metabolomiska tester och bestämning av markörer för tarmbarriärskada kommer att utföras från de insamlade avföringsproverna.

   Procedurerna för att utveckla 16S-sekvenserna följer de protokoll som användes under Earth Microbiome Project. Bioinformatikanalys kommer att utföras med hjälp av QIIME-verktyget. Operativa taxonomiska enheter (OTUs, sOTUs) bestäms med hjälp av två alternativa metoder (pipelines, algoritmer).

   1. Fekalt metabolomiskt test Metabolomisk analys (omålsatt metabolom, kortkedjiga fettsyror, trimetylaminer, trimetylaminoxid, indoxylsulfat, tryptofankataboliter) kommer att utföras på en kvadrupolmasspektrometer kopplad till en tid-of-flight (QTOF) analysator kopplad till en hög -prestanda vätskekromatograf (UHPLC) från AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

      Dataanalys kommer att utföras med ett metabolomiskt analyssystem - XCMSplus.

   2. Studie av markörer för tarmbarriärskada i avföring: IFAB-P, zonulin, calprotectin

4. Frågeformulär:

   1. angående SIBO-relaterade besvär I. Symtomdagbok hos en patient med SIBO (bilaga 1) Bedömning av svårighetsgrad av uppblåsthet utifrån VAS-skalan och bedömning av tarmrörelser utifrån Bristol-avföringsskalan. Visual Analog Scale (VAS) är ett verktyg som används för subjektiv bedömning av smärta. VAS-skalan består av en linje 100 mm lång, med två ändpunkter som indikerar 0 ("ingen uppblåsthet") och 100 ("olidlig uppblåsthet"). Patienten uppmanas att markera på linjen intensiteten av den uppblåsthet han eller hon upplever.

      Bristol Stool Form Scale (BSFS) används för att bedöma tarmpassage och avföringsform och konsistens. Den innehåller 7 grundläggande typer av avföring som hjälper till att uppskatta tarmrörelsernas regelbundenhet.

      II. GSRS-skala (bilaga 2) Frågeformuläret Gastrointestinal Symptom Rating Scale (GSRS) bedömer svårighetsgraden och frekvensen av symtomen under den senaste veckan och deras inverkan på den dagliga funktionen. Den består av 15 frågor, relaterade till 5 allmänna symtom som finns i mag-tarmsjukdomar. Frågor poängsätts med hjälp av en 7-gradig Likert-skala, där 1 indikerar frånvaro av besvärliga symtom och 7 indikerar närvaro av mycket besvärliga symtom. Ju högre totalpoäng som erhållits, desto större svårighetsgrad av symtomen.

      III. PHQ-9 PHQ-9 Patient Health Questionnaire (PHQ-9) är utformad för att screena för depression och används i den initiala diagnosen.

   2. Angående näring och fysisk aktivitet I. FFQ Frågeformulär som samlar in kostdata från de senaste 12 månaderna före undersökningen II. Godin Leisure Time Exercise Questionnaire (The Godin-Shephard Leisure-Time Physical Activity Questionnaire (GSLTPAQ) GLTEQ (förkortat till GSLTPAQ) är en av de mest använda skalorna för att mäta fysisk aktivitet.
5. mesenterisk rot ultraljud Undersökningen kommer att utföras hos alla projektdeltagare av en specialist i internmedicin certifierad av PTU för att utföra ultraljud, med hjälp av en Aixplorer ultraljudsmaskin (SuperSonic Imagine) med en linjär L18-5 eller konvex C6-1X typ huvud.

6. icke-invasiv bedömning av leverfibros och steatos (i allt för att identifiera en undergrupp med NAFLD)

   1. SWE-elastografi Forskningen kommer att utföras med en Aixplorer från SuperSonic Imagine med ett huvud av typen Convex C6-1X i SWE-läge (skjuvvågselastografi) av huvudutredaren.
   2. UGAP I det ultraljudsstyrda dämpningsparametersystemet (UGAP) kvantifieras dämpningen och representeras av en färgkarta i en realtidspresentation av B-typ.
   3. Fibroscan Icke-invasiv mätning av graden av leverfibros kommer att utföras med FibroScan-enheten av huvudutredaren.
   4. Utandningstest av väte-metan. Testerna kommer att utföras med Quintrons BreathTracker S.C. väte- och metananalysator.

Enligt riktlinjerna från American College of Gastroenterology (ACG) anses ett positivt vätetestresultat vara en ökning med ≥ 20 ppm från baslinjen till den 90:e minuten av testet. Ett positivt metantestresultat anses vara en ökning med ≥ 10 ppm när som helst under utandningstestet.

7. behandling/intervention

1. rifaximin 1200 mg/d i 14 dagar (3 op. a 28 tabletter) - alla patienter

   Alla patienter som ingår i studien enligt standarden för terapeutisk behandling av SIBO kommer att få ett recept på rifaximin i en dos på 1200 mg/d under 14 dagar (Xifaxan 200 mg, 3 op. av 28 tabletter, DS. 3 x 400 mg) . Enligt produktresumén är rifaximin registrerat i Polen för behandling av gastrointestinala sjukdomar som tarminfektioner, vilket är bakteriell överväxt av tunntarmen. Den föreslagna dosen sträcker sig från 200 mg (1 tablett) var 8:e timme till 400 mg (2 tabletter) var 8-12:e timme. Enligt riktlinjerna från American College of Gastroenterology (ACG) är det det föreslagna antibiotikumet för behandling av SIBO, och effekten av behandling med rifaximin i en dos på 550 mg tre gånger om dagen uppskattas till 61-78%. Det är ett semisyntetiskt derivat av rifamycin SV, förekommer i α-polymorf form, har en bakteriedödande effekt och absorberas praktiskt taget inte från mag-tarmkanalen. Verkningsmekanismen är baserad på irreversibel bindning av rifaximin till β-subenheten av DNA-beroende RNA-polymeras och, som ett resultat, hämning av bakteriellt RNA och proteinsyntes. Rifaximin uppvisar ett brett spektrum av antimikrobiell aktivitet, inklusive de flesta grampositiva och gramnegativa, aeroba och anaeroba bakterierna, inklusive ammoniakproducerande arter. Det kan hämma spridningen av bakterier som orsakar ureadeaminering och därigenom minska produktionen av ammoniak och andra ämnen som tros spela en viktig roll i patogenesen av leverencefalopati. Det verkar topiskt snarare än systemiskt. Det räknas till eubiotika, som är typer av antimikrobiella läkemedel som, när de introduceras i kroppen, förändrar sammansättningen av tarmens mikroflora. Antalet biverkningar är litet, därför anses rifaximin vara ett säkert, välstuderat och mycket effektivt läkemedel.

   Kontraindikationer: Överkänslighet mot rifaximin eller andra rifamyciner, eller mot något av hjälpämnena. Överkänslighetsreaktioner inkluderar exfoliativ dermatit, angioödem och anafylaxi. Tarmobstruktion, även partiell, och allvarlig ulcerös tarmskada.

2. randomisering: probiotika/placebofrisättning Probiotika, som kommer att innehålla en kombination av fyra frystorkade stammar av probiotiska bakterier i DRcaps enterala kapslarTM . Det är kapslar som skyddar probiotika från effekterna av saltsyra i magen, eftersom de bara löses upp i tarmarna. Den testade sammansättningen av probiotika finns till försäljning i bland annat Polen, Italien, Taiwan. Den har en positiv uppfattning om Institutet "Pomnik-Center för barns hälsa" nr 16/DJW/2022. Sammansättningen i tabellen nedan. Dosering 2x1 kapsel per dag.

   Placebokapslar som ser identiska ut med probiotika och innehåller potatisstärkelse och ett skal: hydroxipropylmetylcellulosa, gellangummi.

3. Dietistrådgivning och utfärdande av rekommendationer om low FODMAPs diet Low-FODMAPs dieten (LFD) är ett elimineringsprotokoll baserat på att tillfälligt begränsa intaget av högfermenterbara ämnen såsom fruktooligosackarider, oligosackarider, disackarider, monosackarider och polyoler.

Villkor för att avbryta ett medicinskt experiment Den försöksperson som genomför försöket är skyldig att avbryta det om det under försökets gång finns en risk för deltagarens hälsa som överstiger förväntade nytta. Den person som deltar i experimentet kan när som helst (i vilket skede av experimentet som helst) återkalla det tidigare lämnade samtycket utan att ange någon anledning. Då är den som utför experimentet skyldig att stoppa det.