La eficacia de los probióticos como complemento del tratamiento de SIBO con rifaximina

Los investigadores planean incluir 100 participantes en el estudio. El grupo de control estará formado por sujetos sanos (25 sujetos) sin SIBO (con prueba de hidrógeno-metano negativa) y sin NAFLD (CAP <248 dB/m, TE <6,5 kPa). Estos pacientes tendrán una sola visita, en la que se realizará una ecografía abdominal con evaluación de los ganglios linfáticos de la raíz mesentérica y se extraerá sangre para pruebas bioquímicas, así como sangre y heces para determinar los marcadores de integridad de la barrera intestinal.

El experimento se llevará a cabo en el Centro Médico SONOMED a partir de abril de 2023. hasta abril de 2025.

Según el esquema de encuestas, durante el proyecto se realizarán un total de 4 visitas. Los procedimientos planificados en cada visita se describen a continuación.

Tabla 1 Esquema del estudio Visita 1 (Semana 0)

• Ultrasonido de la raíz mesentérica.
• Elastografía SWE, UGAP y Fibroscan (en todos para identificar el subgrupo con NAFLD)
• Problema de prescripción: Xifaxan 1200 mg/d durante 14 días (3 paquetes de 28 comprimidos cada uno)
• Aleatorización
• problema de drogas: 4Entérico/Placebo
• Consulta de nutricionista (emisión de recomendaciones para la etapa 1 de la dieta baja en FODMAP)
• medidas antropométricas
• extracción de sangre
• recogida de una muestra de heces
• completar cuestionarios de dolencias
• Realización de cuestionarios de nutrición y actividad física.
• emisión de diarios de síntomas SIBO

Visita 2 (Semana 6)

• Ultrasonido de la raíz mesentérica,
• Elastografía SWE + UGAP y Fibroscan (en el subgrupo con NAFLD)
• Consulta dietista (control de dieta baja en FODMAP)
• Implementación de la 2da etapa de la dieta.
• medidas antropométricas
• extracción de sangre
• recogida de una muestra de heces
• completar cuestionarios de dolencias
• emisión de diarios de síntomas SIBO

Visita 3 (Semana 12)

• Ultrasonido de la raíz mesentérica.
• Elastografía SWE + UGAP y Fibroscan (en el subgrupo con NAFLD)
• Consulta de dietista (control de dieta baja en FODMAP). Implementación de la etapa 3
• medidas antropométricas
• extracción de sangre
• recogida de una muestra de heces
• completar cuestionarios de dolencias
• prueba de hidrógeno-metano

Seguimiento (Semana 24)

• Elastografía SWE + UGAP y Fibroscan (en el subgrupo con NAFLD)
• medidas antropométricas
• completar cuestionarios de dolencias

Método

1. Mediciones antropométricas Medición de altura, peso, circunferencia abdominal, análisis de composición corporal mediante la báscula de impedancia Tanita BC-545N se realizará en todos los pacientes, en ayunas.

2. Colección de sangre venosa.

   a. Pruebas bioquímicas (15 ml de sangre venosa; en ayunas) Todos los pacientes incluidos se someterán a un panel estándar de pruebas bioquímicas para evaluar la función y el metabolismo del hígado (incluidos AST, ALT, GGTP, triglicéridos, colesterol total y sus fracciones HDL). LDL, glucosa, HOMA-IR, PCR). En todos los pacientes también se asegurará y almacenará suero para la determinación de citocinas proinflamatorias (TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IFN-γ) y en pacientes con ganglios linfáticos patológicos para la determinación. de indicadores de fibrogénesis (TGF-β, TIMP-1, PIIINP, PINP, colágeno IV) y anticuerpos IgG4.

   El análisis metabolómico (metabolo no dirigido, ácidos grasos de cadena corta, trimetilaminas, óxido de trimetilamina, sulfato de indoxilo, catabolitos de triptófano) se realizará en un espectrómetro de masas cuadrupolo acoplado a un analizador de tiempo de vuelo (QTOF) acoplado a un líquido de alto rendimiento. cromatógrafo (UHPLC) de AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

   El análisis de datos se realizará mediante el sistema de análisis metabolómico - XCMSplus.

   C. Estudio de marcadores de daño de la barrera intestinal en sangre (4 ml de sangre venosa por coágulo) Se determinarán los indicadores plasmáticos de daño de la barrera intestinal en todos los pacientes incluidos: proteína transportadora de ácidos grasos intestinales (I-FABP), calprotectina

   Descripción del procedimiento de preparación del material:

   i. Una vez extraída la sangre, se deja reposar durante unos 30 a 60 minutos. ii. Hilado - 5 minutos a 3500-4000 rpm, iii. Extraiga el suero y recójalo en 3-4 tubos (estándar de 1,5-2 ml) de 500 ul (1 tubo para cada proteína)

3. recolección de 2 muestras de heces Se le pedirá a cada paciente que recolecte material biológico utilizando el kit Forged (https://www.fecesvanger.nl/en_GB/c-2866881/product-info/). Se realizarán pruebas metabolómicas y determinación de marcadores de daño de la barrera intestinal a partir de las muestras de heces recolectadas.

   Los procedimientos para desarrollar las secuencias 16S siguen los protocolos utilizados durante el Proyecto Microbioma Terrestre. El análisis bioinformático se realizará utilizando la herramienta QIIME. Las unidades taxonómicas operativas (OTU, sOTU) se determinan mediante dos métodos alternativos (canalizaciones, algoritmos).

   1. Prueba de metabolómica fecal El análisis metabolómico (metaboloma no dirigido, ácidos grasos de cadena corta, trimetilaminas, óxido de trimetilamina, sulfato de indoxilo, catabolitos de triptófano) se realizará en un espectrómetro de masas cuadrupolo acoplado a un analizador de tiempo de vuelo (QTOF) acoplado a un analizador de alta -cromatógrafo líquido de rendimiento (UHPLC) de AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

      El análisis de datos se realizará mediante el sistema de análisis metabolómico - XCMSplus.

   2. Estudio de marcadores de daño de la barrera intestinal en heces: IFAB-P, zonulina, calprotectina

4. Cuestionarios:

   1. con respecto a las dolencias relacionadas con SIBO I. Diario de síntomas en un paciente con SIBO (Apéndice 1) Evaluación de la gravedad de la hinchazón según la escala VAS y evaluación de las deposiciones según la escala de heces de Bristol. La Escala Visual Analógica (EVA) es una herramienta utilizada para la evaluación subjetiva del dolor. La escala VAS consta de una línea de 100 mm de largo, con dos puntos finales que indican 0 ("sin hinchazón") y 100 ("hinchazón insoportable"). Se pide al paciente que marque en la línea la intensidad de la hinchazón que está experimentando.

      La escala de forma de las heces de Bristol (BSFS) se utiliza para evaluar el paso del intestino y la forma y consistencia de las heces. Incluye 7 tipos básicos de heces que ayudan a estimar la regularidad de las deposiciones.

      II. Escala GSRS (Apéndice 2) El cuestionario de la Escala de calificación de síntomas gastrointestinales (GSRS) evalúa la gravedad y la frecuencia de los síntomas durante la semana pasada y su impacto en el funcionamiento diario. Consta de 15 preguntas, relacionadas con 5 síntomas generales que se encuentran en las enfermedades gastrointestinales. Las preguntas se califican utilizando una escala Likert de 7 puntos, donde 1 indica la ausencia de síntomas problemáticos y 7 indica la presencia de síntomas muy problemáticos. Cuanto mayor sea la puntuación total obtenida, mayor será la gravedad de los síntomas.

      III. PHQ-9 El Cuestionario de Salud del Paciente PHQ-9 (PHQ-9) está diseñado para detectar depresión y se utiliza en el diagnóstico inicial.

   2. Respecto a Nutrición y Actividad Física I. Cuestionario FFQ que recopila datos dietéticos de los últimos 12 meses anteriores a la encuesta II. El Cuestionario de ejercicio en tiempo libre de Godin (Cuestionario de actividad física en tiempo libre de Godin-Shephard (GSLTPAQ) El GLTEQ (abreviado como GSLTPAQ) es una de las escalas más utilizadas para medir la actividad física.
5. Ultrasonido de raíz mesentérica El examen será realizado en todos los participantes del proyecto por un especialista en medicina interna certificado por el PTU para realizar ultrasonido, con la ayuda de un ecógrafo Aixplorer (SuperSonic Imagine) utilizando un lineal L18-5 o convexo C6-1X. tipo cabeza.

6. evaluación no invasiva de la fibrosis y esteatosis hepática (en total, para identificar un subgrupo con EHGNA)

   1. Elastografía SWE La investigación se realizará con un Aixplorer de SuperSonic Imagine utilizando un cabezal tipo Convex C6-1X en modo SWE (elastografía de onda de corte) por el investigador principal.
   2. UGAP En el sistema de parámetros de atenuación guiados por ultrasonido (UGAP), la atenuación se cuantifica y se representa mediante un mapa de colores en una presentación tipo B en tiempo real.
   3. Fibroscan El investigador principal realizará una medición no invasiva del grado de fibrosis hepática con el dispositivo FibroScan.
   4. Prueba de aliento de hidrógeno-metano Las pruebas se realizarán utilizando el analizador de hidrógeno y metano BreathTracker S.C. de Quintron.

Según las directrices del Colegio Americano de Gastroenterología (ACG), un resultado positivo en la prueba de hidrógeno se considera un aumento de ≥ 20 ppm desde el inicio hasta el minuto 90 de la prueba. Un resultado positivo de la prueba de metano se considera un aumento de ≥ 10 ppm en cualquier momento durante la prueba de aliento.

7. tratamiento/intervención

1. Rifaximina 1200 mg/d durante 14 días (3 op. por 28 comprimidos) - todos los pacientes

   Todos los pacientes incluidos en el estudio según el estándar de manejo terapéutico de SIBO recibirán prescripción de rifaximina a una dosis de 1200 mg/d durante 14 días (Xifaxan 200 mg, 3 op. de 28 comprimidos, DS. 3 x 400 mg) . Según el RCP, la rifaximina está registrada en Polonia para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales como las infecciones intestinales, que son un crecimiento bacteriano excesivo del intestino delgado. La dosis sugerida oscila entre 200 mg (1 comprimido) cada 8 horas y 400 mg (2 comprimidos) cada 8-12 horas. Según las directrices del Colegio Americano de Gastroenterología (ACG), es el antibiótico sugerido para el tratamiento del SIBO, y la eficacia de la terapia con rifaximina en dosis de 550 mg tres veces al día se estima en 61-78%. Es un derivado semisintético de la rifamicina SV, se presenta en forma polimórfica α, tiene un efecto bactericida y prácticamente no se absorbe en el tracto gastrointestinal. El mecanismo de acción se basa en la unión irreversible de la rifaximina a la subunidad β de la ARN polimerasa dependiente de ADN y, como resultado, la inhibición de la síntesis de proteínas y ARN bacteriano. La rifaximina exhibe un amplio espectro de actividad antimicrobiana, incluida la mayoría de las bacterias Gram positivas y Gram negativas, aeróbicas y anaeróbicas, incluidas las especies productoras de amoníaco. Puede inhibir la proliferación de bacterias que causan la desaminación de la urea, reduciendo así la producción de amoníaco y otras sustancias que se cree que desempeñan un papel importante en la patogénesis de la encefalopatía hepática. Actúa de forma tópica y no sistémica. Se cuenta entre los eubióticos, que son tipos de fármacos antimicrobianos que, cuando se introducen en el organismo, cambian la composición de la microflora intestinal. El número de efectos secundarios es pequeño, por lo que la rifaximina se considera un fármaco seguro, bien estudiado y muy eficaz.

   Contraindicaciones: Hipersensibilidad a la rifaximina u otras rifamicinas, o a alguno de los excipientes. Las reacciones de hipersensibilidad incluyen dermatitis exfoliativa, angioedema y anafilaxia. Obstrucción intestinal, incluso parcial, y daño intestinal ulcerativo grave.

2. Aleatorización: liberación de probiótico/placebo Probiótico, que contendrá una combinación de cuatro cepas liofilizadas de bacterias probióticas en cápsulas enterales DRcapsTM. Se trata de cápsulas que protegen a los probióticos de los efectos del ácido clorhídrico en el estómago, ya que sólo se disuelven en los intestinos. La composición probada de probióticos se vende en Polonia, Italia y Taiwán, entre otros países. Tiene dictamen positivo del Instituto "Pomnik-Center for Children's Health" núm. 16/DJW/2022. La composición en la siguiente tabla. Dosis 2x1 cápsula al día.

   Placebo Cápsulas que parecen idénticas al probiótico y contienen almidón de patata y una cáscara: hidroxipropilmetilcelulosa, goma gellan.

3. Consulta al dietista y emisión de recomendaciones sobre dieta baja en FODMAPs La dieta baja en FODMAPs (LFD) es un protocolo de eliminación basado en limitar temporalmente la ingesta de sustancias altamente fermentables como fructooligosacáridos, oligosacáridos, disacáridos, monosacáridos y polioles.

Condiciones para interrumpir un experimento médico El sujeto que realiza el experimento está obligado a interrumpirlo si, durante el transcurso del experimento, existe un riesgo para la salud del participante que supere los beneficios esperados. La persona que participa en el experimento podrá en cualquier momento (en cualquier etapa del experimento) revocar el consentimiento previamente otorgado sin dar motivo. Entonces la entidad que realiza el experimento está obligada a detenerlo.