L'efficacia dei probiotici in aggiunta al trattamento della SIBO con rifaximina

I ricercatori prevedono di includere 100 partecipanti nello studio. Il gruppo di controllo sarà composto da soggetti sani (25 soggetti) senza SIBO (con test idrogeno-metano negativo) e senza NAFLD (CAP<248 dB/m, TE<6,5 kPa). Questi pazienti avranno una sola visita, durante la quale verrà eseguita un'ecografia addominale con la valutazione dei linfonodi della radice mesenterica e verrà prelevato sangue per test biochimici, nonché sangue e feci per la determinazione dei marcatori di integrità della barriera intestinale.

L'esperimento sarà condotto presso il SONOMED Medical Center a partire da aprile 2023. fino ad aprile 2025.

Secondo lo schema di indagine, durante il progetto verranno effettuate un totale di 4 visite. Le procedure previste per ciascuna visita sono descritte di seguito.

Tabella 1 Schema dello studio Visita 1 (Settimana 0)

• Ecografia della radice mesenterica
• Elastografia SWE, UGAP e Fibroscan (in tutti per identificare il sottogruppo con NAFLD)
• Emissione di prescrizione: Xifaxan 1200 mg/giorno per 14 giorni (3 confezioni, 28 compresse ciascuna)
• Randomizzazione
• problema relativo al farmaco: 4Enterico/Placebo
• Consultazione di un nutrizionista (emissione di raccomandazioni per la fase 1 della dieta a basso contenuto di FODMAP)
• misurazioni antropometriche
• prelievo di sangue
• prelievo di un campione di feci
• compilazione dei questionari sui disturbi
• Compilazione di questionari su alimentazione e attività fisica
• emissione di diari dei sintomi SIBO

Visita 2 (Settimana 6)

• Ecografia della radice mesenterica,
• Elastografia SWE + UGAP e Fibroscan (nel sottogruppo con NAFLD)
• Consultazione dietista (controllo della dieta a basso contenuto di FODMAP)
• Attuazione della 2a fase della dieta
• misurazioni antropometriche
• prelievo di sangue
• prelievo di un campione di feci
• compilazione dei questionari sui disturbi
• emissione di diari dei sintomi SIBO

Visita 3 (Settimana 12)

• Ecografia della radice mesenterica
• Elastografia SWE + UGAP e Fibroscan (nel sottogruppo con NAFLD)
• Consultazione dietista (controllo della dieta a basso contenuto di FODMAP). Attuazione della fase 3
• misurazioni antropometriche
• prelievo di sangue
• prelievo di un campione di feci
• compilazione dei questionari sui disturbi
• test idrogeno-metano

Follow-up (settimana 24)

• Elastografia SWE + UGAP e Fibroscan (nel sottogruppo con NAFLD)
• misurazioni antropometriche
• compilazione dei questionari sui disturbi

Metodo

1. Misure antropometriche Su tutti i pazienti, a digiuno, verrà effettuata la misurazione di altezza, peso, circonferenza addominale, analisi della composizione corporea mediante impedenziometrica Tanita BC-545N.

2. Raccolta del sangue venoso

   UN. Test biochimici (15 ml di sangue venoso; a digiuno) Tutti i pazienti inclusi saranno sottoposti a un pannello standard di test biochimici per valutare la funzionalità epatica e il metabolismo (inclusi AST, ALT, GGTP, trigliceridi, colesterolo totale e le sue frazioni HDL. LDL, glucosio, HOMA-IR, CRP). In tutti i pazienti, il siero verrà inoltre protetto e conservato per la determinazione delle citochine proinfiammatorie (TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IFN-γ) e nei pazienti con linfonodi patologici per la determinazione di indicatori di fibrogenesi (TGF-β, TIMP-1, PIIINP, PINP, collagene IV) e anticorpi IgG4.

   L'analisi metabolomica (metaboloma non mirato, acidi grassi a catena corta, trimetilammine, ossido di trimetilammina, indossilsolfato, cataboliti di triptofano) sarà eseguita su uno spettrometro di massa quadrupolare accoppiato ad un analizzatore a tempo di volo (QTOF) accoppiato a un liquido ad alte prestazioni cromatografo (UHPLC) di AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

   L'analisi dei dati sarà effettuata mediante il sistema di analisi metabolomica - XCMSplus.

   C. Studio dei marcatori di danno alla barriera intestinale nel sangue (4 ml di sangue venoso per coagulo) Gli indicatori plasmatici del danno alla barriera intestinale saranno determinati in tutti i pazienti inclusi: proteina legante gli acidi grassi intestinali (I-FABP ), calprotectina

   Descrizione della procedura per la preparazione del materiale:

   io. Dopo il prelievo, il sangue viene messo da parte per circa 30-60 minuti ii. Centrifuga - 5 minuti a 3500-4000 giri al minuto, iii. Estrarre il siero e raccoglierlo in 3-4 provette (standard 1,5-2ml) da 500ul (1 provetta per ogni proteina)

3. prelievo di 2 campioni di feci Ad ogni paziente verrà chiesto di raccogliere materiale biologico utilizzando il kit Forged (https://www.fecesvanger.nl/en_GB/c-2866881/product-info/). Dai campioni di feci raccolti verranno eseguiti test metabolomici e la determinazione dei marcatori di danno alla barriera intestinale.

   Le procedure per lo sviluppo delle sequenze 16S seguono i protocolli utilizzati durante il Progetto Microbioma Terra. L'analisi bioinformatica verrà eseguita utilizzando lo strumento QIIME. Le unità tassonomiche operative (OTU, sOTU) vengono determinate utilizzando due metodi alternativi (pipeline, algoritmi).

   1. Test di metabolomica fecale L'analisi metabolomica (metaboloma non mirato, acidi grassi a catena corta, trimetilammine, ossido di trimetilammina, indossilsolfato, cataboliti del triptofano) sarà eseguita su uno spettrometro di massa a quadrupolo accoppiato ad un analizzatore a tempo di volo (QTOF) accoppiato ad un'alta cromatografo liquido ad alte prestazioni (UHPLC) di AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

      L'analisi dei dati sarà effettuata mediante il sistema di analisi metabolomica - XCMSplus.

   2. Studio dei marcatori di danno della barriera intestinale nelle feci: IFAB-P, zonulina, calprotectina

4. Questionari:

   1. sui disturbi correlati alla SIBO I. Diario dei sintomi in un paziente con SIBO (Appendice 1) Valutazione della gravità del gonfiore basata sulla scala VAS e valutazione dei movimenti intestinali basata sulla scala delle feci di Bristol. La Visual Analog Scale (VAS) è uno strumento utilizzato per la valutazione soggettiva del dolore. La scala VAS è costituita da una linea lunga 100 mm, con due punti finali che indicano 0 ("nessun gonfiore") e 100 ("gonfiore insopportabile"). Al paziente viene chiesto di segnare sulla linea l'intensità del gonfiore che avverte.

      La Bristol Stool Form Scale (BSFS) viene utilizzata per valutare il passaggio intestinale, la forma e la consistenza delle feci. Comprende 7 tipi base di feci che aiutano a stimare la regolarità dei movimenti intestinali.

      II. Scala GSRS (Appendice 2) Il questionario Gastrointestinal Symptom Rating Scale (GSRS) valuta la gravità e la frequenza dei sintomi nell'ultima settimana e il loro impatto sul funzionamento quotidiano. Si compone di 15 domande, relative a 5 sintomi generali riscontrabili nelle malattie gastrointestinali. Le domande vengono valutate utilizzando una scala Likert a 7 punti, dove 1 indica l'assenza di sintomi fastidiosi e 7 indica la presenza di sintomi molto fastidiosi. Maggiore è il punteggio totale ottenuto, maggiore è la gravità dei sintomi.

      III. PHQ-9 Il questionario sulla salute del paziente PHQ-9 (PHQ-9) è progettato per lo screening della depressione e viene utilizzato nella diagnosi iniziale.

   2. Riguardo Alimentazione e Attività Fisica I. Questionario FFQ che raccoglie i dati dietetici degli ultimi 12 mesi precedenti l'indagine II. Il questionario sull'attività fisica nel tempo libero Godin (The Godin-Shephard Leisure-Time Physical Activity Questionnaire (GSLTPAQ) Il GLTEQ (abbreviato in GSLTPAQ) è una delle scale più utilizzate per misurare l'attività fisica.
5. ecografia della radice mesenterica L'esame sarà effettuato in tutti i partecipanti al progetto da uno specialista in medicina interna certificato dalla PTU per eseguire ultrasuoni, con l'ausilio di un ecografo Aixplorer (SuperSonic Imagine) utilizzando un lineare L18-5 o convesso C6-1X tipo testa.

6. valutazione non invasiva della fibrosi epatica e della steatosi (nel complesso, per identificare un sottogruppo con NAFLD)

   1. Elastografia SWE La ricerca verrà eseguita con un Aixplorer di SuperSonic Imagine utilizzando una testa convessa di tipo C6-1X in modalità SWE (elastografia a onde di taglio) dal ricercatore principale.
   2. UGAP Nel sistema dei parametri di attenuazione guidata dagli ultrasuoni (UGAP), l'attenuazione viene quantificata e rappresentata da una mappa di colori in una presentazione di tipo B in tempo reale.
   3. Fibroscan La misurazione non invasiva del grado di fibrosi epatica verrà eseguita con il dispositivo FibroScan dal ricercatore principale.
   4. Test del respiro idrogeno-metano I test verranno eseguiti utilizzando l'analizzatore di idrogeno e metano BreathTracker S.C. di Quintron.

Secondo le linee guida dell'American College of Gastroenterology (ACG), un risultato positivo del test dell'idrogeno è considerato un aumento di ≥ 20 ppm dal basale al 90° minuto del test. Un risultato positivo del test del metano è considerato un aumento di ≥ 10 ppm in qualsiasi momento durante il test del respiro.

7. trattamento/intervento

1. rifaximina 1200 mg/die per 14 giorni (3 op. a 28 compresse) - tutti i pazienti

   Tutti i pazienti inclusi nello studio secondo lo standard di gestione terapeutica della SIBO riceveranno una prescrizione di rifaximina alla dose di 1200 mg/die per 14 giorni (Xifaxan 200 mg, 3 op. di 28 compresse, DS. 3 x 400 mg) . Secondo l'RCP, la rifaximina è registrata in Polonia per il trattamento di malattie gastrointestinali come le infezioni intestinali, ovvero una proliferazione batterica dell'intestino tenue. La dose suggerita varia da 200 mg (1 compressa) ogni 8 ore a 400 mg (2 compresse) ogni 8-12 ore. Secondo le linee guida dell’American College of Gastroenterology (ACG), è l’antibiotico suggerito per il trattamento della SIBO e l’efficacia della terapia con rifaximina alla dose di 550 mg tre volte al giorno è stimata al 61-78%. È un derivato semisintetico della rifamicina SV, si presenta nella forma α polimorfica, ha un effetto battericida e praticamente non viene assorbito dal tratto gastrointestinale. Il meccanismo d'azione si basa sul legame irreversibile della rifaximina alla subunità β della RNA polimerasi DNA-dipendente e, di conseguenza, sull'inibizione dell'RNA batterico e della sintesi proteica. La rifaximina presenta un ampio spettro di attività antimicrobica, comprendente la maggior parte dei batteri Gram-positivi e Gram-negativi, aerobi e anaerobi, comprese le specie produttrici di ammoniaca. Può inibire la proliferazione dei batteri che causano la deaminazione dell'urea, riducendo così la produzione di ammoniaca e di altre sostanze ritenute importanti nella patogenesi dell'encefalopatia epatica. Agisce localmente piuttosto che sistemicamente. Viene annoverato tra gli eubiotici, ovvero tipi di farmaci antimicrobici che, una volta introdotti nell'organismo, modificano la composizione della microflora intestinale. Il numero di effetti collaterali è ridotto, quindi la rifaximina è considerata un farmaco sicuro, ben studiato e altamente efficace.

   Controindicazioni: Ipersensibilità alla rifaximina o ad altre rifamicine, o ad uno qualsiasi degli eccipienti. Le reazioni di ipersensibilità comprendono dermatite esfoliativa, angioedema e anafilassi. Ostruzione intestinale, anche parziale, e grave danno intestinale ulceroso.

2. randomizzazione: rilascio di probiotici/placebo Probiotico, che conterrà una combinazione di quattro ceppi liofilizzati di batteri probiotici in DRcaps enteral capsuleTM. Si tratta di capsule che proteggono i probiotici dagli effetti dell'acido cloridrico nello stomaco, poiché si dissolvono solo nell'intestino. La composizione testata dei probiotici è in vendita, tra gli altri, in Polonia, Italia, Taiwan. Ha un parere positivo dell'Istituto "Pomnik-Centro per la salute dei bambini" n. 16/DJW/2022. La composizione nella tabella sottostante. Dosaggio 2x1 capsula al giorno.

   Placebo Capsule che sembrano identiche al probiotico e contengono fecola di patate e un guscio: idrossipropilmetilcellulosa, gomma di gellano.

3. Consultazione del dietista e emissione di raccomandazioni sulla dieta a basso contenuto di FODMAP La dieta a basso contenuto di FODMAP (LFD) è un protocollo di eliminazione basato sulla limitazione temporanea dell'assunzione di sostanze altamente fermentabili come fruttooligosaccaridi, oligosaccaridi, disaccaridi, monosaccaridi e polioli.

Condizioni per l'interruzione di un esperimento medico Il soggetto che conduce l'esperimento è obbligato a interromperlo se, nel corso dell'esperimento, sussiste un rischio per la salute del partecipante che supera i benefici attesi. La persona che partecipa all'esperimento può in qualsiasi momento (in qualsiasi fase dell'esperimento) revocare il consenso precedentemente prestato senza fornire alcuna motivazione. Quindi l'entità che conduce l'esperimento è obbligata a interromperlo.