益生菌辅助利福昔明治疗 SIBO 的功效

研究人员计划招募 100 名参与者参与研究。 对照组将由健康受试者（25 名受试者）组成，无 SIBO（氢甲烷测试呈阴性）且无 NAFLD（CAP<248dB/m，TE<6.5kPa）。 这些患者只会进行一次就诊，其中将进行腹部超声检查以评估肠系膜根淋巴结，并抽取血液进行生化测试，并抽取血液和粪便来确定肠道屏障完整性标记物。

该实验将于 2023 年 4 月起在 SONOMED 医疗中心进行。 直到 2025 年 4 月。

根据调查计划，项目期间共进行4次走访。 每次访问的计划程序概述如下。

表 1 研究方案访视 1（第 0 周）

• 肠系膜根部超声检查
• SWE 弹性成像、UGAP 和 Fibroscan（在每个人中识别 NAFLD 亚组）
• 处方问题：Xifaxan 1200mg/d，持续14天（3包，每包28片）
• 随机化
• 药物问题：4肠溶/安慰剂
• 咨询营养师（提出低 FODMAP 饮食第一阶段的建议）
• 人体测量
• 抽血
• 粪便样本的采集
• 完成疾病调查问卷
• 完成营养和身体活动调查问卷
• 发行SIBO症状日记

访视 2（第 6 周）

• 肠系膜根部超声检查，
• SWE 弹性成像 + UGAP 和 Fibroscan（NAFLD 亚组）
• 营养师咨询（控制低FODMAP饮食）
• 实施第二阶段饮食
• 人体测量
• 抽血
• 粪便样本的采集
• 完成疾病调查问卷
• 发行SIBO症状日记

第 3 次访视（第 12 周）

• 肠系膜根部超声检查
• SWE 弹性成像 + UGAP 和 Fibroscan（NAFLD 亚组）
• 营养师咨询（控制低FODMAP饮食）。 第三阶段的实施
• 人体测量
• 抽血
• 粪便样本的采集
• 完成疾病调查问卷
• 氢气-甲烷测试

随访（第 24 周）

• SWE 弹性成像 + UGAP 和 Fibroscan（NAFLD 亚组）
• 人体测量
• 完成疾病调查问卷

方法

1. 人体测量 所有患者均需禁食，使用 Tanita BC-545N 阻抗秤测量身高、体重、腹围、身体成分分析。

2. 静脉血的采集

   A。生化测试（15 ml 静脉血；禁食） 所有纳入的患者都将接受标准的生化测试，以评估肝功能和代谢（包括 AST、ALT、GGTP、甘油三酯、总胆固醇及其 HDL 分数）。 LDL、葡萄糖、HOMA-IR、CRP）。 在所有患者中，还将保存并储存血清用于测定促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IFN-γ），并在有病理淋巴结的患者中用于测定纤维发生指标（TGF-β、TIMP-1、PIIINP、PINP、IV 型胶原）和 IgG4 抗体。

   代谢组学分析（非目标代谢组、短链脂肪酸、三甲胺、三甲胺氧化物、硫酸吲哚酚、色氨酸分解代谢物）将在与飞行时间 (QTOF) 分析仪耦合的四极杆质谱仪上进行，该分析仪与高性能液体耦合AB Sciex 色谱仪 (UHPLC) - TripleTOF® 6600+。

   数据分析将通过代谢组分析系统-XCMSplus进行。

   C。研究血液中肠道屏障损伤标志物（每个凝块 4 毫升静脉血） 将测定所有纳入患者的肠道屏障损伤血浆指标：肠道脂肪酸结合蛋白 (I-FABP)、钙卫蛋白

   材料准备流程说明：

   我。 抽血后，放置约 30-60 分钟 ii。 旋转 - 3500-4000 rpm 旋转 5 分钟，iii. 提取血清并收集至3-4管（标准1.5-2ml）500ul（每种蛋白1管）

3. 收集 2 份粪便样本 将要求每位患者使用 Forged 试剂盒收集生物材料 (https://www.fecesvanger.nl/en_GB/c-2866881/product-info/)。 将从收集的粪便样本中进行代谢组学测试和肠道屏障损伤标记物的测定。

   开发 16S 序列的程序遵循地球微生物组计划期间使用的协议。 将使用 QIIME 工具进行生物信息学分析。 操作分类单元（OTU、sOTU）是使用两种替代方法（管道、算法）确定的。

   1. 粪便代谢组学测试 代谢组学分析（非目标代谢组、短链脂肪酸、三甲胺、氧化三甲胺、硫酸吲哚酚、色氨酸分解代谢物）将在与飞行时间 (QTOF) 分析仪耦合的四极杆质谱仪上进行，该分析仪与高通量质谱仪耦合。 -AB Sciex 的高效液相色谱仪 (UHPLC) - TripleTOF® 6600+。

      数据分析将通过代谢组分析系统-XCMSplus进行。

   2. 粪便中肠屏障损伤标志物的研究：IFAB-P、连蛋白、钙卫蛋白

4. 问卷调查：

   1. 关于 SIBO 相关疾病 I. SIBO 患者的症状日记（附录 1）根据 VAS 量表评估腹胀严重程度，并根据布里斯托大便量表评估排便情况。 视觉模拟量表（VAS）是一种用于主观评估疼痛的工具。 VAS 量表由一条 100 毫米长的线组成，两个端点分别表示 0（“无腹胀”）和 100（“难以忍受的腹胀”）。 要求患者在线上标记他或她所经历的腹胀的强度。

      布里斯托尔大便形状量表 (BSFS) 用于评估肠道通道和粪便的形状和稠度。 它包括 7 种基本的粪便类型，有助于评估排便的规律性。

      二. GSRS 量表（附录 2） 胃肠道症状评定量表 (GSRS) 问卷评估过去一周症状的严重程度和频率及其对日常功能的影响。 它由 15 个问题组成，涉及胃肠道疾病的 5 种一般症状。 使用 7 点李克特量表对问题进行评分，其中 1 表示不存在麻烦的症状，7 表示存在非常麻烦的症状。 获得的总分越高，症状越严重。

      三． PHQ-9 PHQ-9 患者健康问卷 (PHQ-9) 旨在筛查抑郁症，并用于初步诊断。

   2. 关于营养和身体活动 I. FFQ 问卷收集调查前最后 12 个月的饮食数据 II. 戈丁休闲时间锻炼问卷（Godin-Shephard 休闲时间身体活动问卷 (GSLTPAQ)） GLTEQ（缩写为 GSLTPAQ）是最广泛使用的衡量身体活动的量表之一。
5. 肠系膜根部超声检查将由 PTU 认证的内科专家在 Aixplorer 超声机 (SuperSonic Imagine) 的帮助下使用线性 L18-5 或凸面 C6-1X 对所有项目参与者进行检查类型头。

6. 肝纤维化和脂肪变性的无创评估（总之，以确定 NAFLD 亚组）

   1. SWE 弹性成像 该研究将由首席研究员在 SWE（剪切波弹性成像）模式下使用 SuperSonic Imagine 的 Aixplorer 进行，使用 Convex C6-1X 型头。
   2. UGAP 在超声引导衰减参数 (UGAP) 系统中，衰减被量化并通过实时 B 型演示中的彩色图表示。
   3. Fibroscan 首席研究员将使用 FibroScan 设备对肝纤维化程度进行非侵入性测量。
   4. 氢气-甲烷呼气测试 测试将使用 Quintron 的 BreathTracker S.C. 氢气和甲烷分析仪进行。

根据美国胃肠病学会 (ACG) 的指导方针，氢测试结果呈阳性被视为在测试第 90 分钟内较基线升高 ≥ 20 ppm。 在呼气测试期间的任何时间，甲烷测试结果呈阳性均被视为增加 ≥ 10 ppm。

7. 治疗/干预

1. 利福昔明 1200 mg/d，持续 14 天（3 种药物，28 片）- 所有患者

   根据 SIBO 治疗管理标准纳入研究的所有患者均将接受利福昔明处方，剂量为 1200 mg/d，持续 14 天（Xifaxan 200 mg，3 片 28 片，DS. 3 x 400 mg） 。 据 SmPC 称，利福昔明在波兰注册用于治疗胃肠道疾病，例如肠道感染，即小肠细菌过度生长。 建议剂量范围为每 8 小时 200 毫克（1 片）至每 8-12 小时 400 毫克（2 片）。 根据美国胃肠病学会（ACG）指南，它是治疗SIBO的推荐抗生素，利福昔明550mg每天3次的治疗效果估计为61-78%。 它是利福霉素SV的半合成衍生物，以α多晶型形式存在，具有杀菌作用，并且几乎不从胃肠道吸收。 作用机制基于利福昔明与 DNA 依赖性 RNA 聚合酶的 β 亚基不可逆结合，从而抑制细菌 RNA 和蛋白质合成。 利福昔明具有广谱抗菌活性，包括大多数革兰氏阳性和革兰氏阴性、需氧和厌氧细菌，包括产氨菌种。 它可以抑制引起尿素脱氨基的细菌增殖，从而减少氨和其他被认为在肝性脑病发病机制中起重要作用的物质的产生。 它是局部作用的，而不是系统性的。 它被视为益生元，是一种抗菌药物，当被引入体内时，会改变肠道微生物群的组成。 副作用很少，因此利福昔明被认为是一种安全、经过充分研究且高效的药物。

   禁忌症：对利福昔明或其他利福霉素或任何赋形剂过敏。 超敏反应包括剥脱性皮炎、血管性水肿和过敏反应。 肠梗阻，甚至部分性，以及严重的溃疡性肠道损害。

2. 随机化：益生菌/安慰剂释放益生菌，其中包含 DRcaps 肠内胶囊中四种冻干益生菌菌株的组合。 这些胶囊可以保护益生菌免受胃中盐酸的影响，因为它们只在肠道中溶解。 经过测试的益生菌组合物在波兰、意大利、台湾等国家/地区销售。 它对“Pomnik-儿童健康中心”研究所的第 16/DJW/2022 号有积极意见。 其组成如下表。 剂量每天 2x1 粒胶囊。

   安慰剂胶囊看起来与益生菌相同，含有马铃薯淀粉和外壳：羟丙基甲基纤维素、结冷胶。

3. 营养师咨询并发布低 FODMAP 饮食建议 低 FODMAP 饮食 (LFD) 是一种基于暂时限制高发酵物质（如低聚果糖、寡糖、二糖、单糖和多元醇）摄入量的消除方案。

中止医学实验的条件 如果在实验过程中，参与者的健康面临超过预期收益的风险，则进行实验的受试者有义务中止医学实验。 参与实验的人可以随时（在实验的任何阶段）撤销先前给予的同意，而无需给出理由。 那么进行实验的实体就有义务停止实验。