Effekten af ​​probiotika som et supplement til behandling af SIBO med Rifaximin

Efterforskerne planlægger at inkludere 100 deltagere i undersøgelsen. Kontrolgruppen vil bestå af raske forsøgspersoner (25 forsøgspersoner) uden SIBO (med en negativ hydrogen-methan test) og uden NAFLD (CAP<248dB/m, TE<6,5kPa). Disse patienter vil kun have ét besøg, hvor der vil blive udført en abdominal ultralyd med vurdering af mesenteriske rodlymfeknuder, og der vil blive udtaget blod til biokemiske tests, samt blod og afføring til bestemmelse af integritetsmarkører i tarmbarrieren.

Eksperimentet vil blive udført på SONOMED Medical Center fra april 2023. indtil april 2025.

Ifølge undersøgelsesordningen vil der i alt blive aflagt 4 besøg i løbet af projektet. De planlagte procedurer ved hvert besøg er skitseret nedenfor.

Tabel 1 Skema for undersøgelsen Besøg 1 (Uge 0)

• Ultralyd af den mesenteriske rod
• SWE elastografi, UGAP og Fibroscan (i alle for at identificere undergruppen med NAFLD)
• Receptproblem: Xifaxan 1200mg/d i 14 dage (3 pakker, 28 tabletter hver)
• Randomisering
• stofproblem: 4Enteric/Placebo
• Konsultation af en ernæringsekspert (udstedelse af anbefalinger til trin 1 af lavFODMAP-diæten)
• antropometriske målinger
• blodudtagning
• indsamling af en afføringsprøve
• udfyldelse af sygdomsspørgeskemaer
• Udfyldelse af spørgeskemaer om ernæring og fysisk aktivitet
• udstedelse af SIBO symptomdagbøger

Besøg 2 (uge 6)

• Ultralyd af den mesenteriske rod,
• SWE elastografi + UGAP og Fibroscan (i undergruppen med NAFLD)
• Diætistkonsultation (kontrol af lav FODMAP diæt)
• Implementering af 2. fase af diæten
• antropometriske målinger
• blodudtagning
• indsamling af en afføringsprøve
• udfyldelse af sygdomsspørgeskemaer
• udstedelse af SIBO symptomdagbøger

Besøg 3 (uge 12)

• Ultralyd af den mesenteriske rod
• SWE elastografi + UGAP og Fibroscan (i undergruppen med NAFLD)
• Diætistkonsultation (kontrol af lavFODMAP diæt). Implementering af fase 3
• antropometriske målinger
• blodudtagning
• indsamling af en afføringsprøve
• udfyldelse af sygdomsspørgeskemaer
• hydrogen-methan test

Opfølgning (uge 24)

• SWE elastografi + UGAP og Fibroscan (i undergruppen med NAFLD)
• antropometriske målinger
• udfyldelse af sygdomsspørgeskemaer

Metode

1. Antropometriske målinger Måling af højde, vægt, abdominal omkreds, kropssammensætningsanalyse ved hjælp af Tanita BC-545N impedansskalaen vil blive udført på alle fastende patienter.

2. Indsamling af venøst ​​blod

   en. Biokemiske tests (15 ml veneblod; fastende) Alle inkluderede patienter vil gennemgå et standardpanel af biokemiske tests for at vurdere leverfunktion og metabolisme (inklusive AST, ALT, GGTP, triglycerider, total kolesterol og dets HDL-fraktioner. LDL, glucose, HOMA-IR, CRP). Hos alle patienter vil serum også blive sikret og opbevaret til bestemmelse af pro-inflammatoriske cytokiner (TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IFN-γ) og hos patienter med patologiske lymfeknuder til bestemmelsen af fibrogenese-indikatorer (TGF-β, TIMP-1, PIIINP, PINP, kollagen IV) og IgG4-antistoffer.

   Metabolomisk analyse (ikke-målrettet metabolom, kortkædede fedtsyrer, trimethylaminer, trimethylaminoxid, indoxylsulfat, tryptophankatabolitter) vil blive udført på et quadrupol massespektrometer koblet til en time-of-flight (QTOF) analysator koblet til en højtydende væske kromatograf (UHPLC) fra AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

   Dataanalyse vil blive udført af metabolomisk analysesystem - XCMSplus.

   c. Undersøgelse af markører for tarmbarriereskade i blod (4 ml venøst ​​blod pr. koagel) Plasmaindikatorer for tarmbarriereskade vil blive bestemt hos alle inkluderede patienter: intestinalt fedtsyrebindende protein (I-FABP ), calprotectin

   Beskrivelse af proceduren til forberedelse af materialet:

   jeg. Efter at blodet er udtaget, sættes det til side i ca. 30-60 minutter ii. Spinning - 5 minutter ved 3500-4000 rpm, iii. Ekstraher serum og opsaml i 3-4 rør (standard 1,5-2 ml) på 500 ul (1 rør for hvert protein)

3. indsamling af 2 afføringsprøver. Hver patient vil blive bedt om at indsamle biologisk materiale ved hjælp af Forged kit (https://www.fecesvanger.nl/en_GB/c-2866881/product-info/). Metabolomiske tests og bestemmelse af markører for tarmbarriereskade vil blive udført fra de indsamlede afføringsprøver.

   Procedurerne til udvikling af 16S-sekvenserne følger de protokoller, der blev brugt under Earth Microbiome Project. Bioinformatikanalyse vil blive udført ved hjælp af QIIME-værktøjet. Operationelle taksonomiske enheder (OTU'er, sOTU'er) bestemmes ved hjælp af to alternative metoder (pipelines, algoritmer).

   1. Fækal metabolomisk test Metabolomisk analyse (ikke-målrettet metabolom, kortkædede fedtsyrer, trimethylaminer, trimethylaminoxid, indoxylsulfat, tryptophankatabolitter) vil blive udført på et quadrupol massespektrometer koblet til en time-of-flight (QTOF) analysator koblet til en høj -performance væskekromatograf (UHPLC) fra AB Sciex - TripleTOF® 6600+.

      Dataanalyse vil blive udført af metabolomisk analysesystem - XCMSplus.

   2. Undersøgelse af markører for tarmbarriereskade i fæces: IFAB-P, zonulin, calprotectin

4. Spørgeskemaer:

   1. vedrørende SIBO relaterede lidelser I. Dagbog over symptomer hos en patient med SIBO (bilag 1) Vurdering af oppustetheds sværhedsgrad ud fra VAS skalaen og vurdering af afføring ud fra Bristol afføringsskalaen. Visual Analog Scale (VAS) er et værktøj, der bruges til subjektiv vurdering af smerte. VAS-skalaen består af en linje, der er 100 mm lang, med to endepunkter, der angiver 0 ("ingen oppustethed") og 100 ("uudholdelig oppustethed"). Patienten bliver bedt om at markere på stregen intensiteten af ​​den oppustethed, han eller hun oplever.

      Bristol Stool Form Scale (BSFS) bruges til at vurdere tarmpassage og afføringsform og konsistens. Den omfatter 7 grundlæggende typer afføring, der hjælper med at vurdere regelmæssigheden af ​​afføring.

      II. GSRS-skalaen (bilag 2) Spørgeskemaet Gastrointestinal Symptom Rating Scale (GSRS) vurderer sværhedsgraden og hyppigheden af ​​symptomer i løbet af den seneste uge og deres indvirkning på den daglige funktion. Den består af 15 spørgsmål, der vedrører 5 generelle symptomer fundet ved mave-tarmsygdomme. Spørgsmålene bedømmes ved hjælp af en 7-punkts Likert-skala, hvor 1 indikerer fravær af generende symptomer og 7 indikerer tilstedeværelse af meget generende symptomer. Jo højere den samlede score opnået, jo større er sværhedsgraden af ​​symptomerne.

      III. PHQ-9 PHQ-9 Patient Health Questionnaire (PHQ-9) er designet til at screene for depression og bruges i den indledende diagnose.

   2. Angående ernæring og fysisk aktivitet I. FFQ-spørgeskema, der indsamler kostdata fra de sidste 12 måneder forud for undersøgelsen II. Godin Leisure Time Exercise Questionnaire (The Godin-Shephard Leisure-Time Physical Activity Questionnaire (GSLTPAQ) GLTEQ (forkortet til GSLTPAQ) er en af ​​de mest brugte skalaer til at måle fysisk aktivitet.
5. mesenterisk rod ultralyd Undersøgelsen vil blive udført i alle projektdeltagere af en specialist i intern medicin certificeret af PTU til at udføre ultralyd, ved hjælp af en Aixplorer ultralydsmaskine (SuperSonic Imagine) ved hjælp af en lineær L18-5 eller konveks C6-1X type hoved.

6. ikke-invasiv vurdering af leverfibrose og steatose (i alt for at identificere en undergruppe med NAFLD)

   1. SWE elastografi Forskningen vil blive udført med en Aixplorer fra SuperSonic Imagine ved hjælp af et Convex C6-1X type hoved i SWE (shear wave elastography) mode af Principal Investigator.
   2. UGAP I UGAP-systemet (ultralyd-guided attenuation parameter) kvantificeres dæmpningen og repræsenteres af et farvekort i en real-time B-type præsentation.
   3. Fibroscan Non-invasiv måling af graden af ​​leverfibrose vil blive udført med FibroScan-enheden af ​​Principal Investigator.
   4. Hydrogen-methan udåndingstest Testene vil blive udført ved hjælp af Quintrons BreathTracker S.C. hydrogen- og metananalysator.

Ifølge retningslinjerne fra American College of Gastroenterology (ACG) betragtes et positivt hydrogentestresultat som en stigning på ≥ 20 ppm fra baseline til det 90. minut af testen. Et positivt metantestresultat betragtes som en stigning på ≥ 10 ppm på et hvilket som helst tidspunkt under udåndingsprøven.

7. behandling/intervention

1. rifaximin 1200 mg/d i 14 dage (3 op. a 28 tabletter) - alle patienter

   Alle patienter inkluderet i undersøgelsen i henhold til standarden for terapeutisk behandling af SIBO vil modtage en recept på rifaximin i en dosis på 1200 mg/d i 14 dage (Xifaxan 200 mg, 3 op. af 28 tabletter, DS. 3 x 400 mg) . Ifølge produktresuméet er rifaximin registreret i Polen til behandling af mave-tarmsygdomme såsom tarminfektioner, som er bakteriel overvækst af tyndtarmen. Den foreslåede dosis varierer fra 200 mg (1 tablet) hver 8. time til 400 mg (2 tabletter) hver 8.-12. time. Ifølge retningslinjerne fra American College of Gastroenterology (ACG) er det det foreslåede antibiotikum til behandling af SIBO, og effektiviteten af ​​terapi med rifaximin i en dosis på 550 mg tre gange dagligt anslås til 61-78%. Det er et semisyntetisk derivat af rifamycin SV, forekommer i α-polymorf form, har en bakteriedræbende virkning og absorberes praktisk talt ikke fra mave-tarmkanalen. Virkningsmekanismen er baseret på irreversibel binding af rifaximin til β-underenheden af ​​DNA-afhængig RNA-polymerase og som følge heraf hæmning af bakteriel RNA og proteinsyntese. Rifaximin udviser et bredt spektrum af antimikrobiel aktivitet, herunder de fleste gram-positive og gram-negative, aerobe og anaerobe bakterier, herunder ammoniak-producerende arter. Det kan hæmme spredningen af ​​bakterier, der forårsager urea-deaminering, og derved reducere produktionen af ​​ammoniak og andre stoffer, der menes at spille en vigtig rolle i patogenesen af ​​hepatisk encefalopati. Det virker topisk frem for systemisk. Det regnes blandt eubiotika, som er typer af antimikrobielle lægemidler, der, når de indføres i kroppen, ændrer sammensætningen af ​​tarmmikrofloraen. Antallet af bivirkninger er lille, hvorfor rifaximin betragtes som et sikkert, velundersøgt og yderst effektivt lægemiddel.

   Kontraindikationer: Overfølsomhed over for rifaximin eller andre rifamyciner eller over for et eller flere af hjælpestofferne. Overfølsomhedsreaktioner omfatter eksfoliativ dermatitis, angioødem og anafylaksi. Intestinal obstruktion, selv delvis, og alvorlig ulcerativ tarmskade.

2. randomisering: probiotisk/placebofrigivelse Probiotikum, som vil indeholde en kombination af fire frysetørrede stammer af probiotiske bakterier i DRcaps enterale kapslerTM. Det er kapsler, der beskytter probiotika mod virkningerne af saltsyre i maven, da de kun opløses i tarmene. Den testede sammensætning af probiotika er til salg i blandt andet Polen, Italien, Taiwan. Det har en positiv udtalelse fra Instituttet "Pomnik-Center for Børns Sundhed" nr. 16/DJW/2022. Sammensætningen i nedenstående tabel. Dosering 2x1 kapsel pr. dag.

   Placebo-kapsler, der ser identiske ud med probiotika og indeholder kartoffelstivelse og en skal: hydroxypropylmethylcellulose, gellangummi.

3. Diætistkonsultation og udsendelse af anbefalinger om lav FODMAPs diæt Low-FODMAPs diæten (LFD) er en elimineringsprotokol baseret på midlertidig begrænsning af indtagelsen af ​​stærkt fermenterbare stoffer som fructooligosaccharider, oligosaccharider, disaccharider, monosaccharider og polyoler.

Betingelser for at afbryde et medicinsk forsøg Den forsøgsperson, der udfører forsøget, er forpligtet til at afbryde det, hvis der i løbet af forsøget er en risiko for deltagerens helbred, der overstiger det forventede udbytte. Den person, der deltager i forsøget, kan til enhver tid (på et hvilket som helst tidspunkt af forsøget) tilbagekalde det tidligere afgivne samtykke uden at give en begrundelse. Så er den enhed, der udfører eksperimentet, forpligtet til at stoppe det.