同种异体细胞因子诱导的杀伤免疫疗法治疗血液系统恶性肿瘤同种异体骨髓移植后的复发 (alloCIK)

1. 患者纳入标准 该试验仅包括同种异体移植后复发的患者，这些患者具有 1.1 对至少一剂常规 DLI 无反应，或 1.2 重复剂量的 DLI 不可能获得大量供体淋巴细胞，这适用于无关移植或脐带血移植的情况

   1,3 对常规 DLI 发生显着 GVHD，但没有其他治疗选择的患者。 在这种情况下，基本原理是基于对不匹配的 CIK 产生的 GVHD 比不匹配的未经处理的脾细胞产生的 GVHD 少得多的小鼠研究。

2. 外周血干细胞 (PBSC) 的采集 同种异体供体的同胞通常会采集其 PBSC，用于输注到受体中。 目前，我们的做法涉及额外收集一天以冻结作为备份，以在复发时用于 DLI。 该系列以几份冷冻，需要时可用于 CIK 培养

   对于脐带血移植，一个问题是无法进行 DLI。 有一份报告称，输注后脐带血袋中的残留细胞可培养出 CIK，然后冷冻保存，以备日后需要时使用。 这无论如何都不会影响脐带血输注。 同样，这可以在无关供体移植的情况下完成。 这将作为备用，以防供体无法重复收集淋巴细胞。

3. CIK细胞培养

对于来自冷冻产品的培养物，将其快速解冻并在透气袋中开始培养，放入完全培养基和细胞因子，详见所附 SOP（附录 1）。 周期性加入培养基和细胞因子直至CIK在21-28天之间成熟。

对于解冻脐带血输液袋中残留细胞的培养，细胞可能需要经过聚蔗糖去除红细胞，然后以类似的方式开始培养

3. CIK 细胞的收获

在 D21-D28 之间成熟时，将所有袋子的 CIK 细胞收集起来并使用 COBE 2991 细胞收集器清洗。 这将确保去除 >99.9% 的原始培养基。 然后冷冻细胞并将等分试样送去进行质量控制以确保符合 GMP 标准。 这包括细菌学和真菌培养、支原体和内毒素检测。

4. CIK 细胞输注 患者可能会接受主治医师认为适合每个个案的细胞减灭性化学疗法或口服免疫抑制疗法。 在淋巴细胞减少的最低点，CIK 细胞在床边迅速解冻并输注。

CIK 细胞的剂量和时间表遵循以下原则 4.1 已接受 DLI 并表现出耐药性的患者的首次剂量：最后一次 DLI 剂量的两倍或三倍（表示为 CD3/kg）。

4.2 未接受任何 DLI 患者的首剂：这将遵循 DLI 的常规做法，首剂为 1000 万 CD3/kg。

4.3 随后的剂量将以 4 周的间隔给予，以便有时间观察 GVHD 的发展和反应。

4.3.1 如果没有观察到反应，剂量将增加一倍或三倍（取决于可用等分试样的大小）。 如果反应良好，剂量将与之前输注相同。

4.3.2 在存在 GVHD 的情况下，将暂停输注直至 GVHD 解决，然后以先前剂量的一半或三分之一恢复（取决于可用等分试样的大小）。

4.4 CIK 输注的持续时间将取决于反应状态 4.4.1 在反应患者中，将持续 4 周 CIK 输注直至达到完全缓解，然后再输注 2-3 次。

4.4.2 在达到稳定部分反应的患者中，CIK 输注将以 4 周为间隔继续，前提是没有不良反应并且有 CIK 细胞可用。 如果疾病爆发，这将继续并停止。

4.4.3 在 CIK 输注 2-3 个周期后疾病继续进展的患者，将不再输注