Allogeniczna immunoterapia zabójców indukowana cytokinami w przypadku nawrotu choroby nowotworowej układu krwiotwórczego po allogenicznym przeszczepie szpiku (alloCIK)

1. Kryteria włączenia pacjentów To badanie obejmuje tylko pacjentów, u których doszło do nawrotu choroby po przeszczepie allogenicznym, którzy albo 1,1 nie uzyskali odpowiedzi na konwencjonalne DLI podane dla co najmniej jednej dawki, albo 1,2 Brak możliwości dostępu do dużej liczby limfocytów dawcy dla powtarzanych dawek DLI, Dotyczy to przypadków przeszczepu niespokrewnionego lub przeszczepu krwi pępowinowej

   1,3 Pacjenci, u których rozwinęła się istotna GVHD w stosunku do konwencjonalnego DLI, ale nie mieli innej opcji terapeutycznej. W takich przypadkach uzasadnienie opiera się na badaniach na myszach niedopasowanych CIK wytwarzających znacznie mniej GVHD niż niedopasowane niezmanipulowane splenocyty.

2. Pobieranie komórek macierzystych krwi obwodowej (PBSC) Od allogenicznych dawców rodzeństwa będzie rutynowo pobierane PBSC w celu podania ich biorcom. Obecnie nasza praktyka obejmuje jeden dodatkowy dzień gromadzenia danych do zamrożenia jako kopię zapasową do wykorzystania przez DLI w przypadku nawrotu. Ta kolekcja jest zamrażana w kilku podwielokrotnościach i jest dostępna do hodowli CIK, gdy zajdzie taka potrzeba

   W przypadku przeszczepu krwi pępowinowej jednym problemem jest to, że DLI nie jest dostępne. Istnieje jeden raport na temat hodowli CIK z komórek resztkowych w workach z krwią pępowinową po infuzji, a następnie przechowywanych w stanie zamrożonym do wykorzystania w przyszłości, jeśli zajdzie taka potrzeba. Nie wpływa to w żaden sposób na infuzję krwi pępowinowej. Podobnie można to zrobić w przypadku przeszczepu od dawcy niespokrewnionego. Będzie to służyć jako zabezpieczenie na wypadek, gdyby dawca nie był dostępny do ponownego pobrania limfocytów.

3. Hodowla komórek CIK

W przypadku hodowli z zamrożonego produktu należy go szybko rozmrozić i rozpocząć hodowlę w workach przepuszczających gaz, w kompletnej pożywce i cytokinie, jak wyszczególniono w załączonej SOP (dodatek 1). Pożywkę hodowlaną i cytokinę dodaje się okresowo aż do dojrzewania CIK w okresie 21-28 dni.

W przypadku hodowli z komórek resztkowych w rozmrożonych workach do infuzji krwi pępowinowej, komórki mogą wymagać ficoll w celu usunięcia rbc, a następnie rozpocząć hodowlę w podobny sposób

3. Zbieranie komórek CIK

W okresie dojrzałości między D21-D28 wszystkie worki komórek CIK łączy się i przemywa przy użyciu urządzenia do zbierania komórek COBE 2991. Zapewni to usunięcie >99,9% oryginalnej pożywki hodowlanej. Komórki są następnie zamrażane, a porcje wysyłane do kontroli jakości w celu zapewnienia zgodności ze standardem GMP. Obejmuje to hodowlę bakteriologiczną i grzybiczą, mykoplazmę i badanie endotoksyn.

4. Infuzja komórek CIK Chorzy mogą być poddani chemioterapii cytoredukcyjnej lub doustnej terapii immunosupresyjnej, w zależności od indywidualnego przypadku wskazanego przez lekarza prowadzącego. W najniższym punkcie limfopenii komórki CIK są szybko rozmrażane przy łóżku chorego i podawane w infuzji.

Dawka i schemat podawania komórek CIK jest zgodny z następującą zasadą 4.1. Pierwsza dawka dla pacjentów, którzy otrzymali już DLI i wykazali oporność: podwójna lub trzykrotna dawka ostatniej DLI (wyrażona jako CD3/kg).

4.2 Pierwsza dawka dla pacjentów, którzy nie otrzymali żadnego DLI: będzie to zgodne z konwencjonalną praktyką DLI, gdzie pierwsza dawka będzie wynosić 10 milionów CD3/kg.

4.3 Kolejne dawki będą podawane w odstępach 4-tygodniowych, dając czas na obserwację rozwoju GVHD i odpowiedzi.

4.3.1 Jeśli nie zaobserwowano odpowiedzi, dawka zostanie podwojona lub potrojona (w zależności od wielkości dostępnej porcji). W przypadku dobrej odpowiedzi dawka pozostanie taka sama jak w poprzednim wlewie.

4.3.2 W przypadku obecności GVHD infuzja zostanie wstrzymana do czasu ustąpienia GVHD, a następnie wznowiona z połową lub jedną trzecią poprzedniej dawki (w zależności od wielkości dostępnej porcji).

4.4 Czas trwania wlewu CIK będzie zależał od stanu odpowiedzi. 4.4.1 U pacjentów z odpowiedzią na leczenie wlew CIK będzie kontynuowany co 4 tygodnie do uzyskania całkowitej remisji, a następnie kolejne 2-3 wlewy.

4.4.2 U pacjentów, u których uzyskano stabilną częściową odpowiedź, wlew CIK będzie kontynuowany w odstępie 4-tygodniowym, pod warunkiem braku działań niepożądanych i dostępności komórek CIK. To będzie trwało i ustanie, jeśli choroba się przebije.

4.4.3 U pacjentów, u których choroba nadal postępuje po 2-3 cyklach infuzji CIK, dalsze infuzje nie będą podawane