Alogenní cytokiny indukovaná zabijácká imunoterapie pro relaps po alogenní transplantaci dřeně pro hematologické malignity (alloCIK)

1. Kritéria pro zařazení pacientů Tato studie zahrnuje pouze pacienty, u kterých došlo k relapsu po alogenní transplantaci, kteří buď 1,1 nemají žádnou odpověď na konvenční DLI podanou alespoň jednou dávkou, nebo 1,2 Žádná možnost přístupu k velkému počtu dárcovských lymfocytů pro opakované dávky DLI, To platí pro případy nepříbuzné transplantace nebo transplantace pupečníkové krve

   1,3 Pacienti, u kterých se vyvinula signifikantní GVHD oproti konvenční DLI, ale neměli jinou terapeutickou možnost. V takových případech je zdůvodnění založeno na myších studiích neshodných CIK produkujících mnohem méně GVHD než neshodné nemanipulované splenocyty.

2. Odběr kmenových buněk periferní krve (PBSC) Sourozeneckým alogenním dárcům budou běžně odebírány PBSC pro účely infuze příjemcům. V současné době naše praxe zahrnuje jeden další den odběru, který se má zmrazit jako záloha pro použití pro DLI v případě relapsu. Tato sbírka je zmrazena v několika alikvotech a je k dispozici pro kultivaci CIK v případě potřeby

   U transplantace pupečníkové krve je jedním problémem to, že DLI není k dispozici. Existuje jedna zpráva o růstu CIK ze zbytkových buněk ve vacích s pupečníkovou krví po infuzi, které se pak v případě potřeby uchovávají zmrazené pro budoucí použití. To v žádném případě neohrozí infuzi pupečníkové krve. Podobně to lze provést v případě transplantace nepříbuzného dárce. Ta poslouží jako záloha v případě, že dárce nebude k dispozici pro opakovaný odběr lymfocytů.

3. Kultivace buněk CIK

U kultury ze zmrazeného produktu se tento rychle rozmrazí a kultivace se zahájí ve vacích propustných pro plyn v kompletním médiu a cytokinu, jak je podrobně popsáno v připojeném SOP (příloha 1). Kultivační médium a cytokin se přidávají periodicky až do zrání CIK mezi 21-28 dny.

Pro kultivaci ze zbytkových buněk v rozmražených infuzních vacích s pupečníkovou krví může být nutné buňky podrobit ficoll, aby se odstranily červené krvinky, a poté zahajte kultivaci podobným způsobem

3. Sběr buněk CIK

Ve zralosti mezi D21-D28 se všechny vaky s buňkami CIK shromáždí a promyjí pomocí COBE 2991 cell harvesteru. To zajistí odstranění > 99,9 % původního kultivačního média. Buňky se poté zmrazí a alikvoty se pošlou ke kontrole kvality, aby se zajistila shoda se standardem GMP. To zahrnuje bakteriologické a mykotické kultivace, mykoplazmové a endotoxinové testování.

4. Infuze buněk CIK Pacienti mohou podstoupit cytoredukční chemoterapii nebo perorální imunosupresivní terapii, jak to ošetřující lékař v každém jednotlivém případě považuje za vhodné. V nejnižším bodě lymfopenie jsou buňky CIK rychle rozmraženy u lůžka a podány infuzí.

Dávka a schéma buněk CIK se řídí následujícím principem 4.1 První dávka pro pacienty, kteří již dostali DLI a projevili rezistenci: při dvojnásobné nebo trojnásobné poslední dávce DLI (vyjádřeno jako CD3/kg).

4.2 První dávka pro pacienty, kteří nedostali žádnou DLI: bude se řídit konvenční praxí DLI, kde první dávka bude 10 milionů CD3/kg.

4.3 Následné dávky budou podávány ve 4týdenních intervalech, což umožní pozorování vývoje GVHD a odpovědi.

4.3.1 Pokud nebyla pozorována žádná odpověď, dávka se zdvojnásobí nebo ztrojnásobí (v závislosti na velikosti dostupného alikvotu). Pokud je odpověď dobrá, dávka zůstane stejná jako u předchozí infuze.

4.3.2 V přítomnosti GVHD bude infuze pozastavena až do vyřešení GVHD, poté bude obnovena v polovině nebo jedné třetině předchozí dávky (v závislosti na velikosti dostupného alikvotu).

4.4 Doba trvání infuze CIK bude záviset na stavu odpovědi. 4.4.1 U pacientů, kteří reagují, bude pokračovat 4týdenní infuze CIK, dokud není dosaženo úplné remise, a poté další 2–3 infuze.

4.4.2 U pacientů, kteří dosáhnou stabilní částečné odpovědi, bude infuze CIK pokračovat ve 4týdenním intervalu za předpokladu, že nedojde k nežádoucímu účinku a budou k dispozici buňky CIK. Toto bude pokračovat a zastaví se, pokud nemoc propukne.

4.4.3 U pacientů, u kterých onemocnění pokračuje v progresi po 2-3 cyklech infuze CIK, se další infuze nepodává