Аллогенная цитокин-индуцированная киллерная иммунотерапия при рецидиве после аллогенной трансплантации костного мозга при гематологических злокачественных новообразованиях (alloCIK)

1. Критерии включения пациентов В это исследование включаются только пациенты с рецидивом после аллогенной трансплантации, у которых либо 1,1 нет ответа на стандартную DLI, введенную по крайней мере для одной дозы, либо 1,2 Нет возможности доступа к большому количеству донорских лимфоцитов для повторных доз DLI, Это касается случаев неродственной трансплантации или трансплантации пуповинной крови.

   1,3 Пациенты, у которых развилась значительная РТПХ на фоне обычного DLI, но у которых не было других вариантов лечения. В таких случаях обоснование основано на исследованиях на мышах несовпадающих CIK, производящих гораздо меньше РТПХ, чем несовпадающие неманипулированные спленоциты.

2. Сбор стволовых клеток периферической крови (PBSC) У родных аллогенных доноров обычно собирают PBSC для инфузии реципиентам. В настоящее время наша практика предусматривает замораживание сбора на один дополнительный день в качестве резервной копии, которая будет использоваться для DLI в случае рецидива. Эта коллекция замораживается в нескольких аликвотах и ​​доступна для культивирования CIK, когда возникает необходимость.

   Одной из проблем трансплантации пуповинной крови является то, что DLI недоступен. Есть один отчет о выращивании CIK из остаточных клеток в мешках с пуповинной кровью после инфузии, которые затем хранятся в замороженном виде для использования в будущем, если возникнет необходимость. Это никоим образом не ставит под угрозу инфузию пуповинной крови. Аналогичным образом это можно сделать и в случае трансплантации от неродственного донора. Это послужит резервной копией на случай, если донор не будет доступен для повторного забора лимфоцитов.

3. Культура клеток CIK

Для культивирования замороженного продукта его быстро оттаивают и начинают культивирование в газопроницаемых мешках в полной среде и цитокине, как подробно описано в прилагаемой СОП (приложение 1). Периодически добавляют культуральную среду и цитокин до созревания CIK в период между 21-28 днями.

Для культивирования из остаточных клеток в размороженных инфузионных пакетах пуповинной крови может потребоваться обработка клеток фиколлом для удаления эритроцитов, а затем начать культивирование аналогичным образом.

3. Сбор клеток CIK

При созревании в период между D21-D28 все пакеты с клетками CIK объединяют и промывают с использованием устройства для сбора клеток COBE 2991. Это обеспечит удаление> 99,9% исходной культуральной среды. Затем клетки замораживают, а аликвоты отправляют на контроль качества, чтобы обеспечить соответствие стандарту GMP. Это включает в себя бактериологический и грибковый посев, тестирование на микоплазму и эндотоксины.

4. Инфузия клеток CIK. Пациентам может быть назначена циторедуктивная химиотерапия или пероральная иммуносупрессивная терапия по усмотрению лечащего врача в каждом отдельном случае. На пике лимфопении клетки CIK быстро размораживают у постели больного и вливают.

Доза и график введения клеток CIK следуют следующему принципу: 4.1 Первая доза для пациентов, которые уже получили DLI и показали резистентность: в двойном или тройном размере по сравнению с последней дозой DLI (выражается в CD3/кг).

4.2 Первая доза для пациентов, которые не получали DLI: это будет следовать общепринятой практике DLI, где первая доза будет составлять 10 миллионов CD3/кг.

4.3 Последующие дозы будут вводиться с интервалом в 4 недели, что дает время для наблюдения за развитием РТПХ и реакцией.

4.3.1 Если ответа не наблюдалось, дозу удваивают или утраивают (в зависимости от размера доступной аликвоты). Если есть хороший ответ, доза останется такой же, как и предыдущая инфузия.

4.3.2 При наличии РТПХ инфузия будет приостановлена ​​до разрешения РТПХ, а затем возобновлена ​​в половине или одной трети предыдущей дозы (в зависимости от размера доступной аликвоты).

4.4 Продолжительность инфузии CIK будет зависеть от статуса ответа. 4.4.1 У пациентов с ответом 4-недельная инфузия CIK будет продолжаться до достижения полной ремиссии, а затем еще 2-3 инфузии.

4.4.2 У пациентов, у которых достигнут стабильный частичный ответ, инфузия CIK будет продолжена с 4-недельным интервалом при условии отсутствия побочных эффектов и наличия клеток CIK. Это будет продолжаться и остановится, если болезнь прорвется наружу.

4.4.3 У пациентов, у которых заболевание продолжает прогрессировать после 2-3 циклов инфузии CIK, дальнейшая инфузия не проводится.