Allogen cytokininducerad mördarimmunterapi för återfall efter allogen märgtransplantation för hematologiska maligniteter (alloCIK)

1. Patientinklusionskriterier Denna studie inkluderar endast patienter som har återfallit efter en allogen transplantation, som har antingen 1,1 Inget svar på konventionell DLI givet för minst en dos, eller 1,2 Ingen möjlighet till tillgång till ett stort antal donatorlymfocyter för upprepade doser av DLI, Detta gäller fall av obesläktad transplantation eller navelsträngsblodtransplantation

   1,3 Patienter som utvecklade signifikant GVHD till konventionell DLI, men som inte hade något annat terapeutiskt alternativ. I sådana fall är motiveringen baserad på mössstudier av felmatchad CIK som producerar mycket mindre GVHD än felmatchade omanipulerade splenocyter.

2. Insamling av stamceller från perifert blod (PBSC) Allogena givare av syskon kommer rutinmässigt att få sina PBSC skördade i syfte att infusionera till mottagarna. För närvarande innebär vår praxis en extra dag av insamling för att frysa som backup för att användas för DLI i händelse av återfall. Denna samling är fryst i några alikvoter och är tillgänglig för CIK-odling när behov uppstår

   För navelsträngsblodtransplantation är ett problem att DLI inte är tillgängligt. Det finns en rapport om att odla CIK från kvarvarande celler i påsarna med navelsträngsblod efter infusion, och sedan förvaras fryst för användning i framtiden om behov uppstår. Detta äventyrar inte på något sätt infusionen av navelsträngsblod. På liknande sätt kan detta göras vid icke-relaterad donatortransplantation. Detta kommer att fungera som en backup i händelse av att donatorn inte är tillgänglig för upprepad insamling av lymfocyter.

3. Odling av CIK-celler

För odling från fryst produkt tinas detta snabbt och odling startas i gasgenomsläppliga påsar i komplett medium och cytokin enligt beskrivning i SOP bifogad (bilaga 1). Odlingsmedium och cytokin tillsätts periodiskt tills CIK mognar efter mellan 21-28 dagar.

För odling från kvarvarande celler i de tinade navelsträngsblodspåsarna kan celler behöva genomgå ficoll för att avlägsna rbc, och sedan starta odlingen på liknande sätt

3. Skörd av CIK-celler

Vid mognad mellan D21-D28 slås alla påsar med CIK-celler samman och tvättas med COBE 2991-cellskördare. Detta kommer att säkerställa avlägsnande av >99,9% av det ursprungliga odlingsmediet. Celler fryses sedan och alikvoter skickas för kvalitetskontroll för att säkerställa överensstämmelse med GMP-standarden. Detta inkluderar bakteriologisk och svampodling, mykoplasma och endotoxintestning.

4. Infusion av CIK-celler Patienter kan genomgå cytoreduktiv kemoterapi eller oral immunsuppressiv terapi som bedöms lämpligt i varje enskilt fall av den behandlande läkaren. Vid lymphopeni tinas CIK-celler snabbt vid sängen och infunderas.

Dos och schema för CIK-celler följer följande princip 4.1 Första dosen för patienter som redan har fått DLI och visat resistens: vid dubbel eller trippel den sista DLI-dosen (uttryckt som CD3/kg).

4.2 Första dosen för patienter som inte har fått någon DLI: denna kommer att följa den konventionella praxisen för DLI där den första dosen kommer att vara 10 miljoner CD3/kg.

4.3 Efterföljande doser kommer att ges med 4-veckors intervall vilket ger tid att observera utvecklingen av GVHD och svar.

4.3.1 Om inget svar observerades kommer dosen att fördubblas eller tredubblas (beroende på storleken på den tillgängliga alikvoten). Om det finns bra svar kommer dosen att förbli densamma som den föregående infusionen.

4.3.2 I närvaro av GVHD kommer infusionen att avbrytas tills GVHD har upplösts och sedan återupptas med hälften eller en tredjedel av den tidigare dosen (beroende på storleken på den tillgängliga alikvoten).

4.4 CIK-infusionens varaktighet kommer att bero på svarsstatus. 4.4.1 Hos patienter som svarar kommer 4-veckors CIK-infusion att fortsätta tills en fullständig remission uppnås och sedan ytterligare 2-3 infusioner därefter.

4.4.2 Hos patienter som uppnår ett stabilt partiellt svar kommer CIK-infusionen att fortsätta med ett 4-veckorsintervall, förutsatt att inga biverkningar och CIK-celler finns tillgängliga. Detta kommer att fortsätta och sluta om sjukdomen bryter igenom.

4.4.3 Hos patienter där sjukdomen fortsätter att utvecklas efter 2-3 cykler av CIK-infusion kommer ingen ytterligare infusion att ges