Allogene Zytokin-induzierte Killer-Immuntherapie bei Rückfall nach allogener Knochenmarktransplantation bei hämatologischen Malignomen (alloCIK)

1. Patienteneinschlusskriterien Diese Studie schließt nur Patienten ein, die nach einer allogenen Transplantation einen Rückfall erlitten haben, die entweder 1.1 kein Ansprechen auf konventionelles DLI für mindestens eine Dosis zeigten oder 1.2 Keine Möglichkeit des Zugangs zu einer großen Anzahl von Spenderlymphozyten für wiederholte DLI-Dosen. Dies gilt für Fälle von nicht verwandten Transplantationen oder Nabelschnurbluttransplantationen

   1,3 Patienten, die eine signifikante GVHD gegenüber herkömmlichem DLI entwickelten, aber keine andere therapeutische Option hatten. In solchen Fällen basiert die Begründung auf Studien an Mäusen mit fehlgepaarten CIK, die viel weniger GVHD produzieren als fehlgepaarte, nicht manipulierte Splenozyten.

2. Entnahme peripherer Blutstammzellen ( PBSC ) Allogenen Geschwisterspendern werden routinemäßig ihre PBSC zum Zweck der Infusion in die Empfänger entnommen. Derzeit sieht unsere Praxis einen zusätzlichen Tag der Sammlung vor, der als Backup für DLI im Falle eines Rückfalls eingefroren wird. Diese Sammlung wird in wenigen Aliquots eingefroren und steht bei Bedarf für die CIK-Kultur zur Verfügung

   Bei der Nabelschnurbluttransplantation besteht ein Problem darin, dass DLI nicht verfügbar ist. Es gibt einen Bericht über die Züchtung von CIK aus Restzellen in den Beuteln mit Nabelschnurblut nach der Infusion, die dann für die zukünftige Verwendung bei Bedarf eingefroren werden. Dies beeinträchtigt in keiner Weise die Nabelschnurblutinfusion. In ähnlicher Weise kann dies im Fall einer Transplantation eines nicht verwandten Spenders erfolgen. Dies dient als Backup für den Fall, dass der Spender für eine erneute Entnahme von Lymphozyten nicht verfügbar ist.

3. Kultur von CIK-Zellen

Für die Kultur aus gefrorenem Produkt wird dieses rasch aufgetaut und die Kultur in gasdurchlässigen Beuteln in vollständigem Medium und Zytokin gestartet, wie in der beigefügten SOP (Anhang 1) beschrieben. Kulturmedium und Cytokin werden periodisch bis zur Reifung von CIK zwischen 21 und 28 Tagen zugegeben.

Für die Kultur von Restzellen in den aufgetauten Nabelschnurblut-Infusionsbeuteln müssen die Zellen möglicherweise Ficoll unterzogen werden, um rbc zu entfernen, und dann die Kultur auf ähnliche Weise beginnen

3. Ernten von CIK-Zellen

Bei Reife zwischen D21–D28 werden alle Tüten mit CIK-Zellen gepoolt und unter Verwendung eines COBE 2991-Zellernters gewaschen. Dadurch wird sichergestellt, dass >99,9 % des ursprünglichen Kulturmediums entfernt werden. Die Zellen werden dann eingefroren und Aliquots zur Qualitätskontrolle geschickt, um die Einhaltung des GMP-Standards sicherzustellen. Dazu gehören Bakterien- und Pilzkulturen, Mykoplasmen- und Endotoxintests.

4. Infusion von CIK-Zellen Die Patienten können sich einer zytoreduktiven Chemotherapie oder einer oralen immunsuppressiven Therapie unterziehen, wie es der behandelnde Arzt im Einzelfall für angebracht hält. Am Nadir der Lymphopenie werden CIK-Zellen schnell am Krankenbett aufgetaut und infundiert.

Dosis und Zeitplan für CIK-Zellen folgen dem folgenden Prinzip 4.1 Erste Dosis für Patienten, die bereits DLI erhalten haben und Resistenz zeigten: bei der doppelten oder dreifachen der letzten DLI-Dosis (ausgedrückt als CD3/kg).

4.2 Erste Dosis für Patienten, die kein DLI erhalten haben: Dies entspricht der herkömmlichen DLI-Praxis, bei der die erste Dosis 10 Millionen CD3/kg beträgt.

4.3 Nachfolgende Dosen werden in 4-wöchigen Intervallen verabreicht, um Zeit zu lassen, die Entwicklung einer GVHD und das Ansprechen zu beobachten.

4.3.1 Wenn keine Reaktion beobachtet wird, wird die Dosis verdoppelt oder verdreifacht (abhängig von der Größe des verfügbaren Aliquots). Bei gutem Ansprechen bleibt die Dosis dieselbe wie bei der vorherigen Infusion.

4.3.2 Bei Vorliegen einer GVHD wird die Infusion bis zum Abklingen der GVHD ausgesetzt und dann mit der Hälfte oder einem Drittel der vorherigen Dosis fortgesetzt (abhängig von der Größe des verfügbaren Aliquots).

4.4 Die Dauer der CIK-Infusion hängt vom Ansprechstatus ab. 4.4.1 Bei Patienten, die darauf ansprechen, wird die 4-wöchige CIK-Infusion fortgesetzt, bis eine vollständige Remission erreicht ist, und danach weitere 2-3 Infusionen.

4.4.2 Bei Patienten, die ein stabiles partielles Ansprechen erreichen, wird die CIK-Infusion in einem 4-wöchigen Intervall fortgesetzt, vorausgesetzt, dass keine Nebenwirkungen auftreten und CIK-Zellen verfügbar sind. Dies wird weitergehen und aufhören, wenn die Krankheit durchbricht.

4.4.3 Bei Patienten, bei denen die Krankheit nach 2-3 Zyklen CIK-Infusion weiter fortschreitet, wird keine weitere Infusion verabreicht