Immunoterapia killer allogenica indotta da citochine per recidiva dopo trapianto di midollo allogenico per neoplasie ematologiche (alloCIK)

1. Criteri di inclusione dei pazienti Questo studio include solo pazienti con recidiva dopo un trapianto allogenico, che hanno 1,1 nessuna risposta al DLI convenzionale somministrato per almeno una dose o 1,2 Nessuna possibilità di accesso a un gran numero di linfociti donatori per dosi ripetute di DLI, questo vale per i casi di trapianto non correlato o trapianto di sangue del cordone ombelicale

   1,3 Pazienti che hanno sviluppato una GVHD significativa rispetto al DLI convenzionale, ma non avevano altra opzione terapeutica. In tali casi la logica si basa su studi sui topi di CIK non corrispondenti che producono molto meno GVHD rispetto agli splenociti non manipolati non corrispondenti.

2. Raccolta di cellule staminali del sangue periferico ( PBSC ) Ai fratelli donatori allogenici verrà regolarmente prelevata la loro PBSC ai fini dell'infusione nei riceventi. Attualmente la nostra prassi prevede un giorno in più di prelievo da congelare come backup da utilizzare per DLI in caso di recidiva. Questa raccolta è congelata in poche aliquote ed è disponibile per la coltura CIK in caso di necessità

   Per il trapianto di sangue cordonale, un problema è che il DLI non è disponibile. C'è un rapporto sulla crescita di CIK da cellule residue nelle sacche di sangue del cordone ombelicale dopo l'infusione, quindi conservate congelate per l'uso futuro in caso di necessità. Ciò non compromette in alcun modo l'infusione del sangue cordonale. Allo stesso modo questo può essere fatto nel caso di trapianto da donatore non consanguineo. Questo servirà come backup nel caso in cui il donatore non sia disponibile per la raccolta ripetuta di linfociti.

3. Coltura di cellule CIK

Per la coltura da prodotto congelato, questo viene rapidamente scongelato e la coltura avviata in sacche permeabili ai gas in terreno completo e citochina come dettagliato nella SOP allegata (appendice 1). Il terreno di coltura e le citochine vengono aggiunti periodicamente fino alla maturazione di CIK tra 21 e 28 giorni.

Per la coltura da cellule residue nelle sacche per infusione di sangue cordonale scongelate, potrebbe essere necessario sottoporre le cellule a ficoll per rimuovere i globuli rossi, quindi avviare la coltura in modo simile

3. Raccolta di cellule CIK

Alla maturità tra D21-D28, tutti i sacchi di cellule CIK vengono raggruppati e lavati utilizzando il raccoglitore di cellule COBE 2991. Ciò garantirà la rimozione di >99,9% del terreno di coltura originale. Le cellule vengono quindi congelate e le aliquote inviate per il controllo di qualità per garantire la conformità allo standard GMP. Ciò include la coltura batteriologica e fungina, il test del micoplasma e delle endotossine.

4. Infusione di cellule CIK I pazienti possono sottoporsi a chemioterapia citoriduttiva oa terapia immunosoppressiva orale secondo quanto ritenuto opportuno di volta in volta dal medico curante. Al nadir della linfopenia, le cellule CIK vengono rapidamente scongelate al capezzale e infuse.

La dose e il programma delle cellule CIK seguono il seguente principio 4.1 Prima dose per i pazienti che hanno già ricevuto DLI e hanno mostrato resistenza: al doppio o al triplo dell'ultima dose DLI (espressa come CD3/kg).

4.2 Prima dose per i pazienti che non hanno ricevuto alcuna DLI: seguirà la pratica convenzionale della DLI in cui la prima dose sarà di 10 milioni di CD3/kg.

4.3 Le dosi successive verranno somministrate a intervalli di 4 settimane, consentendo di osservare lo sviluppo di GVHD e la risposta.

4.3.1 Se non è stata osservata alcuna risposta, la dose sarà raddoppiata o triplicata (a seconda delle dimensioni dell'aliquota disponibile). Se c'è una buona risposta, la dose rimarrà la stessa dell'infusione precedente.

4.3.2 In presenza di GVHD, l'infusione verrà sospesa fino alla risoluzione della GVHD, quindi ripresa a metà o un terzo della dose precedente (a seconda della dimensione dell'aliquota disponibile).

4.4 La durata dell'infusione di CIK dipenderà dallo stato di risposta 4.4.1 Nei pazienti che rispondono, l'infusione di CIK ogni 4 settimane continuerà fino al raggiungimento di una remissione completa e poi altre 2-3 infusioni oltre.

4.4.2 Nei pazienti che ottengono una risposta parziale stabile, l'infusione di CIK continuerà a intervalli di 4 settimane, a condizione che non vi siano effetti avversi e che siano disponibili cellule CIK. Questo continuerà e si fermerà se la malattia si diffonde.

4.4.3 Nei pazienti in cui la malattia continua a progredire dopo 2-3 cicli di infusione di CIK, non verranno somministrate ulteriori infusioni