用载有同种异体凋亡坏死黑色素瘤细胞的树突细胞接种黑色素瘤患者

背景：16 名黑色素瘤患者（1 名 IIC 期、8 名 III 期和 7 名 IV 期）在 I 期研究中接受治疗，以评估安全性和免疫反应，使用由自体树突状细胞 (DC) 组成的疫苗 (DC/Apo-Nec) ) 载有凋亡/坏死黑色素瘤细胞系 (Apo-Nec) 的混合物。

方法：PBMC 从白细胞分离术中获得，DCs 从在无血清培养基中在 GM-CSF 和 IL-4 存在下培养的单核细胞产生。 未成熟的 DC (iDC) 装载有经伽马照射的 Apo-Nec 细胞，并在没有佐剂的情况下进行id注射。 四名患者一组接受四种疫苗接种，每种疫苗接种 5、10、15 或 20 x106 DC/Apo-Nec，间隔两周。

结果：该疫苗在所有患者中均具有良好的耐受性。 疫苗毒性轻微，未达到毒性限制剂量。 我们发现，与 iDC 相比，CD83、CD80、CD86、HLA I 类和 II 类的表达增加证明了 42.3 ±13.7% 的黑色素瘤患者的 iDC 能够吞噬 Apo-Nec 细胞，从而诱导 DC 成熟。 此外，在吞噬作用后，与 iDC 相比，观察到 Dextran-FITC 内吞作用减少了 75.2 ± 16%。 在所有患者的 DC 中，CCR7 在 Apo-Nec 吞噬作用后上调，因此体外 DC/Apo-Nec 细胞能够向 MIP-3 β 迁移。 第一次接种疫苗后患者的 DTH 评分显着增加，第四次疫苗接种后略有下降（Mann-Whitney 检验，p<0.05）。 对于患者#1，检测到她自己的肿瘤照射细胞呈阳性 DTH 反应。 在接种疫苗前后，通过四聚体结合 HLA-A*0201 患者（7 / 15 名患者）研究了 gp100 和 Melan A/MART-1 Ag 特异性 CD8+ T 淋巴细胞的存在。 两名仍然是 NED 的患者在接种疫苗后其特定 T 淋巴细胞的 Ags 增加。 未检测到对 Apo-Nec 细胞的体液反应。 术后平均随访 44.5 个月，IIC 期患者为 NED，7/8 III 期患者为 NED，7/7 IV 期患者出现进展。

结论：我们得出结论，DC/Apo-Nec 疫苗具有良好的耐受性，它诱导针对黑色素瘤 Ag 的特异性免疫，并且在 III 期患者中它可以延长无病生存期，在辅助环境中提供免于复发的保护。