Melanoomapotilaiden rokottaminen dendriittisoluilla, jotka on täynnä allogeenisia apoptoottisia-nekroottisia melanoomasoluja

Tausta: Kuusitoista melanoomapotilasta (1 vaihe IIC, 8 vaihe III ja 7 vaihe IV) hoidettiin vaiheen I tutkimuksessa turvallisuuden ja immuunivasteiden arvioimiseksi rokotteella (DC/Apo-Nec), joka koostui autologisista dendriittisoluista (DC:t). ) ladattu apoptoottisten/nekroottisten melanoomasolulinjojen (Apo-Nec) seoksella.

Menetelmät: PBMC:t saatiin leukafereesista ja DC:t tuotettiin monosyyteistä, joita oli viljelty GM-CSF:n ja IL-4:n läsnä ollessa seerumittomassa alustassa. Epäkypsät DC:t (iDC:t) ladattiin gammasäteilytetyillä Apo-Nec-soluilla ja injektoitiin id ilman adjuvanttia. Neljän potilaan kohortille annettiin neljä rokotetta, joissa oli 5, 10, 15 tai 20 x 106 DC/Apo-Nec:tä per rokote, kahden viikon välein.

Tulokset: Rokote oli hyvin siedetty kaikilla potilailla. Rokotteen toksisuus oli lievää, eikä myrkyllisyyttä rajoittavaa annosta ole saavutettu. Havaitsimme, että 42,3 ±13,7 % melanoomapotilaiden iDC:t pystyivät fagosyyttämään Apo-Nec-soluja, jotka indusoivat DC:iden kypsymistä, mistä on osoituksena CD83:n, CD80:n, CD86:n, HLA luokan I ja II lisääntynyt ekspressio iDC:ihin verrattuna. Myös fagosytoosin jälkeen havaittiin dekstraani-FITC-endosytoosin 75,2 ± 16 %:n väheneminen iDC:ihin verrattuna. CCR7 lisääntyi Apo-Nec-fagosytoosin yhteydessä kaikkien potilaiden DC:issä, ja vastaavasti in vitro DC/Apo-Nec-solut pystyivät siirtymään kohti MIP-3-betaa. DTH-pistemäärä nousi merkitsevästi potilailla ensimmäisen rokotuksen jälkeen ja laski hieman neljännellä rokotteella (Mann-Whitney Test, p<0,05). Potilaalle #1 havaittiin positiivinen DTH-reaktio hänen omiin kasvaimen säteilytettyihin soluihinsa. gp100:lle ja Melan A/MART-1 Ag:ille spesifisten CD8+ T-lymfosyyttien läsnäoloa tutkittiin tetrameerien sitoutumisen avulla HLA-A*0201-potilaissa (7/15 potilasta) ennen ja jälkeen rokotuksen. Kaksi potilasta, joilla on edelleen NED, lisäsi spesifisiä T-lymfosyyttejään rokotuksen jälkeen. Humoraalisia vasteita Apo-Nec-soluille ei havaittu. Keskimääräisellä seurannalla 44,5 kuukautta leikkauksen jälkeen vaiheen IIC pt on NED, 7/8 vaiheen III pt on NED ja 7/7 vaiheen IV potilaista on edennyt.

Johtopäätökset: Päättelemme, että DC/Apo-Nec-rokote on hyvin siedetty, se indusoi spesifisen immuniteetin melanooma-Ag:tä vastaan ​​ja vaiheen III potilailla se voi pidentää taudista vapaata eloonjäämistä, mikä tarjoaa suojan uusiutumiselta adjuvanttiympäristössä.