Vacinação de pacientes com melanoma com células dendríticas carregadas com células alogênicas de melanoma apoptótico-necrótico

Introdução: Dezesseis pacientes com melanoma (1 estágio IIC, 8 estágio III e 7 estágio IV) foram tratados em um estudo de Fase I para avaliar a segurança e as respostas imunes, com uma vacina (DC/Apo-Nec) composta por células dendríticas autólogas (DCs ) carregado com uma mistura de linhas celulares de melanoma apoptótico/necrótico (Apo-Nec).

Métodos: PBMC foram obtidas por leucaférese e DCs foram geradas a partir de monócitos cultivados na presença de GM-CSF e IL-4 em meio isento de soro. DCs imaturas (iDCs) foram carregadas com células Apo-Nec irradiadas com raios gama e id injetadas sem adjuvante. Coortes de quatro pacientes receberam quatro vacinas com 5, 10, 15 ou 20 x106 DC/Apo-Nec por vacina, com duas semanas de intervalo.

Resultados: A vacina foi bem tolerada em todos os pacientes. A toxicidade da vacina foi leve e a dose limitante da toxicidade não foi atingida. Descobrimos que 42,3 ±13,7 % de iDCs de pacientes com melanoma foram capazes de fagocitar células Apo-Nec que induziram a maturação das DCs, evidenciado pelo aumento da expressão de CD83, CD80, CD86, HLA classe I e II em comparação com iDCs. Além disso, após a fagocitose, foi observada uma redução de 75,2 ± 16% na endocitose de Dextran-FITC em comparação com iDCs. O CCR7 foi regulado positivamente após a fagocitose Apo-Nec em DCs de todos os pacientes e, consequentemente, as células DC/Apo-Nec in vitro foram capazes de migrar para MIP-3 beta. A pontuação DTH aumentou significativamente nos pacientes após a primeira vacinação e diminuiu ligeiramente na quarta vacina (Teste de Mann-Whitney, p<0,05). Para o paciente #1, uma reação DTH positiva foi detectada para suas próprias células tumorais irradiadas. A presença de linfócitos T CD8+ específicos para gp100 e Melan A/MART-1 Ags foram estudados por tetrâmeros de ligação em pacientes HLA-A*0201 (7/15 pacientes) antes e após a vacinação. Dois pacientes que permanecem NED aumentaram Ags seus linfócitos T específicos após a vacinação. Não foram detectadas respostas humorais às células Apo-Nec. Com um acompanhamento médio de 44,5 meses após a cirurgia, o estágio IIC pt é NED, 7/8 pts estágio III são NED e 7/7 pacientes estágio IV progrediram.

Conclusões: Concluímos que a vacina DC/Apo-Nec é bem tolerada, induz imunidade específica contra melanoma Ags e em pacientes em estágio III pode prolongar a sobrevida livre de doença, conferindo proteção contra recaída em um cenário adjuvante.