Vaccination av melanompatienter med dendritiska celler laddade med allogena apoptotiska-nekrotiska melanomceller

Bakgrund: Sexton melanompatienter (1 stadium IIC, 8 stadium III och 7 stadium IV) behandlades i en fas I-studie för att utvärdera säkerhet och immunsvar, med ett vaccin (DC/Apo-Nec) bestående av autologa dendritiska celler (DCs) ) laddad med en blandning av apoptotiska/nekrotiska melanomcellinjer (Apo-Nec).

Metoder: PBMC erhölls från leukaferes och DC genererades från monocyter odlade i närvaro av GM-CSF och IL-4 i serumfritt medium. Omogna DCs (iDCs) laddades med gamma-bestrålade Apo-Nec-celler och injicerades id utan adjuvans. Kohorter av fyra patienter fick fyra vacciner med 5, 10, 15 eller 20 x106 DC/Apo-Nec per vaccin, med två veckors mellanrum.

Resultat: Vaccinet tolererades väl av alla patienter. Vaccinets toxicitet var mild och den toxicitetsbegränsande dosen har inte uppnåtts. Vi fann att 42,3 ±13,7 % melanompatienters iDCs kunde fagocytera Apo-Nec-celler som inducerade DCs mognad, vilket framgår av ökat uttryck av CD83, CD80, CD86, HLA klass I och II jämfört med iDCs. Efter fagocytos observerades också en 75,2 ±16 % minskning av Dextran-FITC-endocytos jämfört med iDC. CCR7 uppreglerades efter Apo-Nec-fagocytos i DC från alla patienter och följaktligen kunde DC/Apo-Nec-celler in vitro migrera mot MIP-3 beta. DTH-poängen ökade signifikant hos patienterna efter den första vaccinationen och minskade något vid det fjärde vaccinet (Mann-Whitney Test, p<0,05). För patient #1 upptäcktes en positiv DTH-reaktion på hennes egna tumörbestrålade celler. Närvaron av CD8+ T-lymfocyter specifika för gp100 och Melan A/MART-1 Ags studerades med tetramerer som binder i HLA-A*0201-patienter (7/15 patienter) före och efter vaccination. Två patienter som förblir NED ökade Ags sina specifika T-lymfocyter efter vaccination. Inga humorala svar på Apo-Nec-celler detekterades. Med en genomsnittlig uppföljning på 44,5 månader efter operationen är stadium IIC pt NED, 7/8 stadium III pt är NED och 7/7 stadium IV patienter har utvecklats.

Slutsatser: Vi drar slutsatsen att DC/Apo-Nec-vaccin tolereras väl, det inducerar specifik immunitet mot melanom Ags och hos patienter i stadium III kan det förlänga sjukdomsfri överlevnad, vilket ger skydd mot återfall i en adjuvant miljö.