Vacunación de pacientes con melanoma con células dendríticas cargadas con células de melanoma apoptóticas-necróticas alogénicas

Antecedentes: Dieciséis pacientes con melanoma (1 estadio IIC, 8 estadio III y 7 estadio IV) fueron tratados en un estudio de fase I para evaluar la seguridad y las respuestas inmunitarias con una vacuna (DC/Apo-Nec) compuesta por células dendríticas autólogas (DC). ) cargado con una mezcla de líneas celulares de melanoma apoptótico/necrótico (Apo-Nec).

Métodos: se obtuvieron PBMC a partir de leucaféresis y se generaron CD a partir de monocitos cultivados en presencia de GM-CSF e IL-4 en medio sin suero. Las DC inmaduras (iDC) se cargaron con células Apo-Nec irradiadas con rayos gamma y se inyectaron id sin adyuvante. Cohortes de cuatro pacientes recibieron cuatro vacunas con 5, 10, 15 o 20 x106 DC/Apo-Nec por vacuna, con dos semanas de diferencia.

Resultados: La vacuna fue bien tolerada en todos los pacientes. La toxicidad de la vacuna fue leve y no se ha alcanzado la dosis límite de toxicidad. Encontramos que el 42,3 ± 13,7 % de las iDC de pacientes con melanoma pudieron fagocitar células Apo-Nec que indujeron la maduración de las DC, como lo demuestra el aumento de la expresión de CD83, CD80, CD86, HLA clase I y II en comparación con las iDC. Además, después de la fagocitosis, se observó una reducción del 75,2 ± 16 % en la endocitosis de Dextrano-FITC en comparación con las iDC. CCR7 se reguló al alza con la fagocitosis de Apo-Nec en DC de todos los pacientes y, en consecuencia, las células DC/Apo-Nec in vitro pudieron migrar hacia MIP-3 beta. La puntuación de DTH aumentó significativamente en los pacientes después de la primera vacunación y disminuyó ligeramente con la cuarta vacuna (Prueba de Mann-Whitney, p<0,05). Para el paciente #1 se detectó una reacción DTH positiva a sus propias células tumorales irradiadas. La presencia de linfocitos T CD8+ específicos de gp100 y Melan A/MART-1 Ags se estudió mediante la unión de tetrámeros en pacientes HLA-A*0201 (7/15 pacientes) antes y después de la vacunación. Dos pacientes que permanecen NED aumentaron Ags sus linfocitos T específicos después de la vacunación. No se detectaron respuestas humorales a las células Apo-Nec. Con un seguimiento medio de 44,5 meses después de la cirugía, el pt en estadio IIC es NED, 7/8 pts en estadio III son NED y 7/7 pacientes en estadio IV han progresado.

Conclusiones: Concluimos que la vacuna DC/Apo-Nec es bien tolerada, induce inmunidad específica contra los Ags del melanoma y en pacientes en estadio III puede prolongar la supervivencia libre de enfermedad, brindando protección contra la recaída en un entorno adyuvante.