Impfung von Melanompatienten mit dendritischen Zellen, die mit allogenen apoptotisch-nekrotischen Melanomzellen beladen sind

Hintergrund: Sechzehn Melanompatienten (1 Stadium IIC, 8 Stadium III und 7 Stadium IV) wurden in einer Phase-I-Studie zur Bewertung der Sicherheit und Immunantworten mit einem Impfstoff (DC/Apo-Nec) behandelt, der aus autologen dendritischen Zellen (DCs) bestand ), beladen mit einer Mischung aus apoptotischen/nekrotischen Melanomzelllinien (Apo-Nec).

Methoden: PBMC wurden durch Leukapherese gewonnen und DCs wurden aus Monozyten erzeugt, die in Gegenwart von GM-CSF und IL-4 in serumfreiem Medium kultiviert wurden. Unreife DCs (iDCs) wurden mit gammabestrahlten Apo-Nec-Zellen beladen und ohne Adjuvans injiziert. Kohorten von vier Patienten erhielten im Abstand von zwei Wochen vier Impfungen mit 5, 10, 15 oder 20 x106 DC/Apo-Nec pro Impfung.

Ergebnisse: Der Impfstoff wurde von allen Patienten gut vertragen. Die Toxizität des Impfstoffs war gering und die toxizitätslimitierende Dosis wurde nicht erreicht. Wir fanden heraus, dass 42,3 ± 13,7 % der iDCs von Melanompatienten in der Lage waren, Apo-Nec-Zellen zu phagozytieren, was die Reifung der DCs induzierte, was durch eine erhöhte Expression von CD83, CD80, CD86, HLA-Klasse I und II im Vergleich zu iDCs belegt wurde. Außerdem wurde nach der Phagozytose im Vergleich zu iDCs eine Verringerung der Dextran-FITC-Endozytose um 75,2 ± 16 % beobachtet. CCR7 wurde bei Apo-Nec-Phagozytose in DCs aller Patienten hochreguliert und dementsprechend konnten DC/Apo-Nec-Zellen in vitro in Richtung MIP-3 beta migrieren. Der DTH-Score stieg bei den Patienten nach der ersten Impfung deutlich an und sank bei der vierten Impfung leicht (Mann-Whitney-Test, p<0,05). Bei Patientin Nr. 1 wurde eine positive DTH-Reaktion auf ihre eigenen tumorbestrahlten Zellen festgestellt. Das Vorhandensein von CD8+-T-Lymphozyten, die für gp100 und Melan A/MART-1-Ags spezifisch sind, wurde anhand der Bindung von Tetrameren bei HLA-A*0201-Patienten (7/15 Patienten) vor und nach der Impfung untersucht. Bei zwei Patienten, die weiterhin NED hatten, erhöhten sich nach der Impfung die Ags ihrer spezifischen T-Lymphozyten. Es wurden keine humoralen Reaktionen auf Apo-Nec-Zellen festgestellt. Bei einer durchschnittlichen Nachbeobachtungszeit von 44,5 Monaten nach der Operation liegt bei Patienten im Stadium IIC NED vor, bei 7/8 Patienten im Stadium III liegt NED vor und bei 7/7 Patienten im Stadium IV ist die Erkrankung fortgeschritten.

Schlussfolgerungen: Wir kommen zu dem Schluss, dass der DC/Apo-Nec-Impfstoff gut verträglich ist, eine spezifische Immunität gegen Melanom-Ags induziert und bei Patienten im Stadium III das krankheitsfreie Überleben verlängern und in einer adjuvanten Behandlung Schutz vor einem Rückfall bieten kann.