Vaccination de patients atteints de mélanome avec des cellules dendritiques chargées de cellules de mélanome apoptotiques-nécrotiques allogéniques

Contexte : Seize patients atteints de mélanome (1 stade IIC, 8 stade III et 7 stade IV) ont été traités dans une étude de phase I pour évaluer l'innocuité et les réponses immunitaires, avec un vaccin (DC/Apo-Nec) composé de cellules dendritiques autologues (CD ) chargé avec un mélange de lignées cellulaires de mélanome apoptotiques/nécrotiques (Apo-Nec).

Méthodes : Les PBMC ont été obtenues par leucaphérèse et les DC ont été générées à partir de monocytes cultivés en présence de GM-CSF et d'IL-4 dans un milieu sans sérum. Les DC immatures (iDC) ont été chargées avec des cellules Apo-Nec irradiées aux rayons gamma et injectées sans adjuvant. Des cohortes de quatre patients ont reçu quatre vaccins avec 5, 10, 15 ou 20 x106 DC/Apo-Nec par vaccin, à deux semaines d'intervalle.

Résultats : Le vaccin a été bien toléré chez tous les patients. La toxicité du vaccin était légère et la dose limitant la toxicité n'a pas été atteinte. Nous avons constaté que 42,3 ± 13,7 % des iDC de patients atteints de mélanome étaient capables de phagocyter les cellules Apo-Nec qui induisaient la maturation des DC, comme en témoigne l'expression accrue de CD83, CD80, CD86, HLA de classe I et II par rapport aux iDC. De plus, après phagocytose, une réduction de 75,2 ± 16 % de l'endocytose Dextran-FITC a été observée par rapport aux iDC. CCR7 a été régulé positivement lors de la phagocytose Apo-Nec dans les CD de tous les patients et, par conséquent, les cellules DC/Apo-Nec in vitro ont pu migrer vers MIP-3 bêta. Le score DTH a augmenté significativement chez les patients après la première vaccination et légèrement diminué au quatrième vaccin (Mann-Whitney Test, p<0,05). Pour la patiente n° 1, une réaction DTH positive a été détectée sur ses propres cellules tumorales irradiées. La présence de lymphocytes T CD8+ spécifiques de gp100 et Melan A/MART-1 Ags a été étudiée par la liaison des tétramères chez des patients HLA-A*0201 (7/15 patients) avant et après vaccination. Deux patients qui restent NED ont augmenté Ags leurs lymphocytes T spécifiques après la vaccination. Aucune réponse humorale aux cellules Apo-Nec n'a été détectée. Avec un suivi moyen de 44,5 mois post-opératoire, le pt stade IIC est NED, 7/8 pts stade III sont NED et 7/7 patients stade IV ont progressé.

Conclusions : Nous concluons que le vaccin DC/Apo-Nec est bien toléré, qu'il induit une immunité spécifique contre les Ag du mélanome et, chez les patients de stade III, qu'il peut prolonger la survie sans maladie, offrant une protection contre les rechutes dans un contexte adjuvant.