Vaksinasjon av melanompasienter med dendrittiske celler lastet med allogene apoptotisk-nekrotiske melanomceller

Bakgrunn: Seksten melanompasienter (1 stadium IIC, 8 stadium III og 7 stadium IV) ble behandlet i en fase I-studie for å evaluere sikkerhet og immunrespons, med en vaksine (DC/Apo-Nec) sammensatt av autologe dendritiske celler (DCs) ) lastet med en blanding av apoptotiske/nekrotiske melanomcellelinjer (Apo-Nec).

Metoder: PBMC ble oppnådd fra leukaferese og DC-er ble generert fra monocytter dyrket i nærvær av GM-CSF og IL-4 i serumfritt medium. Umodne DC-er (iDC-er) ble lastet med gamma-bestrålte Apo-Nec-celler og injisert id uten adjuvans. Kohorter på fire pasienter ble gitt fire vaksiner med 5, 10, 15 eller 20 x106 DC/Apo-Nec per vaksine, med to ukers mellomrom.

Resultater: Vaksinen ble godt tolerert hos alle pasienter. Toksisiteten til vaksine var mild, og den toksisitetsbegrensende dosen er ikke nådd. Vi fant at 42,3 ± 13,7 % melanompasienters iDCs var i stand til å fagocytere Apo-Nec-celler som induserte DCs-modning, som bevist ved økt ekspresjon av CD83, CD80, CD86, HLA klasse I og II sammenlignet med iDCs. Etter fagocytose ble det også observert en 75,2 ±16 % reduksjon i Dextran-FITC endocytose sammenlignet med iDCs. CCR7 ble oppregulert etter Apo-Nec fagocytose i DC fra alle pasienter og følgelig var in vitro DC/Apo-Nec celler i stand til å migrere mot MIP-3 beta. DTH-skåren økte signifikant hos pasientene etter første vaksinasjon og reduserte noe ved den fjerde vaksinen (Mann-Whitney Test, p<0,05). For pasient nr. 1 ble det påvist en positiv DTH-reaksjon på hennes egne tumorbestrålte celler. Tilstedeværelsen av CD8+ T-lymfocytter spesifikke for gp100 og Melan A/MART-1 Ags ble studert ved å binde tetramerer i HLA-A*0201-pasienter (7/15 pasienter) før og etter vaksinasjon. To pasienter som forblir NED økte Ags sine spesifikke T-lymfocytter etter vaksinasjon. Ingen humorale responser på Apo-Nec-celler ble påvist. Med en gjennomsnittlig oppfølging på 44,5 måneder etter operasjonen er stadium IIC pt NED, 7/8 stadium III pts er NED og 7/7 stadium IV pasienter har progrediert.

Konklusjoner: Vi konkluderer med at DC/Apo-Nec-vaksine tolereres godt, den induserer spesifikk immunitet mot melanom Ags og hos stadium III-pasienter kan den forlenge sykdomsfri overlevelse, og gi beskyttelse mot tilbakefall i en adjuvant setting.