慢性肢体缺血的细胞疗法

严重的肢体缺血是一种常见的情况，其发病率估计为每年百万分之 500 至 1,000 例。 保肢是治疗的主要目标，通常通过外科手术或经皮血管形成术来尝试。 然而，大约 25% 的患者不适合此类手术，据估计，这些患者中只有不到一半在 6 个月后没有进行任何大截肢而存活下来。 在这种情况下，细胞疗法已被提议用于刺激血管生成。 TATEISHI-YUYAMA 等人报告了人类的第一个重要经验，他们表明骨髓单核细胞 (BM-MNC) 的自体植入是安全的，并且增加了缺血肢体的血流量，从而导致临床改善。 同一作者未观察到外周血单核细胞 (PB-MNC) 的任何功效。 随后，其他出版物报道了 PB-MNC 的积极作用，这些 PB-MNC 在先前用造血生长因子处理以诱导干细胞动员后收获。 然而，这种治疗可能对患有晚期动脉疾病的患者产生有害影响。 在这种情况下，我们提出了一项前瞻性双中心试验，以评估在严重肢体缺血患者中自体植入 BM-MNC 或 PB-MNC 的安全性和有效性，而无需事先动员造血因子。

该试验分两步设计：第一系列的 8 名患者接受 BM-MNC 治疗，随后的 8 名患者将接受 PB-MNC。 计划在这前 16 个案例之后进行中期分析。 基于该分析，将决定再包括 12 名患者，每种类型的细胞。一旦患者符合适当的标准并且未被选择接受一种或另一种类型的细胞，就会连续包括在内。

在植入之前，确定 MNC 计数、差异和生存力。 CD34+、CD34+/CD133+ 和 CD34+/CD133+/flk-1+ 细胞通过流式细胞术计数。

在细胞植入后 1、2、7 和 14 天，1、3 和 6 个月监测临床症状和 TcPO2。 在第 0、1、3 和 7 天测定血细胞计数、C 反应蛋白、白细胞介素 6、肿瘤坏死因子-α、肌红蛋白和肌酐激酶；在植入前和植入后 72 小时测量血管内皮生长因子 (VEGF) 水平和 CD34+、CD34+/CD133+ 血细胞