Terapia cellulare nell'ischemia cronica degli arti

L'ischemia critica degli arti è una situazione frequente la cui incidenza può essere valutata tra 500 e 1.000 per milione all'anno. Il salvataggio dell'arto è l'obiettivo principale della terapia e di solito viene tentato mediante procedure chirurgiche o di vascolarizzazione percutanea. Tuttavia, circa il 25% dei pazienti non è idoneo a tali procedure ed è stato stimato che meno della metà di questi pazienti fosse viva senza alcuna amputazione importante dopo 6 mesi. In questo contesto è stata proposta la terapia cellulare per stimolare l'angiogenesi. La prima esperienza significativa nell'uomo è stata riportata da TATEISHI-YUYAMA et al, che hanno dimostrato che l'impianto autologo di cellule mononucleate del midollo osseo (BM-MNC) era sicuro e aumentava il flusso sanguigno negli arti ischemici con conseguente miglioramento clinico. Gli stessi autori non hanno osservato alcuna efficacia delle cellule mononucleate del sangue periferico (PB-MNC). Successivamente altre pubblicazioni hanno riportato effetti positivi di PB-MNC che sono stati raccolti dopo un precedente trattamento con fattore di crescita ematopoietico per indurre una mobilizzazione delle cellule staminali. Tuttavia un tale trattamento potrebbe avere effetti deleteri nei pazienti che presentano malattia arteriosa avanzata. In questo contesto proponiamo uno studio prospettico bicentrico per valutare la sicurezza e l'efficacia dell'impianto autologo di BM-MNC o PB-MNC senza precedente mobilizzazione con fattore ematopoietico, in pazienti con ischemia critica degli arti.

Lo studio è progettato in due fasi: una prima serie di otto pazienti viene trattata con BM-MNC e gli otto successivi riceveranno PB-MNC. Dopo questi primi sedici casi è prevista un'analisi ad interim. Sulla base di questa analisi, si deciderà di includere altri 12 pazienti con ciascun tipo di cellule. I pazienti vengono inclusi consecutivamente non appena presentano criteri appropriati e non vengono selezionati per ricevere uno o un altro tipo di cellule.

Prima dell'impianto, vengono determinati i conteggi MNC, il differenziale e la vitalità. Le cellule CD34+, CD34+/CD133+ e CD34+/CD133+/flk-1+ vengono contate mediante citometria a flusso.

I sintomi clinici e la TcPO2 vengono monitorati 1, 2, 7 e 14 giorni, 1, 3 e 6 mesi dopo l'impianto cellulare. La conta delle cellule del sangue, la proteina C-reattiva, l'interleuchina-6, il fattore di necrosi tumorale-α, la mioglobina e la creatinina-chinasi sono determinate al giorno 0, 1, 3 e 7; il livello del fattore di crescita vascolare-endoteliale (VEGF) nel sangue e le cellule del sangue CD34+, CD34+/CD133+ vengono misurate prima e 72 ore dopo l'impianto