Клеточная терапия при хронической ишемии конечностей

Критическая ишемия конечностей — частая ситуация, заболеваемость которой можно оценить от 500 до 1000 на миллион в год. Спасение конечности является основной целью терапии и обычно предпринимается с помощью хирургических процедур или процедур чрескожной васкуляризации. Однако примерно 25% пациентов не подходят для таких процедур, и было подсчитано, что менее половины этих пациентов были живы без каких-либо серьезных ампутаций через 6 месяцев. В этих условиях клеточная терапия была предложена для стимуляции ангиогенеза. О первом значительном опыте на людях сообщил TATEISHI-YUYAMA et al., который показал, что аутологичная имплантация мононуклеарных клеток костного мозга (BM-MNC) безопасна и увеличивает кровоток в ишемизированных конечностях, что приводит к клиническому улучшению. Те же авторы не наблюдали никакой эффективности мононуклеарных клеток периферической крови (PB-MNC). Впоследствии в других публикациях сообщалось о положительных эффектах PB-MNC, которые были собраны после предшествующей обработки гемопоэтическим фактором роста, чтобы вызвать мобилизацию стволовых клеток. Однако такое лечение может иметь пагубные последствия для пациентов с прогрессирующим заболеванием артерий. В этом контексте мы предлагаем проспективное бицентровое исследование для оценки безопасности и эффективности аутологичной имплантации BM-MNC или PB-MNC без предварительной мобилизации гемопоэтическим фактором у пациентов с критической ишемией конечностей.

Испытание проводится в два этапа: первая серия из восьми пациентов получает BM-MNC, а следующие восемь получают PB-MNC. Промежуточный анализ планируется после этих первых шестнадцати случаев. На основании этого анализа будет принято решение о включении еще 12 пациентов с каждым типом клеток. Пациенты включаются последовательно, как только они предъявляют соответствующие критерии и не выбираются для получения того или иного типа клеток.

Перед имплантацией определяют количество МНК, дифференциал и жизнеспособность. Клетки CD34+, CD34+/CD133+ и CD34+/CD133+/flk-1+ подсчитывают с помощью проточной цитометрии.

Клинические симптомы и TcPO2 контролируют через 1, 2, 7 и 14 дней, 1, 3 и 6 месяцев после имплантации клеток. Количество клеток крови, С-реактивный белок, интерлейкин-6, фактор некроза опухоли-α, миоглобин и креатининкиназу определяют в день 0, 1, 3 и 7; уровень фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и клеток крови CD34+, CD34+/CD133+ измеряют до и через 72 часа после имплантации