Buněčná terapie u chronické ischemie končetiny

Kritická končetinová ischemie je častá situace, jejíž výskyt lze hodnotit na 500 až 1 000 na milion za rok. Záchrana končetiny je hlavním cílem terapie a obvykle se o ni pokouší chirurgický nebo perkutánní vaskularizační výkon. Přibližně 25 % pacientů však není pro takové výkony vhodných a odhaduje se, že méně než polovina těchto pacientů byla po 6 měsících naživu bez větší amputace. V tomto prostředí byla navržena buněčná terapie pro stimulaci angiogeneze. První významnou zkušenost u lidí uvedli TATEISHI-YUYAMA et al., kteří prokázali, že autologní implantace mononukleárních buněk kostní dřeně (BM-MNC) byla bezpečná a zvýšila průtok krve v ischemických končetinách, což vedlo ke klinickému zlepšení. Stejní autoři nepozorovali žádnou účinnost mononukleárních buněk periferní krve (PB-MNC). Následně další publikace uváděly pozitivní účinky PB-MNC, které byly sklizeny po předchozím ošetření hematopoetickým růstovým faktorem k indukci mobilizace kmenových buněk. Taková léčba by však mohla mít škodlivé účinky u pacientů s pokročilým arteriálním onemocněním. V této souvislosti navrhujeme prospektivní bicentrickou studii k hodnocení bezpečnosti a účinnosti autologní implantace buď BM-MNC nebo PB-MNC bez předchozí mobilizace hematopoetickým faktorem u pacientů s kritickou ischemií končetiny.

Studie je navržena ve dvou krocích: první série osmi pacientů je léčena BM-MNC a následujících osm dostane PB-MNC. Po těchto prvních šestnácti případech se plánuje průběžná analýza. Na základě této analýzy bude rozhodnuto zahrnout dalších 12 pacientů s každým typem buněk. Pacienti jsou postupně zařazeni, jakmile splňují příslušná kritéria a nejsou vybráni pro příjem jednoho nebo druhého typu buněk.

Před implantací se stanoví počet MNC, diferenciál a životaschopnost. Buňky CD34+, CD34+/CD133+ a CD34+/CD133+/flk-1+ se spočítají průtokovou cytometrií.

Klinické příznaky a TcPO2 jsou monitorovány 1, 2, 7 a 14 dní, 1, 3 a 6 měsíců po implantaci buněk. Počet krevních buněk, C-reaktivní protein, interleukin-6, tumor nekrotizující faktor-a, myoglobin a kreatinin-kináza jsou stanoveny v den 0, 1, 3 a 7; hladina krevního vaskulárního endoteliálního růstového faktoru (VEGF) a krevních buněk CD34+, CD34+/CD133+ se měří před a 72 hodin po implantaci