Thérapie cellulaire dans l'ischémie chronique des membres

L'ischémie critique des membres est une situation fréquente dont l'incidence peut être évaluée à 500 à 1 000 par million par an. Le sauvetage de membre est l'objectif principal du traitement et est généralement tenté par des procédures de vascularisation chirurgicales ou percutanées. Cependant, environ 25 % des patients ne sont pas adaptés à de telles procédures et il a été estimé que moins de la moitié de ces patients étaient en vie sans aucune amputation majeure après 6 mois. Dans ce contexte, une thérapie cellulaire a été proposée pour stimuler l'angiogenèse. La première expérience significative chez l'homme a été rapportée par TATEISHI-YUYAMA et al qui ont montré que l'implantation autologue de cellules mononucléaires de la moelle osseuse (BM-MNC) était sûre et augmentait le flux sanguin dans les membres ischémiques entraînant une amélioration clinique. Les mêmes auteurs n'ont observé aucune efficacité des cellules mononucléaires du sang périphérique (PB-MNC). Par la suite, d'autres publications ont rapporté des effets positifs des PB-MNC qui ont été récoltées après un traitement préalable avec un facteur de croissance hématopoïétique pour induire une mobilisation des cellules souches. Cependant un tel traitement pourrait avoir des effets délétères chez les patients présentant une maladie artérielle avancée. Dans ce contexte, nous proposons un essai prospectif bicentrique pour évaluer la sécurité et l'efficacité de l'implantation autologue de BM-MNC ou PB-MNC sans mobilisation préalable avec facteur hématopoïétique, chez des patients présentant une ischémie critique des membres.

L'essai est conçu en deux étapes : une première série de huit patients est traitée par BM-MNC et les huit suivantes recevront du PB-MNC. Une analyse intermédiaire est prévue après ces seize premiers cas. Sur la base de cette analyse, il sera décidé d'inclure 12 patients supplémentaires avec chaque type de cellules. Les patients sont inclus consécutivement dès qu'ils présentent des critères appropriés et ne sont pas sélectionnés pour recevoir l'un ou l'autre type de cellules.

Avant l'implantation, le nombre de MNC, le différentiel et la viabilité sont déterminés. Les cellules CD34+, CD34+/CD133+ et CD34+/CD133+/flk-1+ sont comptées par cytométrie en flux.

Les symptômes cliniques et la TcPO2 sont surveillés 1, 2, 7 et 14 jours, 1, 3 et 6 mois après l'implantation cellulaire. La numération globulaire, la protéine C-réactive, l'interleukine-6, le facteur de nécrose tumorale α, la myoglobine et la créatinine-kinase sont déterminées aux jours 0, 1, 3 et 7 ; le taux de facteur de croissance vasculaire endothélial (VEGF) sanguin et les cellules sanguines CD34+, CD34+/CD133+ sont mesurés avant et 72 heures après l'implantation