Terapia komórkowa w przewlekłym niedokrwieniu kończyn

Krytyczne niedokrwienie kończyn jest częstą sytuacją, której częstość występowania można oszacować na 500 do 1000 przypadków na milion rocznie. Ratowanie kończyny jest głównym celem terapii i jest zwykle podejmowane przez chirurgiczne lub przezskórne zabiegi unaczynienia. Jednak około 25% pacjentów nie nadaje się do takich zabiegów i oszacowano, że mniej niż połowa z tych pacjentów przeżyła bez żadnej większej amputacji po 6 miesiącach. W tej sytuacji zaproponowano terapię komórkową w celu stymulacji angiogenezy. Pierwsze znaczące doświadczenie u ludzi zostało opisane przez TATEISHI-YUYAMA i wsp., którzy wykazali, że autologiczne wszczepienie jednojądrzastych komórek szpiku kostnego (BM-MNC) było bezpieczne i zwiększyło przepływ krwi w niedokrwionych kończynach, co skutkowało poprawą kliniczną. Ci sami autorzy nie zaobserwowali żadnej skuteczności jednojądrzastych komórek krwi obwodowej (PB-MNC). Następnie inne publikacje donosiły o pozytywnych efektach PB-MNC, które zebrano po uprzednim potraktowaniu hematopoetycznym czynnikiem wzrostu w celu wywołania mobilizacji komórek macierzystych. Jednak takie leczenie może mieć szkodliwe skutki u pacjentów z zaawansowaną chorobą tętnic. W tym kontekście proponujemy prospektywne badanie dwuośrodkowe w celu oceny bezpieczeństwa i skuteczności autologicznej implantacji BM-MNC lub PB-MNC bez uprzedniej mobilizacji czynnikiem hematopoetycznym u pacjentów z krytycznym niedokrwieniem kończyny.

Badanie zaplanowano w dwóch etapach: pierwsza seria ośmiu pacjentów jest leczona BM-MNC, a kolejnych ośmiu otrzymuje PB-MNC. Analiza tymczasowa jest planowana po tych pierwszych szesnastu przypadkach. Na podstawie tej analizy zostanie podjęta decyzja o włączeniu 12 kolejnych pacjentów do każdego typu komórek. Pacjenci są kolejno włączani, gdy tylko spełnią odpowiednie kryteria i nie zostaną wybrani do otrzymania jednego lub drugiego typu komórek.

Przed implantacją określa się liczbę MNC, zróżnicowanie i żywotność. Komórki CD34+, CD34+/CD133+ i CD34+/CD133+/flk-1+ zlicza się za pomocą cytometrii przepływowej.

Objawy kliniczne i TcPO2 są monitorowane 1, 2, 7 i 14 dni, 1, 3 i 6 miesięcy po wszczepieniu komórek. Liczbę krwinek, białko C-reaktywne, interleukinę-6, czynnik martwicy nowotworu-α, mioglobinę i kinazę kreatyniny określa się w dniach 0, 1, 3 i 7; poziom czynnika wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF) we krwi i komórek krwi CD34+, CD34+/CD133+ mierzono przed i 72 godziny po implantacji