新诊断多形性胶质母细胞瘤患者的疫苗疗法 (ATTAC)

目标：

基本的

• 评估在有或没有自体淋巴细胞转移 (ALT) 的治疗性替莫唑胺诱导的淋巴细胞减少患者恢复期间接种巨细胞病毒 (CMV) pp65-溶酶体相关膜蛋白 (LAMP) mRNA 负载的树突状细胞 (DC) 的可行性和安全性患有新诊断的多形性胶质母细胞瘤并且 CMV 血清阳性或血清阴性的患者。

中学

• 评估这些患者对 CMV pp65-LAMP mRNA 负载的树突状细胞 (CMV-DC) 疫苗的体液和细胞免疫反应，并比较 ALT 和 CMV 血清阳性对这些参数的影响。
• 与最近的历史队列相比，确定接种有或没有 ALT 的疫苗是否延长了这些患者的总进展时间或总生存期。
• 评估铟 In^111 标记的 DC 在不同皮肤准备条件下追踪腹股沟淋巴结的不同能力。
• 评估 111 In 标记的 DC 追踪到颈部淋巴结荷瘤侧和非荷瘤侧淋巴结的不同能力。
• 表征复发性肿瘤中的免疫细胞浸润并寻找复发性或进展性肿瘤中抗原逃逸的证据。

患者在手术切除后不超过 4 周接受白细胞去除术以获得用于人巨细胞病毒 (CMV)-自体淋巴细胞转移 (ALT) 和 CMV-树突细胞 (DC) 生成的外周血淋巴细胞 (PBL)。

从切除术后 2-6 周开始，患者每天接受一次外照射放疗 (RT)，每周 5 天，持续长达 7 周。 从 RT 的第 1 天开始，患者接受口服替莫唑胺 (TMZ)，每天一次，最多 49 天。 在 RT 期间患有进行性疾病、依赖高于生理水平的类固醇、对 TMZ 不耐受或未能满足 DC 或 PBL 的细胞释放标准的患者从研究中移除。

在同步 RT 和 TMZ 完成后 2-4 周内开始，患者在第 1-5 天每天一次恢复口服 TMZ。 在没有疾病进展或不可接受的毒性的情况下，治疗每 4-6 周重复一次，最多 6 个疗程*。 从第 1 疗程的第 19-23 天开始，患者还接受皮内免疫接种。 患者按 CMV 血清学状态（阳性与阴性）分层，并随机分配到 2 个疫苗治疗组中的 1 个。

注意：*患者可能会根据患者及其治疗神经肿瘤学家的判断接受额外的 TMZ 治疗。

• 第 I 组（DC 疫苗接种加 ALT）：患者在 45-90 分钟内接受 CMV-ALT IV（仅第 1 疗程）和 2 x 10^7 CMV pp65-LAMP 载 mRNA DC (CMV-DC) 疫苗皮内注射并等量接种每个腹股沟区域的部分。 在没有不可接受的毒性的情况下，疫苗接种每 1-3 周重复一次，最多 3 剂。
• II 组（仅 DC 疫苗接种）：患者像 I 组一样接受 CMV-DC 疫苗。 在第三次疫苗接种后大约 2-6 周，所有患者都进行第二次白细胞分离术以获得外周血单核细胞用于免疫监测和额外的 DCs 用于继续接种疫苗。 如果患者对治疗产生阳性免疫反应，或者由于无进展生存期延长而需要产生额外的 DC，则患者可能会接受额外的白细胞去除术。 白细胞去除术可能每月进行一次，但可能在整个研究过程中每 4 个月进行一次，以产生足够的 DC 以继续每月接种疫苗。
• 其他队列 (GM-CSF)：患者像在第 II 组中一样接受 CMV-DC 疫苗，除了他们还将在每种疫苗中接受 GM-CSF。 除非发生肿瘤进展，否则疫苗将持续总共 10 次。 该队列中的患者可以在完成辅助 TMZ 之前的任何时间入组，前提是他们符合所有其他资格标准。

在第四次疫苗接种之前，根据腹股沟注射侧（左 vs 右）和疫苗接种皮肤部位准备（未脉冲 DC vs 破伤风类毒素）对两组患者和在第一次预定疫苗接种之前确定疾病进展的患者进行分层。 然后将患者随机分配到 2 个治疗组中的 1 个。

• 第 I 组（未脉冲 DC）：在接种疫苗前 6 至 24 小时内，患者在一个腹股沟区域的疫苗接种部位使用 1 x 10^6 未脉冲 DC 进行皮肤部位准备。 然后患者接受铟 In^111 标记的 CMV-DC。
• 第二组（破伤风类毒素）：在接种疫苗前 6 至 24 小时内，患者在对面的腹股沟区域用破伤风类毒素进行疫苗接种皮肤部位准备。 然后，患者像第 I 组一样接受铟 In^111 标记的 CMV-DC。

在进展时，作为对照，患者在双侧下颌底部和腹股沟区域接受包含 111 In 标记的 CMV-DC 的最终皮内疫苗接种。 然后在接种疫苗后 24 小时和 48 小时拍摄伽马相机图像，以比较腹股沟中的 DC 迁移到颈部注射部位的每一侧，并观察从颈部注射部位到深部和浅表颈部淋巴结的迁移。

完成 TMZ 治疗后，患者在没有疾病进展的情况下继续接受 DC 疫苗接种（GM-CSF 队列除外——总共 10 次疫苗接种）。

患者定期进行血液样本采集以进行免疫学研究。 通过细胞因子荧光细胞术检查样品的功能性 CD4 和 CD8 免疫反应；通过四聚体分析对 pp65 抗原特异性 CD8+ T 细胞进行计数；抗原诱导的 T 细胞增殖；通过ELISA测定血清中细胞因子分泌和定量抗pp65抗体浓度；通过逆转录酶-聚合酶链反应对基因组 DNA 进行 CMV pp65 定量。 患者还可以接受立体定向活检或肿瘤切除术，以在组织学上确认肿瘤进展，并通过免疫组织化学和聚合酶链反应评估肿瘤部位的免疫细胞浸润和 pp65 抗原逃逸。

在初始白细胞分离术、第一次疫苗接种、第三次疫苗接种后的白细胞分离术后，以及此后的每一次偶数疫苗接种时，通过自我报告的癌症治疗功能评估-脑问卷调查来评估生活质量。 神经心理学评估也在第一次疫苗接种之前进行，然后在之后的每第二次疫苗接种中进行，以监测神经认知或情感变化的任何变化。

完成研究治疗后，定期对患者进行随访。