Вакцинотерапия при лечении пациентов с впервые диагностированной мультиформной глиобластомой (ATTAC)

ЦЕЛИ:

Начальный

• Оценить осуществимость и безопасность вакцинации дендритными клетками (ДК), нагруженными мРНК цитомегаловируса (ЦМВ) pp65-лизосомально-ассоциированным мембранным белком (LAMP) во время выздоровления от терапевтической темозоломид-индуцированной лимфопении с переносом аутологичных лимфоцитов (АЛТ) или без него у пациентов. с недавно диагностированной мультиформной глиобластомой и серопозитивными или серонегативными в отношении ЦМВ.

Среднее

• Оценить гуморальный и клеточный иммунный ответ у этих пациентов на вакцину CMV pp65-LAMP, нагруженную мРНК дендритных клеток (CMV-DC), и сравнить влияние серопозитивности ALT и CMV на эти параметры.
• Определить, увеличивает ли вакцинация с АЛТ или без нее общее время до прогрессирования или общую выживаемость этих пациентов по сравнению с недавней исторической когортой.
• Оценить дифференциальную способность ДК, меченных индием In ^ 111, отслеживать паховые лимфатические узлы при различных условиях подготовки кожи.
• Оценить дифференциальную способность ^111In-меченых ДК отслеживать лимфатические узлы на опухоленосной и неопухолевой стороне шейных лимфатических узлов.
• Охарактеризовать иммунологический клеточный инфильтрат в рецидивирующих опухолях и найти доказательства ускользания антигена в рецидивирующих или прогрессирующих опухолях.

Пациентам проводят лейкаферез не более чем через 4 недели после хирургической резекции для получения лимфоцитов периферической крови (ЛПК) для переноса цитомегаловируса человека (ЦМВ)-аутологичных лимфоцитов (АЛТ) и генерации ЦМВ-дендритных клеток (ДК).

Начиная со 2-6 недель после резекции, пациентам проводят дистанционную лучевую терапию (ЛТ) один раз в день, 5 дней в неделю, до 7 недель. Начиная с 1-го дня ЛТ пациенты получают пероральный темозоломид (ТМЗ) один раз в день в течение 49 дней. Пациенты с прогрессирующим заболеванием во время лучевой терапии, зависимостью от стероидов выше физиологических уровней, непереносимостью TMZ или несоответствием критериям высвобождения клеток для DC или PBL исключаются из исследования.

Через 2-4 недели после завершения одновременной ЛТ и ТМЗ пациенты возобновляют пероральный прием ТМЗ один раз в день в дни 1-5. Лечение повторяют каждые 4-6 недель до 6 курсов* при отсутствии прогрессирования заболевания или неприемлемой токсичности. Начиная с 19-23 дня 1-го курса больные также получают внутрикожную иммунизацию. Пациентов стратифицируют по серологическому статусу ЦМВ (положительный или отрицательный) и рандомизируют в 1 из 2 групп вакцинации.

Примечание: *Пациенты могут получать дополнительное лечение ТМЗ по усмотрению пациента и лечащего его нейроонколога.

• Группа I (вакцинация DC плюс АЛТ): пациенты получают CMV-ALT IV в течение 45-90 минут (только курс 1) и 2 x 10 ^ 7 CMV pp65-LAMP мРНК-нагруженная вакцина DC (CMV-DC) внутрикожно и вводятся в равных количествах. порциями в каждую паховую область. Вакцинацию повторяют каждые 1-3 недели до 3 доз при отсутствии неприемлемой токсичности.
• Группа II (только ДК-вакцинация): пациенты получают вакцину ЦМВ-ДК, как и в группе I. Примерно через 2-6 недель после третьей вакцинации всем пациентам проводят второй лейкаферез для получения мононуклеаров периферической крови для иммунологического мониторинга и дополнительных ДК для продолжения вакцинации. Пациентам может быть проведен дополнительный лейкаферез, если они достигают положительного иммунологического ответа на терапию или если им требуется создание дополнительных ДК в связи с длительной выживаемостью без прогрессирования. Лейкаферез можно проводить ежемесячно, но, скорее всего, его будут проводить каждые 4 месяца на протяжении всего исследования, чтобы получить достаточно ДК для продолжения ежемесячных вакцинаций.
• Дополнительная когорта (ГМ-КСФ): Пациенты получают вакцину ЦМВ-ДК, как и в группе II, за исключением того, что они также будут получать ГМ-КСФ в каждой вакцине. Вакцины продолжают в общей сложности 10, если не происходит прогрессирования опухоли. Пациенты в этой когорте могут быть включены в исследование в любой момент до завершения адъювантной терапии ТМЗ при условии, что они соответствуют всем другим критериям приемлемости.

Перед четвертой вакцинацией пациентов в обеих группах и пациентов с прогрессированием заболевания, выявленным до первой запланированной вакцинации, стратифицируют в соответствии со стороной паховой инъекции (левая или правая) и подготовкой кожи в месте вакцинации (неимпульсные ДК или столбнячный анатоксин). Затем пациентов рандомизируют в 1 из 2 групп лечения.

• Группа I (неимпульсные ДК): в течение 6–24 часов до вакцинации пациентам проводят подготовку участка кожи с помощью 1 x 10^6 неимпульсных ДК в месте вакцинации в одной паховой области. Затем пациенты получают CMV-DC, меченный индием In^111.
• Группа II (столбнячный анатоксин): за 6–24 часа до вакцинации пациентам проводят подготовку места вакцинации в противоположной паховой области столбнячным анатоксином. Затем пациенты получают CMV-DC, меченный индием In^111, как и в группе I.

Во время прогрессирования заболевания пациенты получают заключительную внутрикожную вакцинацию, включающую ^111In-меченые ЦМВ-ДК в основании челюсти с двух сторон и в паховую область в качестве контроля. Затем через 24 и 48 часов после вакцинации делают снимки с помощью гамма-камеры для сравнения миграции ДК в паху с каждой стороны от мест инъекций на шее и для наблюдения за миграцией от мест инъекций на шее к глубоким и поверхностным шейным лимфатическим узлам.

После завершения терапии ТМЗ пациенты продолжают получать ДК-вакцинации при отсутствии прогрессирования заболевания (за исключением когорты ГМ-КСФ - всего 10 вакцинаций).

У пациентов периодически берут образцы крови для иммунологических исследований. Образцы исследуют на функциональный иммунный ответ пациентов с CD4 и CD8 с помощью цитокиновой флуоресцентной цитометрии; подсчет антиген-специфических CD8+ Т-клеток pp65 с помощью анализа тетрамеров; индуцированная антигеном пролиферация Т-клеток; секреция цитокинов и количественная концентрация анти-рр65 антител в сыворотке по данным ELISA; и количественное определение CMV pp65 в геномной ДНК с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой. Пациенты также могут пройти стереотаксическую биопсию или резекцию опухоли, чтобы гистологически подтвердить прогрессирование опухоли и оценить иммунологическую клеточную инфильтрацию и высвобождение антигена pp65 в месте опухоли с помощью иммуногистохимии и полимеразной цепной реакции.

Качество жизни оценивают с помощью опросника «Функциональная оценка терапии рака-мозга», который заполняется самостоятельно, при первоначальном лейкаферезе, при первой вакцинации, после третьей вакцинации во время поствакцинального лейкафереза, а затем при каждой четной вакцинации после этого. Нейропсихологическая оценка также проводится перед первой вакциной, а затем после каждой второй вакцинации, чтобы отслеживать любые изменения в нейрокогнитивных или аффективных изменениях.

После завершения исследуемой терапии пациенты периодически наблюдаются.