非酒精性脂肪肝患者的牛初乳

1. 假设和研究目的

   1.1.假设

   摄入胰岛素免疫奶牛的牛初乳粉 (BCP) 将改善患有这些疾病的患者的非酒精性脂肪性肝炎和代谢综合征

   1.2.主要目标

   1.2.1 确定 BCP 在改善 NASH 患者肝酶水平方面的功效。

   1.2.2 确定口服 BCP 对 NASH 患者的安全性。

   1.3.次要目标

   1.3.1. 确定 BCP 的给药是否会改善 NASH 患者的代谢综合征（即胰岛素抵抗）。

2. 介绍

   2.1.背景

   2.1.1. 非酒精性脂肪性肝炎。

   非酒精性脂肪性肝炎或 NASH 是一种常见的、通常是“沉默”的肝病，影响了大约 2%-5% 的美国人4-6。 NASH 与代谢综合征、2 型糖尿病和肥胖密切相关，可导致肝硬化、HCC、肝移植或死亡。 证明 NASH 诊断并将其与单纯性脂肪肝区分开来的唯一方法是肝活检（一种具有一定风险的侵入性手术）。 目前，还没有针对 NASH7 的有效治疗方法。

   2.1.2. 超免疫牛初乳对 NASH 的影响

   调节性 T 细胞 (Treg) 被认为是适应性免疫系统的重要免疫调节成分。 免疫失调可能导致慢性炎症，引发慢性胰岛素不敏感性和非酒精性脂肪性肝炎 (NASH)。 以前没有研究过 Tregs 在脂肪组织中对 NASH 的调节作用。 目的：评估 Tregs 刺激对 NASH 肝损伤和胰岛素抵抗的影响。 方法：用富含抗胰岛素特异性抗体（AIS-CDS，Immuron，澳大利亚）或纯化的抗胰岛素特异性 CDS（PAIS-CDS）的初乳衍生溶液（CDS）喂养瘦素缺陷型 Ob/Ob 小鼠 4 周。 通过对中央脂肪组织及其间质脉管系统 (SV) 进行的流式细胞术确定对脂肪组织的免疫作用，并与对肝脏和脾脏免疫系统的影响进行比较。 肝损伤和胰岛素抵抗是通过葡萄糖耐量试验 (GTT) 和肝酶来确定的。 结果：口服抗胰岛素抗体促进 SV CD4+CD25+FoxP3+ 细胞（13.05 对 27.94 p=0.01）。 治疗与脂肪组织中 CD4+IL17+ 淋巴细胞亚群（87.89 对 12.93，p<0.01）、SV（61.86 对 14.99， p<0.01）和肝脏（40.18 对 2.66，p<0.01）。 肝脏 CD8+CD25+FoxP3+ 淋巴细胞亚群显着增加（0.36 对 2.39，p<0.05）。 脂肪组织中的 CD4/CD8+ 淋巴细胞比率显示出与脾脏和肝脏的镜像效应，表明对淋巴细胞捕获有相反的作用。 脂肪组织中的促进 Tregs 伴随着胰岛素抵抗的显着改善，表现为葡萄糖和胰岛素血清水平降低，以及葡萄糖耐量测试结果改善（减少 45%，在曲线下面积 23355 与 42448 中，治疗组分别与对照组相比），以及肝酶降低（ALT 水平从 743.4 下降到 379.8 IU，p<0.05；AST 从 770.5 下降到 299IU，在对照组和分别治疗组中，p=0.07）身体没有变化重量。 结论：脂肪组织的免疫系统在代谢综合征的调控中起重要作用。 通过口服抗胰岛素 CDS 减少肝脏、脂肪组织和 SV 中的 TH17，同时促进 CD4+CD25+FoxP3+ 和 CD8+CD25+FoxP3+ Treg（分别在 SC 和肝脏中）为 NASH 提供了一种新的治疗方式和胰岛素抵抗，使脂肪组织中的 Tregs 成为减轻 NASH 肝损伤的新治疗靶点。

   2.1.3. BCP 已被证明对人类安全且耐受性良好

   超过 80,000 包具有相同活性成分的 Anadis 片剂 BCP 产品已在澳大利亚销售超过 4 年。 没有向 Anadis 报告不良事件报告。 BioGard 本身作为一种更高剂量的独立产品于 2008 年获得批准。

   微生物污染的风险：产品中的初乳经过巴氏杀菌；严格的程序最大限度地降低了污染风险，并且对批次的片剂进行了酵母、霉菌、大肠菌、肠杆菌科、葡萄球菌、沙门氏菌和李斯特菌的检测。 用于生产初乳的奶牛仅来自无牛海绵状脑病 (BSE) 的国家。 此外，奶制品被认为没有可检测的传染性，如果在与为人类消费而收集的牛奶相同的条件下从健康动物中获取，则被认为不太可能带来任何风险。

   乳糖不耐症：牛初乳提取物一般含有<10%的乳糖，而普通脱脂奶粉中的乳糖含量约为50%；因此，乳糖不耐受不太可能成为主要的安全问题。 预计易感人群摄入 5-10 克乳糖后会出现临床症状（Thorn 等人，1977 年）。 在每天 10 克牛初乳提取物的剂量下（比本研究中建议的剂量多 2.8 克），乳糖最多为 1 克。

   副作用。 在 BCP 研究中从未报告过死亡病例。 虽然典型的剂量是 10 克/天 [8-10]，但已经研究了每天四次高达 10 克的剂量 [11]。 不良反应数量少且严重程度轻微。 在大多数关于牛初乳功效的临床研究中，没有明显的不良反应[9, 10, 12-15]。 当它们发生时，它们主要包括恶心、呕吐、胃肠胀气和轻度腹泻[8、11、14、16、17]。 在一项研究中，在接受针对大肠杆菌 (5/10) 和轮状病毒 (2/10) 制备的牛免疫球蛋白浓缩物的志愿者中观察到血清肝转氨酶水平短暂中度升高。 这种影响归因于医院提供的高蛋白质饮食 (13)。 最近，HIV 感染者对牛初乳治疗 HIV 相关性腹泻的耐受性良好 (18)。

   对牛奶过敏的人应避免使用初乳。

3. 学习规划

   这是一项单臂、开放标签、前后的探索性试验，旨在评估 4 周 BCP 给药对 NASH 患者血清肝酶和代谢综合征的影响。 候选人将从哈达萨希伯来大学医学中心内科和肝脏科接受治疗的患者中选出，并在任何研究活动开始前被要求签署经批准的知情同意书。 参与者将在研究中接受每周访问以及结束治疗后额外 4 周的访问以评估安全性。

4. 受试者的选择和注册

4.1.纳入标准

4.1.1. 活检证明 NASH（NAS 评分≥4） 4.1.2. 血清 ALT 水平 ≥ 30 (U/L) 4.1.3。 18-65 岁 4.1.4。 通过最多 2 种口服药物治疗糖尿病，剂量稳定 2 个月。

4.1.5. 如果参与可能导致怀孕的性活动，研究志愿者必须同意在接受方案规定的药物治疗期间和停止药物治疗后 1 个月内同时使用两种可靠的避孕方法。

注：仅基于激素的方法是不够的。 除非存在更年期、绝育或无精子症的文件，否则必须正确使用以下至少两种方法：

• 含有或不含杀精剂的避孕套（男用或女用）。 - 推荐使用避孕套，因为正确使用避孕套是预防 HIV 传播的唯一有效避孕方法
• 带有杀精剂的隔膜或宫颈帽
• 宫内节育器
• 基于激素的避孕

不具有生育潜力的研究对象（未初潮的女孩或绝经后至少连续 24 个月或接受过子宫切除术和/或双侧卵巢切除术的女性符合条件，无需使用避孕药具。 以下情况之一需要临床医生或临床医生工作人员传达的书面或口头文件：

• 医生报告/信件
• 患者记录中的手术报告或其他来源文件（无精子症的实验室报告需要记录成功的输精管切除术）
• 出院小结
• 无精症化验报告
• FSH 测量值升高到报告实验室确定的更年期范围。

4.1.6. 受试者或法定监护人/代表提供知情同意的能力和意愿。

1. 排除标准

一世。怀孕或哺乳

二.在进入研究后 30 天内连续使用以下药物超过 3 天：

1. 免疫抑制剂
2. 免疫调节剂
3. 全身性糖皮质激素
4. 抗肿瘤药
5. 胰岛素三。 现场调查员认为会干扰对研究要求的依从性的药物或酒精使用或依赖。

四.入境前30天内患有需要全身治疗和/或住院治疗的严重疾病。

v. 过去 3 个月内的操作。 六. 严重的传染病、心脏病、肺病或肾病 vii。 对牛奶过敏或乳糖不耐受。

2. 研究治疗

一种。方案、给药和持续时间

一世。符合方案治疗方案

受试者将接受 1.8 克 BCP（3 粒胶囊）治疗 4 周，然后在停止研究治疗后再接受监测 4 周。

二.研究治疗修改

不允许减少剂量。 将记录和记录所有研究药物的修改。

b.研究产品配方和制备

研究药物以片剂的形式提供，单独包装在泡罩包装中。 每片 1.2 g 片剂含有 600 mg 来自对胰岛素免疫的奶牛的冻干 BCP 作为唯一的活性成分，以及包括无水胶体硅胶、硬脂酸镁、微晶纤维素和碳酸钙在内的赋形剂。 产品可常温保存，保质期5年。

C。药房：产品供应、分销和责任

一世。研究产品采购/分销

BCP 将由 Immuron 提供，并由哈大萨希伯来大学医学中心的研究药房储存和分发。

二.研究产品问责制

现场药剂师需要保存所有研究产品的完整记录。

d.合并用药

一世。一般准则

除了纳入/排除标准中规定的以外，没有对伴随药物施加具体的协议限制。 尽管如此，无论何时开始使用伴随药物或研究药物或改变剂量，研究人员都将审查伴随药物和研究药物的最新包装说明书、研究者手册或来自在线资源的更新信息，以获取有关的最新信息药物相互作用、禁忌症和注意事项。

二.违禁药物

在进入研究后 30 天内使用以下药物超过 3 天：胰岛素、免疫抑制剂、免疫调节剂、抗肿瘤药、糖皮质激素。

e.依从性评估

每次访问时，将询问参与者自上次访问以来错过的研究药物剂量数。