Colostrum bovin pour les patients atteints de stéatose hépatique non alcoolique

1. HYPOTHÈSES ET OBJECTIFS DE L'ÉTUDE

   1.1. HYPOTHÈSE

   L'ingestion de poudre de colostrum bovin (BCP) provenant de vaches immunisées à l'insuline améliorera la stéatohépatite non alcoolique et le syndrome métabolique chez les patients souffrant de ces affections

   1.2. OBJECTIFS PRINCIPAUX

   1.2.1 Déterminer l'efficacité du BCP pour améliorer les taux d'enzymes hépatiques chez les patients atteints de NASH.

   1.2.2 Déterminer l'innocuité de l'administration de BCP par voie orale aux patients atteints de NASH.

   1.3. OBJECTIFS SECONDAIRES

   1.3.1. Déterminer si l'administration de BCP améliorera le syndrome métabolique chez les patients atteints de NASH (à savoir la résistance à l'insuline).

2. INTRODUCTION

   2.1. CONTEXTE

   2.1.1. Stéatohépatite non alcoolique.

   La stéatohépatite non alcoolique ou NASH est une maladie hépatique courante, souvent « silencieuse », qui touche environ 2 à 5 % des Américains4-6. La NASH est fortement associée au syndrome métabolique, au diabète de type 2 et à l'obésité et peut entraîner une cirrhose, un CHC, une transplantation hépatique ou la mort. Le seul moyen de prouver un diagnostic de NASH et de le distinguer de la simple stéatose hépatique est la biopsie hépatique (acte invasif qui comporte un certain degré de risque). Actuellement, il n'existe aucun traitement efficace pour NASH7.

   2.1.2. L'effet du colostrum bovin hyperimmun sur la NASH

   Les cellules T régulatrices (Tregs) sont reconnues comme un composant immunomodulateur important du système immunitaire adaptatif. Un dérèglement immunitaire peut entraîner une inflammation chronique, déclenchant une insensibilité chronique à l'insuline et une stéatohépatite non alcoolique (NASH). Le rôle des Tregs dans le tissu adipeux dans la régulation de la NASH n'a pas été étudié auparavant. Objectif : Évaluer les effets de la stimulation des Tregs sur les lésions hépatiques et la résistance à l'insuline dans la NASH. Méthodes : Des souris Ob/Ob déficientes en leptine ont été nourries pendant 4 semaines avec des solutions dérivées de colostrum (CDS) enrichies d'anticorps anti-insuline spécifiques (AIS-CDS, Immuron, Australie) ou de CDS anti-insuline spécifique purifié (PAIS-CDS). L'effet immunologique sur le tissu adipeux a été déterminé par cytométrie en flux effectuée sur le tissu adipeux central et son système vasculaire stromal (SV), et comparé à l'effet sur le système immunitaire du foie et de la rate. Les lésions hépatiques et la résistance à l'insuline ont été déterminées par des tests de tolérance au glucose (GTT) et des enzymes hépatiques. Résultats : L'administration orale d'anticorps anti-insuline a favorisé les cellules SV CD4+CD25+FoxP3+ (13,05 vs 27,94 p=0,01). Le traitement a été associé à une diminution du sous-ensemble de lymphocytes CD4+IL17+ dans le tissu adipeux (87,89 vs 12,93, p<0,01), de la SV (61,86 vs 14,99, p<0,01), et dans le foie (40,18 vs 2,66, p<0,01). Le sous-ensemble de lymphocytes CD8+CD25+FoxP3+ du foie était significativement augmenté (0,36 contre 2,39, p<0,05). Le rapport lymphocytes CD4/CD8+ dans le tissu adipeux a montré un effet miroir à celui de la rate et du foie suggérant un effet opposé sur le piégeage des lymphocytes. La promotion des Tregs dans le tissu adipeux s'est accompagnée d'une nette amélioration de la résistance à l'insuline se manifestant par une diminution des taux sériques de glucose et d'insuline, et une amélioration des résultats des tests de tolérance au glucose (diminution de 45 %, dans l'aire sous la courbe 23355 vs 42448, chez les patients traités vs témoins, respectivement), ainsi qu'une diminution des enzymes hépatiques (les niveaux d'ALT ont diminué de 743,4 à 379,8 UI, p <0,05 ; et d'AST de 770,5 à 299 UI, chez les témoins vs traités respectivement, p = 0,07) sans changement dans le corps masse. Conclusions : Le système immunitaire du tissu adipeux joue un rôle important dans la régulation du syndrome métabolique. La diminution du TH17 dans le foie, le tissu adipeux et la SV, ainsi que la promotion des Tregs CD4+CD25+FoxP3+ et CD8+CD25+FoxP3+ (dans le SC et le foie respectivement), par l'administration orale d'anti-insuline CDS offre une nouvelle modalité de traitement pour la NASH et la résistance à l'insuline, faisant des Tregs dans le tissu adipeux une nouvelle cible thérapeutique pour le soulagement des dommages au foie dans la NASH.

   2.1.3. Le BCP s'est avéré sûr et bien toléré chez l'homme

   Plus de 80 000 paquets de produit BCP sous forme de comprimés Anadis avec le même composant actif ont été vendus en Australie sur 4 ans. Aucun événement indésirable n'a été signalé à Anadis. BioGard lui-même en tant que produit séparé à dose plus élevée a été approuvé en 2008.

   Risque de contamination microbiologique : Le colostrum contenu dans le produit est pasteurisé ; des procédures strictes minimisent le risque de contamination et les lots de comprimés sont testés pour les levures, les moisissures, les bactéries coliformes, les entérobactéries, les staphylocoques, la salmonelle et la listeria. Les vaches destinées à la production de colostrum proviennent uniquement de pays exempts d'encéphalopathie spongiforme bovine (ESB). De plus, les produits laitiers sont considérés comme n'ayant aucune infectiosité détectable et sont considérés comme peu susceptibles de présenter un risque s'ils proviennent d'animaux sains dans les mêmes conditions que le lait collecté pour la consommation humaine.

   Intolérance au lactose : l'extrait de colostrum bovin contient généralement <10 % de lactose, contre environ 50 % dans le lait en poudre écrémé normal ; par conséquent, il est peu probable que l'intolérance au lactose soit un problème de sécurité majeur. Des signes cliniques peuvent être attendus chez les humains sensibles recevant 5 à 10 g de lactose (Thorn et al, 1977). A une dose d'extrait de colostrum bovin de 10g par jour (2,8g de plus que la dose proposée dans cette étude), un maximum de 1g serait du lactose.

   Effets secondaires. Aucun cas de décès n'a jamais été signalé dans les études sur le BCP. Alors que la dose typique est de 10 g/jour [8-10], des doses aussi élevées que 10 g quatre fois par jour ont été étudiées [11]. Les effets indésirables ont été peu nombreux et de faible gravité. Dans la plupart des études cliniques sur l'efficacité du colostrum bovin, il n'y a pas eu d'effets indésirables démontrables [9, 10, 12-15]. Lorsqu'ils se sont produits, ils ont principalement consisté en nausées, vomissements, flatulences et diarrhée légère [8, 11, 14, 16, 17]. Dans une étude, des élévations modérées transitoires des taux sériques de transaminases hépatiques ont été observées chez des volontaires ayant reçu des concentrés d'immunoglobuline bovine préparés contre E. coli (5/10) et le rotavirus (2/10). Cet effet a été attribué aux régimes riches en protéines fournis à l'hôpital (13). Plus récemment, le colostrum bovin a été bien toléré chez les personnes infectées par le VIH pour le traitement de la diarrhée associée au VIH (18).

   L'administration de colostrum doit être évitée chez les personnes allergiques au lait de vache.

3. ÉTUDIER LE DESIGN

   Il s'agit d'un essai exploratoire avant-après à un seul bras, ouvert, pour évaluer l'effet de 4 semaines d'administration de BCP sur les enzymes hépatiques sériques et le syndrome métabolique chez les patients atteints de NASH. Les candidats seront identifiés parmi les patients traités dans le département de médecine et l'unité du foie du Centre médical de l'Université hébraïque Hadassah et il leur sera demandé de signer un consentement éclairé approuvé avant le début de toute activité d'étude. Les participants seront suivis pendant l'étude avec des visites hebdomadaires ainsi que pendant 4 semaines supplémentaires après la fin du traitement pour évaluer la sécurité.

4. SÉLECTION ET INSCRIPTION DES SUJETS

4.1. CRITÈRE D'INTÉGRATION

4.1.1. NASH prouvée par biopsie (score NAS ≥ 4) 4.1.2. Niveaux sériques d'ALT ≥ 30 (U/L) 4.1.3. 18-65 ans 4.1.4. Traitement du diabète par jusqu'à 2 médicaments oraux, à doses stables pendant 2 mois.

4.1.5. En cas de participation à une activité sexuelle pouvant entraîner une grossesse, le volontaire de l'étude doit accepter que deux méthodes de contraception fiables soient utilisées simultanément tout en recevant le médicament spécifié dans le protocole et pendant 1 mois après l'arrêt du médicament.

REMARQUE : Les méthodes basées sur les hormones seules ne sont pas suffisantes. Au moins deux des méthodes suivantes DOIVENT être utilisées de manière appropriée à moins que des documents attestant de la ménopause, de la stérilisation ou de l'azoospermie ne soient présents :

• Préservatifs (masculins ou féminins) avec ou sans agent spermicide. - Les préservatifs sont recommandés car leur utilisation appropriée est la seule méthode de contraception efficace pour prévenir la transmission du VIH
• Diaphragme ou cape cervicale avec spermicide
• DIU
• Contraception hormonale

Les sujets de l'étude qui ne sont pas en mesure de procréer (les filles qui n'ont pas atteint leurs règles ou les femmes qui ont été ménopausées pendant au moins 24 mois consécutifs ou qui ont subi une hystérectomie et/ou une ovariectomie bilatérale sont éligibles sans nécessiter l'utilisation de contraceptifs. La documentation écrite ou orale communiquée par le clinicien ou le personnel du clinicien est requise par l'un des éléments suivants :

• Rapport/lettre du médecin
• Rapport opératoire ou autre documentation source dans le dossier du patient (un rapport de laboratoire sur l'azoospermie est requis pour documenter une vasectomie réussie)
• Résumé de décharge
• Rapport de laboratoire sur l'azoospermie
• Mesure de la FSH élevée dans la plage de la ménopause établie par le laboratoire déclarant.

4.1.6. Capacité et volonté du sujet ou du tuteur/représentant légal de fournir un consentement éclairé.

1. CRITÈRE D'EXCLUSION

je. Grossesse ou allaitement

ii. Utilisation continue des médicaments suivants pendant plus de 3 jours dans les 30 jours suivant l'entrée à l'étude :

1. Immunosuppresseurs
2. Modulateurs immunitaires
3. Glucocorticoïdes systémiques
4. Agents anti-néoplasiques
5. Insuline iii. Consommation active de drogues ou d'alcool ou dépendance qui, de l'avis de l'investigateur du site, interférerait avec le respect des exigences de l'étude.

iv. Maladie grave nécessitant un traitement systémique et/ou une hospitalisation dans les 30 jours précédant l'entrée.

v. Exploitation au cours des 3 derniers mois. vi. Une maladie infectieuse, cardiaque, pulmonaire ou néphrologique grave vii. Allergique au lait de vache ou intolérant au lactose.

2. TRAITEMENT DE L'ÉTUDE

un. RÉGIME, ADMINISTRATION ET DURÉE

je. Régime de traitement selon le protocole

Les sujets recevront un traitement avec BCP 1,8 gramme (3 gélules) pendant 4 semaines et seront ensuite surveillés hors traitement à l'étude pendant 4 semaines supplémentaires.

ii. Modifications du traitement de l'étude

Les réductions de dose ne seront pas autorisées. Toutes les modifications du médicament à l'étude seront documentées et enregistrées.

b. ÉTUDE FORMULATION ET PRÉPARATION DU PRODUIT

Le médicament à l'étude est fourni sous forme de comprimés emballés individuellement dans des plaquettes thermoformées. Chaque comprimé de 1,2 g contient 600 mg de BCP lyophilisé provenant de vaches immunisées à l'insuline comme seul composant actif, en association avec des excipients comprenant de la silice colloïdale anhydre, du stéarate de magnésium, de la cellulose microcristalline et du carbonate de calcium. Le produit peut être conservé à température ambiante et a une durée de conservation de 5 ans.

c. PHARMACIE : APPROVISIONNEMENT, DISTRIBUTION ET RESPONSABILITÉ DES PRODUITS

je. Étudier l'acquisition/la distribution de produits

Le BCP sera fourni par Immuron, et sera stocké et distribué par les pharmacies de recherche du Hadassah Hebrew University Medical Center.

ii. Étudier la responsabilité des produits

Le pharmacien du site est tenu de conserver des dossiers complets de tous les produits de l'étude.

ré. MÉDICAMENTS CONCOMITANTS

je. Conditions générales d'Utilisation

Il n'y a pas de restrictions spécifiques imposées par le protocole sur les médicaments concomitants, autres que celles stipulées dans les critères d'inclusion/exclusion. Néanmoins, chaque fois qu'un médicament concomitant ou un agent de l'étude est initié ou qu'une dose est modifiée, les investigateurs examineront les notices d'emballage les plus récentes des médicaments concomitants et des agents de l'étude, les brochures de l'investigateur ou les informations mises à jour provenant de sources en ligne pour obtenir les informations les plus récentes sur interactions médicamenteuses, contre-indications et précautions.

ii. Médicaments interdits

Utilisation des médicaments suivants pendant plus de 3 jours dans les 30 jours suivant l'entrée à l'étude : insuline, immunosuppresseurs, immunomodulateurs, agents antinéoplasiques, glucocorticoïdes.

e. ÉVALUATION DE L'ADHÉRENCE

À chaque visite, les participants seront interrogés sur le nombre de doses de médicament à l'étude manquées depuis la dernière visite.