Colostro bovino per pazienti con steatosi epatica non alcolica

1. IPOTESI E OBIETTIVI DI STUDIO

   1.1. IPOTESI

   L'ingestione di polvere di colostro bovino (BCP) da mucche immunizzate all'insulina migliorerà la steatoepatite non alcolica e la sindrome metabolica nei pazienti che soffrono di queste condizioni

   1.2. OBIETTIVI PRIMARI

   1.2.1 Determinare l'efficacia del BCP nel migliorare i livelli degli enzimi epatici nei pazienti con NASH.

   1.2.2 Determinare la sicurezza della somministrazione di BCP orale a pazienti con NASH.

   1.3. OBIETTIVI SECONDARI

   1.3.1. Per determinare se la somministrazione di BCP migliorerà la sindrome metabolica nei pazienti con NASH (vale a dire insulino-resistenza).

2. INTRODUZIONE

   2.1. SFONDO

   2.1.1. Steatoepatite non alcolica.

   La steatoepatite non alcolica o NASH è una malattia epatica comune, spesso "silenziosa", che colpisce circa il 2%-5% degli americani4-6. La NASH è fortemente associata alla sindrome metabolica, al diabete di tipo 2 e all'obesità e può portare a cirrosi, HCC, trapianto di fegato o morte. L'unico mezzo per provare una diagnosi di NASH e separarla dal semplice fegato grasso è la biopsia epatica (una procedura invasiva che comporta un certo grado di rischio). Attualmente non esiste un trattamento efficace per la NASH7.

   2.1.2. L'effetto del colostro bovino iperimmune sulla NASH

   Le cellule T regolatorie (Tregs) sono riconosciute come un importante componente immunomodulatore del sistema immunitario adattativo. La disregolazione immunitaria può portare a infiammazione cronica, innescando insensibilità cronica all'insulina e steatoepatite non alcolica (NASH). Il ruolo delle Treg nel tessuto adiposo nella regolazione della NASH non era stato precedentemente studiato. Obiettivo: valutare gli effetti della stimolazione delle Tregs sul danno epatico e sulla resistenza all'insulina nella NASH. Metodi: topi Ob/Ob carenti di leptina sono stati alimentati per 4 settimane con soluzioni derivate dal colostro (CDS) arricchite con anticorpi specifici anti-insulina (AIS-CDS, Immuron, Australia) o con CDS specifici anti-insulina purificati (PAIS-CDS). L'effetto immunologico sul tessuto adiposo è stato determinato mediante citometria a flusso eseguita sul tessuto adiposo centrale e la sua vascolarizzazione stromale (SV), e confrontato con l'effetto sul sistema immunitario del fegato e della milza. Il danno epatico e l'insulino-resistenza sono stati determinati mediante test di tolleranza al glucosio (GTT) ed enzimi epatici. Risultati: la somministrazione orale di anticorpi anti-insulina ha promosso le cellule SV CD4+CD25+FoxP3+ (13,05 vs. 27,94 p=0,01). Il trattamento è stato associato a una diminuzione del sottogruppo di linfociti CD4+IL17+ nel tessuto adiposo (87,89 vs. 12,93, p<0,01), SV (61,86 vs. 14,99, p<0,01) e nel fegato (40,18 vs. 2,66, p<0,01). Il sottogruppo di linfociti CD8+CD25+FoxP3+ del fegato era significativamente aumentato (0,36 vs. 2,39, p<0,05). Il rapporto dei linfociti CD4/CD8+ nel tessuto adiposo ha mostrato un effetto speculare a quello della milza e del fegato, suggerendo un effetto opposto sull'intrappolamento dei linfociti. La promozione delle Treg nel tessuto adiposo è stata accompagnata da un marcato miglioramento della resistenza all'insulina manifestato da una diminuzione dei livelli sierici di glucosio e insulina e da un miglioramento dei risultati dei test di tolleranza al glucosio (una diminuzione del 45%, nell'area sotto la curva 23355 vs. 42448, nei pazienti trattati rispetto ai controlli, rispettivamente), insieme a diminuzione degli enzimi epatici (livelli di ALT diminuiti da 743,4 a 379,8 UI, p<0,05; e AST da 770,5 a 299 UI, rispettivamente nei controlli rispetto ai trattati, p=0,07) senza un cambiamento nel corpo peso. Conclusioni: Il sistema immunitario del tessuto adiposo svolge un ruolo importante nella regolazione della sindrome metabolica. La riduzione del TH17 nel fegato, nel tessuto adiposo e nel SV, insieme alla promozione delle Treg CD4+CD25+FoxP3+ e CD8+CD25+FoxP3+ (rispettivamente nel SC e nel fegato), mediante somministrazione orale di anti-insulina CDS offre una nuova modalità di trattamento per la NASH e insulino-resistenza, rendendo le Treg nel tessuto adiposo un nuovo bersaglio terapeutico per alleviare il danno epatico nella NASH.

   2.1.3. Il BCP ha dimostrato di essere sicuro e ben tollerato negli esseri umani

   Oltre 80.000 confezioni di prodotto Anadis BCP in compresse con lo stesso componente attivo sono state vendute in Australia in 4 anni. Non sono stati segnalati eventi avversi ad Anadis. Lo stesso BioGard come prodotto separato a dosaggio più elevato è stato approvato nel 2008.

   Rischio di contaminazione microbiologica: Il colostro nel prodotto è pastorizzato; procedure rigorose riducono al minimo il rischio di contaminazione e i lotti di compresse vengono testati per lieviti, muffe, batteri coliformi, Enterobacteriaceae, stafilococchi, Salmonella e Listeria. Le vacche per la produzione di colostro provengono solo da paesi indenni da encefalopatia spongiforme bovina (BSE). Inoltre, si ritiene che i prodotti lattiero-caseari non abbiano infettività rilevabile e si ritiene improbabile che presentino alcun rischio se provengono da animali sani nelle stesse condizioni del latte raccolto per il consumo umano.

   Intolleranza al lattosio: l'estratto di colostro bovino generalmente contiene <10% di lattosio, rispetto a circa il 50% nel normale latte scremato in polvere; pertanto, è improbabile che l'intolleranza al lattosio sia un grave problema di sicurezza. Ci si possono aspettare segni clinici in esseri umani suscettibili a cui vengono somministrati 5-10 g di lattosio (Thorn et al, 1977). Ad una dose di estratto di colostro bovino di 10 g al giorno (2,8 g in più rispetto alla dose proposta in questo studio), un massimo di 1 g sarebbe di lattosio.

   Effetti collaterali. Nessun caso di morte è mai stato riportato negli studi sul BCP. Mentre la dose tipica è di 10 g/giorno [8-10] sono state studiate dosi fino a 10 g quattro volte al giorno[11]. Le reazioni avverse sono state poche e di lieve gravità. Nella maggior parte degli studi clinici sull'efficacia del colostro bovino non si sono verificati effetti avversi dimostrabili[9, 10, 12-15]. Quando si sono verificati, sono per lo più costituiti da nausea, vomito, flatulenza e lieve diarrea[8, 11, 14, 16, 17]. In uno studio, sono stati osservati aumenti moderati transitori dei livelli sierici delle transaminasi epatiche in volontari che hanno ricevuto concentrati di immunoglobuline bovine preparati contro E. coli (5/10) e rotavirus (2/10). Questo effetto è stato attribuito alle diete ricche di proteine ​​fornite in ospedale (13). Più recentemente, il colostro bovino è stato ben tollerato nelle persone con infezione da HIV per il trattamento della diarrea associata all'HIV (18).

   La somministrazione di colostro deve essere evitata in soggetti allergici al latte vaccino.

3. PROGETTAZIONE DI STUDIO

   Si tratta di uno studio esplorativo a braccio singolo, in aperto, prima e dopo per valutare l'effetto di 4 settimane di somministrazione di BCP sugli enzimi epatici sierici e sulla sindrome metabolica nei pazienti con NASH. I candidati saranno identificati tra i pazienti curati nel dipartimento di medicina e unità epatica dell'Hadassah Hebrew University Medical Center e verrà chiesto di firmare un consenso informato approvato prima dell'inizio di qualsiasi attività di studio. I partecipanti saranno seguiti nello studio con visite settimanali e per ulteriori 4 settimane dopo la conclusione del trattamento per valutare la sicurezza.

4. SELEZIONE E ISCRIZIONE DEI SOGGETTI

4.1. CRITERIO DI INCLUSIONE

4.1.1. NASH comprovata da biopsia (punteggio NAS ≥ 4) 4.1.2. Livelli sierici di ALT ≥ 30 (U/L) 4.1.3. Età 18-65 4.1.4. Trattamento del diabete fino a 2 farmaci orali, con dosi stabili per 2 mesi.

4.1.5. Se partecipa ad attività sessuali che potrebbero portare alla gravidanza, il volontario dello studio deve accettare che due metodi contraccettivi affidabili verranno utilizzati contemporaneamente durante la ricezione del farmaco specificato dal protocollo e per 1 mese dopo l'interruzione del farmaco.

NOTA: i metodi ormonali da soli non sono sufficienti. Almeno due dei seguenti metodi DEVONO essere utilizzati in modo appropriato a meno che non sia presente documentazione di menopausa, sterilizzazione o azoospermia:

• Preservativi (maschili o femminili) con o senza agente spermicida. - I preservativi sono raccomandati perché il loro uso appropriato è l'unico metodo contraccettivo efficace per prevenire la trasmissione dell'HIV
• Diaframma o cappuccio cervicale con spermicida
• spirale
• Contraccezione a base ormonale

I soggetti dello studio che non hanno potenziale riproduttivo (ragazze che non hanno raggiunto il menarca o donne in post-menopausa da almeno 24 mesi consecutivi o che sono state sottoposte a isterectomia e/o ovariectomia bilaterale sono ammissibili senza richiedere l'uso di contraccettivi. La documentazione scritta o orale comunicata dal medico o dal personale del medico è richiesta da uno dei seguenti soggetti:

• Rapporto/lettera del medico
• Rapporto operativo o altra documentazione di origine nella cartella clinica del paziente (è necessario un rapporto di laboratorio sull'azoospermia per documentare il successo della vasectomia)
• Riepilogo delle dimissioni
• Rapporto di laboratorio di azoospermia
• Misurazione dell'FSH elevata nel range della menopausa come stabilito dal laboratorio refertante.

4.1.6. Capacità e disponibilità del soggetto o del tutore/rappresentante legale a fornire il consenso informato.

1. CRITERI DI ESCLUSIONE

io. Gravidanza o allattamento

ii. Uso continuo dei seguenti farmaci per più di 3 giorni entro 30 giorni dall'ingresso nello studio:

1. Immunosoppressori
2. Modulatori immunitari
3. Glucocorticoidi sistemici
4. Agenti antineoplastici
5. Insulina III. Uso o dipendenza attiva di droghe o alcol che, secondo l'opinione del ricercatore del sito, interferirebbe con l'aderenza ai requisiti dello studio.

iv. Malattia grave che richiede trattamento sistemico e/o ricovero in ospedale entro 30 giorni prima dell'ingresso.

v. Operazione nei 3 mesi precedenti. VI. Una grave malattia infettiva, cardiaca, polmonare o nefrologica vii. Allergico al latte vaccino o intollerante al lattosio.

2. TRATTAMENTO IN STUDIO

un. REGIME, AMMINISTRAZIONE E DURATA

io. Regime di trattamento per protocollo

I soggetti riceveranno un trattamento con BCP 1,8 grammi (3 capsule) per 4 settimane e saranno quindi monitorati fuori dal trattamento in studio per altre 4 settimane.

ii. Studiare le modifiche al trattamento

Non saranno consentite riduzioni della dose. Tutte le modifiche del farmaco in studio saranno documentate e registrate.

b. STUDIO FORMULAZIONE E PREPARAZIONE DEL PRODOTTO

Il farmaco in studio viene fornito in compresse confezionate singolarmente in blister. Ogni compressa da 1,2 g contiene 600 mg di BCP liofilizzato proveniente da bovine immunizzate all'insulina come unico componente attivo, in combinazione con eccipienti tra cui silice colloidale anidra, magnesio stearato, cellulosa microcristallina e carbonato di calcio. Il prodotto può essere conservato a temperatura ambiente e ha una durata di conservazione di 5 anni.

c. FARMACIA: FORNITURA, DISTRIBUZIONE E RESPONSABILITÀ DEL PRODOTTO

io. Studiare l'acquisizione/distribuzione del prodotto

Il BCP sarà fornito da Immuron e sarà conservato e distribuito dalle farmacie di ricerca presso l'Hadassah Hebrew University Medical Center.

ii. Studia la responsabilità del prodotto

Il farmacista del sito è tenuto a conservare registrazioni complete di tutti i prodotti dello studio.

d. FARMACI CONCOMITANTI

io. Linee guida generali

Non ci sono restrizioni specifiche imposte dal protocollo sui farmaci concomitanti, diverse da quelle stabilite nei criteri di inclusione/esclusione. Tuttavia, ogni volta che viene iniziato un farmaco concomitante o un agente dello studio o viene modificata una dose, i ricercatori esamineranno i foglietti illustrativi più recenti dei farmaci concomitanti e degli agenti dello studio, le brochure dello sperimentatore o le informazioni aggiornate da fonti online per ottenere le informazioni più aggiornate su Interazioni farmacologiche, controindicazioni e precauzioni.

ii. Farmaci vietati

Uso dei seguenti farmaci per più di 3 giorni entro 30 giorni dall'ingresso nello studio: insulina, immunosoppressori, immunomodulatori, agenti antineoplastici, glucocorticoidi.

e. VALUTAZIONE DI ADERENZA

Ad ogni visita, ai partecipanti verrà chiesto il numero di dosi del farmaco in studio perse dall'ultima visita.