利妥昔单抗 (RTx) 诱导和活体捐献对肾移植免疫调节和病毒控制的影响

客观的。 血型不相容 (ABOi) LD 肾移植代表了德国公认的治疗方式。 在这种情况下，伦理方面的考虑允许对 Rtx 诱导治疗的短期和长期免疫学和病毒学影响进行详细研究，包括序贯方案活检。 在拟议的项目中，我们将对外周血、髂淋巴结和方案活检进行分析。 在吉森大学和弗莱堡大学移植后 3 个月和 12 个月常规进行活检方案。 在这项前瞻性开放试验研究中，将比较 RTx 治疗的 ABOi LD 肾移植受者（n=25-30，第 1 组）和血型相容的 LD 肾移植物结果的免疫学参数和多瘤病毒、EBV 和 CMV 复制的控制没有 Rtx 诱导的移植受者（n=25-30，第 2 组）但在其他方面进行了相当的免疫抑制治疗（MPS 和 Tacr，在移植后 2 周内转换为 Tacr-MR（改良释放）；随访 5 年）。 将在用 Tacr（转换为 Tacr-ME）和 MPS（n=25-30，第 3 组）治疗的 DD 肾移植受者中进行相同的分析。 该研究设计允许分析活体捐献对免疫调节和病毒控制的影响（第 2 组与第 3 组）。

背景。 越来越多的证据表明，体液机制在慢性同种异体移植物功能障碍中起主要作用，这被证明与针对人类白细胞抗原 (HLA) 的供体特异性抗体的从头形成显着相关。 然而，B 细胞似乎不仅在针对移植物的体液反应中发挥作用，而且由于它们作为有效抗原呈递细胞的作用，可能在 T 细胞介导的抗供体反应中发挥重要作用。 Rtx 对主要由 T 细胞介导的疾病如类风湿性关节炎或多发性硬化症有效这一事实进一步表明了这一点。

假设/具体目标。 我们假设 Rtx 诱导可能会改变肾移植后的短期和长期免疫调节，并有可能改善长期结果。 Rtx 诱导的移植物保护作用可能由 B 细胞耗竭和由此产生的对体液和 T 细胞反应的影响以及 B 细胞再增殖后反应的改变提供。 将分析 Rtx 对多瘤病毒和 CMV 控制的可能负面影响，以及对 EBV 复制、新发单克隆丙种球蛋白病和淋巴瘤生长因子（白细胞介素 6 和 10（IL-6、IL-10））调节的保护作用。 此外，外周血中的 B 细胞亚群分析以及 Rtx 对移植物引流髂淋巴结中 B 细胞耗竭的可能相关影响可能使我们能够建立优化的 Rtx 剂量，从而使 ABOi 肾移植成功，而不会出现目前观察到的 15% 的脱落率.

初步结果。 我们进行的临床研究显示了免疫参数的预测能力，例如调节性抗 Fab 自身抗体、sCD30、CD4（分化簇 4）辅助活性，以及​​ CD4 细胞 IL-4（白细胞介素 4）和 IL-10（白细胞介素 10）对移植结果的反应。 将分析 Rtx 诱导治疗和活体捐献对这些参数的长期影响。

以前，我们发现有患多瘤病毒肾病风险的患者可能会在移植后早期通过连续逆转录酶聚合酶链 (rt-PCR) 评估尿液中的多瘤病毒复制来识别。 尿液和血浆中多瘤病毒复制的连续 rt-PCR 测试将用于分析 Rtx 诱导对多瘤病毒控制的影响。

建议的方法。 将主要分析移植前、移植后 3 个月和 1、2 和 5 年的免疫参数。 流式细胞术（包括调节性 T 细胞、B 细胞亚群、细胞因子受体的表达、共刺激和粘附分子）、有丝分裂原刺激的同种异体共培养、蛋白 A 斑块测定（B 细胞反应、CD4 辅助活性）、CD4+ 和细胞内细胞因子分析将使用 CD8+（分化簇 8）T 细胞、B 细胞和单核细胞、用于病毒学研究的 rt-PCR（BKV、JCV、CMV、EBV）和髂淋巴结免疫荧光染色（在移植时获得）和方案活检. 将使用淋巴细胞毒性、HLA I 类和 II 类 ELISA 以及 Luminex 测定检测供体特异性抗体。 供体特异性将通过 T 细胞和 B 细胞与供体细胞的交叉配血来确认。 调节性 IgG（免疫球蛋白 G）和 IgA（免疫球蛋白 A）抗 Fab 自身抗体、新蝶呤和 sCD30 将通过 ELISA 进行评估。

预期成绩。 我们预计 Rtx 诱导将显示对移植结果的免疫学参数的影响，例如从头移植后抗供体 HLA 抗体形成。 这项初步研究可能会通过为患者量身定制的免疫抑制疗法，改善具有免疫风险参数的受者的长期肾移植结果。 在 ABOi 肾移植中，这项研究可以通过允许基于预期剂量反应分析（血液和移植物引流淋巴结中的 B 细胞亚群分析）优化 Rtx 剂量来防止目前 15% 的退出率。 此外，该研究将允许评估 Rtx 给药对 CMV 和多瘤病毒复制的风险，并可能提供有关防止 EBV 复制和移植后淋巴组织增生性疾病的线索。 后一点对于具有增强的 PTLD（移植后淋巴增生性疾病）风险的患者具有重要的临床意义，例如 EBV 阳性移植物的 EBV 阴性接受者。