Impact van rituximab (RTx)-inductie en levende donatie op immunoregulatie en viruscontrole bij niertransplantatie

Objectief. Bloedgroep incompatibele (ABOi) LD niertransplantatie is een erkende behandelingsmodaliteit in Duitsland. In deze setting maken ethische overwegingen een gedetailleerde studie mogelijk van de immunologische en virologische effecten op korte en lange termijn van Rtx-inductietherapie, inclusief sequentiële protocolbiopsieën. In het voorgestelde project zullen we analyses uitvoeren op perifeer bloed, iliacale lymfeklieren en protocolbiopsieën. Protocolbiopsies worden routinematig verkregen 3 en 12 maanden na transplantatie aan de universiteiten van Giessen en Freiburg. In deze prospectieve, open pilootstudie zullen immunologische parameters van transplantaatuitkomst en controle van polyomavirus-, EBV- en CMV-replicatie worden vergeleken tussen met RTx behandelde ABOi LD niertransplantaatontvangers (n=25-30, groep 1) en bloedgroep-compatibele LD niertransplantaten. transplantatieontvangers zonder Rtx-inductie (n=25-30, groep 2) maar verder vergelijkbare immunosuppressieve behandeling (MPS en Tacr, overstappen op Tacr-MR (gemodificeerde afgifte) binnen 2 weken na transplantatie; follow-up van 5 jaar). Dezelfde analyses zullen worden gedaan bij DD-niertransplantatiepatiënten die zijn behandeld met Tacr (overstappen op Tacr-ME) en MPS (n=25-30, groep 3). Deze onderzoeksopzet laat toe om de impact van levende donatie op immunoregulatie en viruscontrole te analyseren (groep 2 versus 3).

Achtergrond. Er zijn steeds meer aanwijzingen dat humorale mechanismen een belangrijke rol spelen bij chronische transplantaatdisfunctie, waarvan werd aangetoond dat deze significant verband houdt met de novo-vorming van donorspecifieke antilichamen tegen menselijke leukocytenantigenen (HLA). B-cellen lijken echter niet alleen te werken in humorale reacties tegen het transplantaat, maar kunnen een significante rol spelen in T-cel-gemedieerde antidonorreacties vanwege hun rol als effectieve antigeenpresenterende cellen. Dit wordt verder gesuggereerd door het feit dat Rtx effectief is bij voornamelijk door T-cellen gemedieerde ziekten zoals reumatoïde artritis of multiple sclerose.

Hypothese/specifieke doelen. We veronderstellen dat Rtx-inductie de immunoregulatie op korte en lange termijn na niertransplantatie kan veranderen, met het potentieel om de uitkomst op lange termijn te verbeteren. Transplantaatbeschermende effecten van Rtx-inductie kunnen worden verschaft door B-celdepletie en de resulterende effecten op zowel humorale als T-celreacties, en ook door veranderde reacties na herpopulatie van B-cellen. Mogelijke negatieve effecten van Rtx op polyomavirus- en CMV-controle, evenals beschermende effecten op EBV-replicatie, de-novo monoklonale gammopathie en regulatie van lymfoomgroeifactoren (interleukinen 6 en 10 (IL-6, IL-10)) zullen worden geanalyseerd. Bovendien kan subsetanalyse van B-cellen in perifeer bloed en de waarschijnlijk geassocieerde impact van Rtx op B-celdepletie in transplantaatdrainerende iliacale lymfeknopen ons in staat stellen om een ​​geoptimaliseerde Rtx-dosering vast te stellen en daarmee een succesvolle ABOi-niertransplantatie mogelijk te maken zonder de momenteel waargenomen 15% uitval. .

Voorlopige resultaten. We hebben klinische onderzoeken uitgevoerd die de voorspellende kracht aantonen van immuunparameters zoals regulatoire anti-Fab auto-antilichamen, sCD30, CD4 (cluster van differentiatie 4) helperactiviteit en CD4-cel IL-4 (interleukine 4) en IL-10 (interleukine 10) reacties op de uitkomst van het transplantaat. Het langetermijneffect van Rtx-inductietherapie en van levende donatie op deze parameters zal worden geanalyseerd.

Eerder ontdekten we dat patiënten met een risico op polyomavirusnefropathie vroeg na de transplantatie kunnen worden herkend door sequentiële reverse transcriptase polymerase chain (rt-PCR) beoordeling van polyomavirusreplicatie in urine. Sequentiële rt-PCR-testen van polyomavirusreplicatie in urine en plasma zullen worden gebruikt om de effecten van Rtx-inductie op polyomaviruscontrole te analyseren.

Voorgestelde methoden. Immuunparameters zullen voornamelijk vóór transplantatie, 3 maanden en 1, 2 en 5 jaar na transplantatie worden geanalyseerd. Flowcytometrie (inclusief regulatoire T-cellen, subgroepen van B-cellen, expressie van cytokinereceptoren, co-stimulerende en adhesiemoleculen), door mitogeen gestimuleerde allogene coculturen, proteïne-A-plaque-assay (B-celresponsen, CD4-helperactiviteit), intracellulaire cytokine-analyse van CD4+ en CD8+ (cluster van differentiatie 8) T-cellen, B-cellen en monocyten, rt-PCR voor virologische studies (BKV, JCV, CMV, EBV) en immunofluorescente kleuring van iliacale lymfeknopen (verkregen op het moment van transplantatie) en protocolbiopsieën zullen worden gebruikt . Donorspecifieke antilichamen zullen worden opgespoord met behulp van lymfocytotoxiciteit, HLA klasse I en II ELISA en Luminex assays. Donorspecificiteit zal worden bevestigd door T- en B-celkruisingen met donorcellen. Regulerende IgG (immunoglobuline G) en IgA (immunoglobuline A) anti-Fab auto-antilichamen, neopterine en sCD30 zullen worden beoordeeld door ELISA.

Verwachte resultaten. We verwachten dat Rtx-inductie een impact zal hebben op immunologische parameters van transplantaatuitkomst, zoals de-novo posttransplantatie antidonor HLA-antilichaamvorming. Deze pilootstudie kan zorgen voor verbeterde resultaten van niertransplantaten op de lange termijn bij ontvangers met immunologische risicoparameters dankzij op de patiënt afgestemde immunosuppressieve therapie. Bij ABOi-niertransplantatie kan deze studie de huidige uitvalpercentages van 15% voorkomen door een geoptimaliseerde Rtx-dosering mogelijk te maken op basis van de beoogde dosis-responsanalyse (B-celsubsetanalyse in bloed en transplantaatafvoerende lymfeklieren). Bovendien zal deze studie een risicoschatting mogelijk maken van Rtx-toediening met betrekking tot replicatie van CMV en polyomavirus, en kan het aanwijzingen geven met betrekking tot bescherming tegen EBV-replicatie en lymfoproliferatieve ziekte na transplantatie. Dit laatste punt is van groot klinisch belang bij patiënten met een verhoogd risico op PTLD (posttransplantatie lymfoproliferatieve ziekte), zoals EBV-negatieve ontvangers van EBV-positieve transplantaten.