Impact de l'induction du rituximab (RTx) et du don vivant sur l'immunorégulation et le contrôle des virus dans la transplantation rénale

Objectif. La transplantation rénale LD incompatible avec les groupes sanguins (ABOi) représente une modalité de traitement reconnue en Allemagne. Dans ce contexte, des considérations éthiques permettent une étude détaillée des effets immunologiques et virologiques à court et à long terme de la thérapie d'induction Rtx, y compris des biopsies de protocole séquentiel. Dans le projet proposé, nous effectuerons des analyses sur le sang périphérique, les ganglions lymphatiques iliaques et des biopsies protocolaires. Les biopsies protocolaires sont systématiquement obtenues 3 et 12 mois après la greffe aux universités de Giessen et de Fribourg. Dans cette étude pilote ouverte et prospective, les paramètres immunologiques du résultat de la greffe et du contrôle de la réplication du polyomavirus, de l'EBV et du CMV seront comparés entre les receveurs de greffe rénale ABOi LD traités par RTx (n = 25-30, groupe 1) et les rénaux LD compatibles avec le groupe sanguin receveurs de greffe sans induction Rtx (n = 25-30, groupe 2) mais traitement immunosuppresseur par ailleurs comparable (MPS et Tacr, passage à Tacr-MR (version modifiée) dans les 2 semaines suivant la greffe ; suivi de 5 ans). Les mêmes analyses seront effectuées chez les greffés rénaux DD traités avec Tacr (passer à Tacr-ME) et MPS (n = 25-30, groupe 3). Ce design d'étude permet d'analyser l'impact du don vivant sur l'immunorégulation et le contrôle viral (groupes 2 versus 3).

Arrière-plan. Il existe de plus en plus de preuves que les mécanismes humoraux jouent un rôle majeur dans le dysfonctionnement chronique de l'allogreffe, qui s'est avéré être significativement associé à la formation de novo d'anticorps spécifiques au donneur contre les antigènes leucocytaires humains (HLA). Cependant, les lymphocytes B semblent agir non seulement dans les réponses humorales contre le greffon, mais peuvent jouer un rôle important dans les réponses antidonneuses médiées par les lymphocytes T en raison de leur rôle de cellules présentatrices d'antigène efficaces. Ceci est en outre suggéré par le fait que Rtx est efficace dans des maladies principalement médiées par les lymphocytes T telles que la polyarthrite rhumatoïde ou la sclérose en plaques.

Hypothèse/objectifs spécifiques. Nous émettons l'hypothèse que l'induction de Rtx peut modifier l'immunorégulation à court et à long terme après une transplantation rénale avec le potentiel d'améliorer les résultats à long terme. Les effets protecteurs de la greffe de l'induction de Rtx peuvent être fournis par l'épuisement des lymphocytes B et les effets résultants sur les réponses humorales et des lymphocytes T, ainsi que par des réponses modifiées après le repeuplement des lymphocytes B. Les effets négatifs possibles du Rtx sur le contrôle du polyomavirus et du CMV ainsi que les effets protecteurs sur la réplication de l'EBV, la gammapathie monoclonale de novo et la régulation des facteurs de croissance des lymphomes (interleukines 6 et 10 (IL-6, IL-10)) seront analysés. De plus, l'analyse du sous-ensemble de cellules B dans le sang périphérique et l'impact probablement associé de la Rtx sur la déplétion des cellules B dans les ganglions lymphatiques iliaques drainant les greffons peuvent nous permettre d'établir un dosage Rtx optimisé et ainsi permettre une transplantation rénale ABOi réussie sans les 15 % d'abandons actuellement observés. .

Résultats préliminaires. Nous avons réalisé des études cliniques montrant le pouvoir prédictif de paramètres immunitaires tels que les auto-anticorps régulateurs anti-Fab, l'activité auxiliaire du sCD30, du CD4 (cluster de différenciation 4) et l'IL-4 des cellules CD4 (interleukine 4) et IL-10 (interleukine 10) réponses sur le résultat de la greffe. L'effet à long terme de la thérapie d'induction Rtx et du don vivant sur ces paramètres sera analysé.

Auparavant, nous avons constaté que les patients à risque de néphropathie à polyomavirus peuvent être reconnus tôt après la greffe par une évaluation séquentielle de la chaîne de polymérase inverse de la transcriptase inverse (rt-PCR) de la réplication du polyomavirus dans l'urine. Des tests rt-PCR séquentiels de la réplication du polyomavirus dans l'urine et le plasma seront utilisés pour analyser les effets de l'induction de Rtx sur le contrôle du polyomavirus.

Méthodes proposées. Les paramètres immunitaires seront analysés principalement avant la greffe, 3 mois et 1, 2 et 5 ans après la greffe. Cytométrie en flux (y compris les lymphocytes T régulateurs, les sous-ensembles de lymphocytes B, l'expression des récepteurs de cytokines, les molécules costimulatrices et d'adhésion), les cocultures allogéniques stimulées par un mitogène, le dosage de la protéine A sur plaque (réponses des lymphocytes B, activité auxiliaire des CD4), l'analyse des cytokines intracellulaires des CD4+ et Cellules T CD8+ (cluster de différenciation 8), cellules B et monocytes, rt-PCR pour les études virologiques (BKV, JCV, CMV, EBV) et coloration immunofluorescente des ganglions iliaques (obtenue au moment de la transplantation) et biopsies protocolaires seront utilisées . Les anticorps spécifiques au donneur seront détectés à l'aide des tests de lymphocytotoxicité, HLA de classe I et II ELISA et Luminex. La spécificité du donneur sera confirmée par une compatibilité croisée des cellules T et B avec les cellules du donneur. Les auto-anticorps anti-Fab IgG (immunoglobuline G) et IgA (immunoglobuline A) régulateurs, la néoptérine et le sCD30 seront évalués par ELISA.

Résultats attendus. Nous nous attendons à ce que l'induction de Rtx ait un impact sur les paramètres immunologiques du résultat de la greffe, tels que la formation de novo d'anticorps antidonneur HLA post-transplantation. Cette étude pilote pourrait permettre d'améliorer les résultats à long terme de la greffe rénale chez les receveurs présentant des paramètres de risque immunologiques grâce à un traitement immunosuppresseur adapté au patient. Dans la transplantation rénale ABOi, cette étude peut prévenir les taux d'abandon actuels de 15 % en permettant une posologie Rtx optimisée basée sur l'analyse dose-réponse prévue (analyse du sous-ensemble de cellules B dans le sang et les ganglions lymphatiques drainant la greffe). De plus, cette étude permettra d'estimer le risque d'administration de Rtx en ce qui concerne la réplication du CMV et du polyomavirus, et pourrait fournir des indices concernant la protection contre la réplication de l'EBV et la maladie lymphoproliférative post-transplantation. Ce dernier point est d'une grande importance clinique chez les patients présentant un risque accru de PTLD (maladie lymphoproliférative post-transplantation) tels que les receveurs EBV négatifs de greffons EBV positifs.